PCOS患者MTHFR C677T基因多态性与胰岛素峰值后移的相关性研究

目的 探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者亚甲基四氢叶酸还原酶(methylene tetrahydrofolate reductase,MTHFR)C677T基因多态性与胰岛素峰值后移的关系,并分析不同基因型对胰岛素功能的影响。方法 选取2022年1月~2023年1月在佛山市南海区妇幼保健院就诊的PCOS患者191例,同时进行MTHFR基因C677T位点、胰岛素释放试验(insulin release test,IRT)和空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)检测。根据IRT峰值所在的时间点进行分组,峰值在120或者180min的患者纳入后移组(n=65),在30或者60min的纳入无后移组(n=126),比较两组基因型分布和等位基因频率的差异;分析组内不同基因型对FPG, IRT各时间点血清胰岛素水平、胰岛素抵抗指数(insulin resistance index,IRI)、胰岛素敏感指数(insulin sensitivity index,ISI)和胰岛素曲线下面积(area under the curve,AUC)的影响。结果 (1)后移组和无后移组MTHFR C677T三种基因型(CC,CT,TT)的分布为36.92%,40.00%,23.08%和61.11%,30.16%,8.73%;等位基因(C,T)的频率为56.92%, 43.08%和76.19%,23.81%,差异均有统计学意义(χ^(2)=12.47,15.06;P=0.020,0.000)。(2)单因素方差分析显示,无后移组三种基因型的空腹胰岛素(fasting insulin,Fins)和IRI差异有统计学意义(F=6.569,5.928,P=0.002,0.003);CT型、TT型均高于CC型[Fins:12.56(9.39,15.49),12.59(9.56,22.48) vs 8.75(5.43,13.50);IRI:2.75(1.96,3.53),3.16(2.01,4.83) vs1.87(1.28,3.03)],差异均有统计学意义(t=2.66~2.93, P=0.004~0.009)。(3)后移组三种基因型单因素方差分析显示,Fins和ISI差异有统计学意义(F=3.827,3.559,P=0.027,0.034),相比于CC型,CT型和TT型的Fins升高[13.00(9.29,20.74),13.92(7.84,18.03) vs 8.67(6.73,10.66)],而ISI降低[0.016(0.010,0.023),0.014(0.011,0.025) vs 0.022(0.018,0.033)],差异均有统计学意义(t=2.11~2.51, P=0.015~0.039)。结论 PCOS患者MTHFR C677T基因位点多态性与胰岛素峰值后移有关,基因突变患者Fins升高。在未发生峰值后移的患者中,基因突变者抵抗程度增加;而在峰值后移的患者中,基因突变者胰岛素敏感性降低。

降钙素原的克隆、表达及多抗制备

目的合成降钙素原的全长基因,表达出降钙素原的融合蛋白并制备多抗,为降钙素原(PCT)的功能研究及单抗制备提供有力的实验基础。方法采用多引物人工一步合成基因技术合成降钙素原的全长基因,克隆至原核表达载体pGEX-4T-1表达出重组蛋白,将初步纯化的蛋白免疫小鼠制备多抗并进行Western blot鉴定。结果成功表达降钙素原重组蛋白并制备其多抗,Western blot证实所制备的PCT多抗可与所获得的融合蛋白和病人血清发生特异性反应。结论成功表达降钙素原重组蛋白并制备其多抗,为明确降钙素原来源和病理生理作用的研究奠定了基础,以及为制备其单克隆抗体提供实验材料。

人巨细胞病毒部分抗原基因的克隆及表达

目的克隆表达人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)特异性强的抗原决定簇基因,制备特异性抗原。方法从感染HCMV的细胞上清液中提取病毒基因组DNA,用PCR扩增HCMVpp150(ppUL32)、gp52(UL44)、pp65(ppUL83)、ppUL80a蛋白IgM抗原决定簇编码区DNA序列,将其克隆至pMD-18T载体并测序,然后克隆至表达载体pGEX-4T-1诱导表达,采用免疫印迹法(Western blotting)检测表达产物的抗原性。结果经序列测定各基因片段序列正确,并在pGEX-4T-1表达载体中得到了高效表达,表达的融合蛋白经Western blotting和ELISA分析,具有良好的抗原性,能够与HCMVIgM阳性血清发生特异性反应。结论通过基因工程技术可以有效地获取纯度较高、特异性强的HCMV抗原,为HCMV感染者的早期诊断提供检测用抗原。

