新型自动变速器的应用

本文通过介绍桥梁液压检测平台的Allison MD、HD、B系列自动变速器的结构和工作原理,做好自动变速器故障码的读取、清除和自动变速器的维护,以及操作的注意事项。

奶牛乳房炎四种致病菌PCR核酸免疫层析试纸条快速检测方法的建立及应用

为了开发检测导致奶牛乳房炎的无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和停乳链球菌这四种重要致病菌的PCR核酸免疫层析试纸条方法,本研究采用柠檬酸还原法制备10 nm的胶体金溶液,选用优化的10μL 1 mol/L碳酸钾溶液调节pH和5μL异硫氰酸荧光素抗体偶联金颗粒,并使用优化的封闭液(10%BSA、0.25%PEG2000、0.05%吐温-20、0.05%Triton-X100)进行封闭,将地高辛抗体和山羊抗鼠二抗分别喷涂在检测线和质控线上,烘干并组装成试纸条,进行细菌的纯培养物和鲜牛奶加样检测。结果显示,所制备的PCR核酸免疫层析试纸条和凝胶电泳均具有较好的特异性,最低检测限要比凝胶电泳高10倍,在模拟污染牛奶样品测试中,试纸条仍然具有很好的特异性且灵敏度比凝胶电泳的高。上述结果表明,本研究建立的PCR核酸免疫层析试纸条检测方法具有良好的临床应用潜力。

牛奶淀粉样蛋白A的原核表达及单克隆抗体制备

牛奶中血清淀粉样蛋白A(MAA)是表征奶牛乳腺炎的重要生物标志物,本研究构建了携带MAA基因的重组原核表达质粒pET28a-SUMO-MAA,采用大肠杆菌BL21(DE3)作为表达菌株,IPTG诱导表达,获得可溶性重组蛋白SUMO-MAA,用特异性SUMO酶切除重组蛋白上的SUMO标签后通过亲和层析纯化获得MAA。用纯化后的MAA免疫BALB/c小鼠,制备抗MAA的单克隆抗体并测定其效价和特异性。结果显示,本研究成功表达可溶性MAA蛋白,大小约为17 kDa,筛选出2株单抗均可与MAA蛋白反应,效价分别为1∶25600,1:51200。试验为后续开发牛奶中血清淀粉样蛋白的检测方法以及奶牛乳腺炎的诊断研究奠定重要基础。