PCOS患者胰岛素释放试验峰值后移与胰岛素分泌总量及敏感性的特征分析

目的分析胰岛素释放试验(insulin release test,IRT)峰值后移的多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者的胰岛素分泌特征,探讨胰岛素峰值后移对胰岛素敏感度的影响。方法回顾性分析2019年11月~2021年12月在佛山市南海区妇幼保健院妇科就诊的PCOS患者120例。首次就诊时行空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)和IRT检测,根据IRT的峰值时间进行分组,峰值时间在30min为I_(30)组(n=30),在60min为I_(60)组(n=30),在120min为I_(120)组(n=30)和在180min为I_(180)组(n=30)。比较四组FPG和IRT各时间点血浆胰岛素水平的差异,通过公式计算出胰岛素敏感指数(insulin sensitivity index,ISI)、胰岛素抵抗指数(insulin resistance index,IRI)和胰岛素曲线下面积(area under the curve,AUC),比较这三个指标以及峰值的血浆胰岛素水平在四组的差异,通过Pearson相关性分析探讨峰值后移与胰岛素分泌总量和胰岛素敏感度指标的相关性。结果①单因素方差分析显示四组的FPG和30min的胰岛素水平差异无统计学意义(F=1.795,1.780,均P>0.05),但达峰时间影响空腹和60,120,180min的胰岛素分泌量,差异均有统计学意义(F=9.355~24.170,均P<0.05)。②四组ISI和AUC差异无统计学意义(F=1.906,0.492,均P>0.05),而IRI和峰值的胰岛素值从I_(30)组到I_(180)组均呈递增趋势,差异有统计学意义(F=10.360,5.140,均P<0.05)。③Pearson相关性分析表明ISI,AUC与峰值后移无相关性(r=-0.077,-0.014,均P>0.05),IRI和峰值的胰岛素水平与峰值后移呈显著正相关(r=0.359,0.335,均P=0.000)。结论PCOS患者胰岛素峰值后移对空腹和60,120,180min的胰岛素分泌量有影响;随着胰岛素峰值后移,峰值的胰岛素水平和胰岛素抵抗程度增加,但胰岛素敏感性和胰岛素分泌总量变化不明显。

孕中期游离雌三醇水平降低在预测孕妇围产期妊娠并发症中的意义

目的:探索孕中期血清游离雌三醇(UE3)水平降低在预测孕妇围产期妊娠并发症中的意义.方法:选取2016年5月~2018 年4月在我院孕15~20^+6周时行血清UE3水平检测并已在我院分娩的孕妇720例,将UE3 MOM<0.60定为UE3降低,共收取UE3 MOM <0.60的孕妇360例作为观察组, UE3 MOM≥0.60的孕妇360例作为对照组,追踪观察妊娠结局并进行比较.结果:观察组妊高症、胎盘早剥、胎膜早破、胎儿宫内窘迫、胎儿宫内发育迟缓和早产的发生率为8.89%、 9.17%、 7.50%、 12.22%、 11.39%和10.28%,均明显高于对照组的2.50%、 1.39%、1.39%、 2.78%、 5.83%和3.33%,两组比较有统计学差异;而在流产以及产后出血方面,两组对比差异没有统计学意义.结论:孕中期血清UE3的水平降低对孕妇围产期妊娠并发症有预测意义,检测孕中期血清UE3可以筛选出高风险人群,尽早地进行针对性的产前监测和孕期保健护理,以降低不良妊娠结局的发生率.

儿童重症肺炎患者凝血纤溶功能指标变化及分析

目的:分析儿童重症肺炎患者血小板计数(platelets,PLT)、凝血功能及纤溶功能指标变化的临床意义.方法:选取诊断为肺炎的儿科住院患者132例.按照肺部感染的程度将其分为普通肺炎组84例和重症肺炎组48例,选择同期门诊健康体检儿童70例作为对照组.所有研究对象清晨空腹采集静脉血进行凝血和纤溶功能检测,包括血浆凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血凝血酶原时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、血浆纤维蛋白原(fibrinogen,Fib)、D二聚体(D-Dimer,D-D)、抗凝血酶Ⅲ(Antithrombin III,AT3)和血小板计数.结果:普通肺炎组和对照组比较,PT、APTT、Fib和PLT四项差异均无统计学意义(P>0.05),但两者D-D、AT3差异有统计学意义(P<0.05).与另外两组比较,重症肺炎组AT3、PLT水平均低于普通肺炎组和对照组,PT、APTT、Fib和D-D则高于另外两个分组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:重症肺炎患儿容易发生凝血纤溶功能障碍,监控凝血纤溶功能指标对临床诊治有重要的意义.

妊娠早期甲状腺功能减退的危险因素研究

目的了解佛山地区孕妇妊娠早期甲状腺功能减退发病情况,并探讨甲状腺功能减退发病的危险因素。方法选取2015年3月至2016年3月在佛山市南海区妇幼保健院建档产检的2316例孕妇,使用化学发光法测定血清TSH、FT4水平并统计甲状腺功能减退的发病率,收集11种可能相关的因素,进行多因素Logistic回归分析。结果佛山地区孕妇早孕期甲状腺功能减退发病率为11.6%,多因素Logistic回归分析显示:吸烟/被动吸烟(OR=1.130,95%CI:1.001~1.320)、体重指数(OR=1.604,95%CI:1.275~1.482)、甲状腺过氧化物酶抗体(OR=5.281,95%CI:3.236~8.318)、碘过量(OR=3.726,95%CI:2.066~6.735)、高胆固醇(OR=2.005,95%CI:1.441~2.874)、高甘油三脂(OR=1.604,95%CI:1.129~2.280)6个因素为甲状腺功能减退的危险因素。结论佛山市孕妇妊娠早孕期甲状腺功能减退发病率高,应早筛查、早发现、早治疗,以保障母婴的良好结局;甲状腺功能减退发病可能与吸烟/被动吸烟、体重指数、甲状腺过氧化物酶抗体、碘过量、高胆固醇、高甘油三脂有关。

多囊卵巢综合征患者血清性激素水平与胰岛素释放峰值后移的相关性研究

目的探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者血清性激素水平与胰岛素释放峰值后移的相关性。方法选取2019年11月~2021年1月在佛山市南海区妇幼保健院生殖健康科就诊PCOS患者120例,行胰岛素释放试验(insulin release test,IRT)和血清性激素检测。血清性激素检测包括雌二醇(estradiol,E2)、孕酮(progesterone,PG)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)、泌乳素(prolactin,PRL)和睾酮(testosterone,T)。根据IRT结果进行分组,峰值时间在30或者60min,纳入无峰值后移组(n=60),峰值时间在120或者180 min,纳入峰值后移组(n=60)。比较两组血清性激素水平的差异,并分析性激素水平与胰岛素释放峰值后移的相关性。结果峰值后移组血清LH和FSH水平高于无后移组(t=2.369,2.066,P=0.019,0.041),血清E2峰值后移组低于无后移组(t=2.157,P=0.033),差异均有统计学意义;两组血清PG,PRL和T比较差异无统计学意义(Z=0.458,P=0.648;t=0.089,P=0.930;t=0.191,P=0.850)。Pearson相关性分析结果表明血清PG,PRL和T与胰岛素释放峰值后移无相关性(r=-0.042,0.008,0.018,均P>0.05),LH和FSH与胰岛素释放峰值后移呈显著正相关(r=0.213,0.187,均P<0.05),而E2与胰岛素释放峰值后移呈显著负相关(r=-0.195,P<0.05)。结论PCOS患者峰值后移与血清E2,LH,FSH存在相关性,可为阐明胰岛素释放峰值后移的机制提供参考依据。

三种常见地中海贫血基因型对糖耐量异常孕妇HbA1c测定的影响

目的:探讨携带三种常见地中海贫血(简称地贫)基因型对糖耐量异常孕妇糖化血红蛋白A1c(HbA1c)检测的影响。方法:选择2018年11月~2020年11月在南海区妇幼保健院产科规律产检,于24~28周行葡萄糖耐量试验,确诊为糖耐量异常的单胎妊娠妇女120例进行病例对照研究,按携带基因类型分为α-SEA型组30例、IVS-Ⅱ-654型组30例、CD41-42型组30例,未携带对照组30例。检测同时期空腹血糖(FPG)、血液学指标和HbA1c值。结果:α-SEA型组、IVS-Ⅱ-654组、CD41-42型组和未携带对照组HbA1c(%)分别为5.44±0.49、538±0.57、5.28±0.52和5.61±0.47,三个地贫携带组均低于未携带对照组,CD41-42型组最低,但单因素方差分析差异并不具有统计学意义(P>0.05);FPG也不具有统计学意义(P>0.05);血液学指标具有统计学意义(P<005)。结论:糖耐量异常孕妇单一携带α-SEA、IVS-Ⅱ-654或者CD41-42三种常见地贫基因型时,HbA1c结果略低于非携带组,并不影响HbA1c在糖耐量异常孕妇中的使用。

高龄孕妇唐氏筛查-产前诊断序贯方案的选择与评估

目的探讨适宜高龄孕妇唐氏综合征(DS)筛查-产前诊断的序贯方案。方法选取2013年1月至2016年9月于佛山市南海区妇幼保健院妇产科接受早期、中孕期DS血清学筛查以及无创DNA产前检测的3012例高龄孕妇为研究对象。在不同的孕周分别进行早期、中孕期DS血清学筛查以及无创DNA产前检测,对血清学筛查风险值≥l/270或者无创DNA结果高风险的孕妇,均建议行羊膜腔穿刺染色体检查,以确诊胎儿是否为DS;对未接受羊膜腔穿刺染色体检查的孕妇,采用电话随访方式随访其妊娠结局。将这3012例孕妇的筛查结果按照两种序贯方案进行模拟筛查(早期血清学筛查-无创DNA产前检测-染色体核型分析;(2)中期血清学筛查-无创DNA产前检测-染色体核型分析)。分别计算两种方案的假阳性率和筛查效率并进行统计学比较。结果当选择方案(1)时,3012例高龄孕妇中,产前筛查高风险孕妇256例,18例最终被确诊为DS,筛查的假阳性率和筛查效率分别为7.90%和7.03%;而当选择方案(2)时,筛查的假阳性率和筛查效率分别为15.10%和3.81%,两种方案相比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论相比中期血清学筛查-无创DNA产前检测方法,采用早期血清学筛查-无创DNA产前检测的序贯筛查方案,具有更高的筛查效率,有较高的临床应用价值。

不育症患者染色体核型与生殖激素水平分析

目的研究分析不育症患者染色体核型与生殖激素水平的变化。方法对348例无精或少弱精子症患者抽取外周血进行生殖激素水平和染色体核型检查。结果无精子症患者的FSH和LH水平明显高于正常对照组,差异显著(P<0.05),而T水平低于正常对照组,差异显著(P<0.05)。PRL及E2无明显差异。而少弱精子患者的生殖激素水平与正常对照组差异无统计学意义。348例无精子症患者中检出染色体异常93例,检出率为26.72%。其中性染色体异常61例,占总染色体异常的65.59%;常染色体异常32例,占34.41%。结论无精子症与染色体异常和生殖激素水平密切相关。

3165例羊水染色体核型结果的分析

目的探讨羊水细胞培养及染色体核型分析技术在产前诊断中的应用及其重要性。方法有不同产前诊断指征的孕16-24w的孕妇,在B超定位引导下抽取羊水标本进行羊水细胞和染色体核型分析。结果 3165例羊水标本,检测出异常核型177例,异常率为5.6%。其中21-三体107例(60.5%),18-三体19例(10.7%),13-三体1例(0.6%),性染色体异常18例(10.2%),染色体结构异常32例(18.8%)。结论对具有产前诊断指征的孕妇进行羊水染色体检查,是重要的产前诊断方法,可以避免染色体异常患儿出生,达到优生优育,提高我国人口素质。