非洲猪瘟病毒多基因家族MGF360-13L基因功能的初步研究

旨在初步探究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)多基因家族MGF360-13L基因的功能。使用生物信息学软件对MGF360-13L基因进行分析;构建真核表达质粒pVAX1-MGF360-13L并转染至293T细胞进行表达;利用同源重组方法构建基因缺失毒株ASFV-ΔMGF360-13L,以相同的感染复数(MOI=0.01)在猪肺泡巨噬细胞(PAMs)中感染基因缺失毒株和亲本毒株(ASFV CN/GS/2018)后,利用红细胞吸附试验(HAD)计算病毒滴度并绘制体外生长曲线;以MOI=1将ASFV-ΔMGF360-13L和ASFV CN/GS/2018分别感染猪骨髓巨噬细胞(BMDM),利用qPCR和ELISA测定细胞炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平。结果表明,MGF360-13L基因在ASFV基因Ⅱ型中相对保守,编码蛋白属于非分泌型、无跨膜区、亲水性好;构建的真核表达质粒pVAX1-MGF360-13L被293T细胞表达;成功获得MGF360-13L单基因缺失毒株ASFV-ΔMGF360-13L,与ASFV CN/GS/2018相比,其体外复制没有显著性差异;在ASFV-ΔMGF360-13L感染BMDM后,IL-1β、IL-6和TNF-α炎性细胞因子在转录和分泌水平都显著高于ASFV CN/GS/2018。本研究成功制备了ASFV的MGF360-13L基因缺失毒株,并证实了MGF360-13L基因作为ASFV复制非必需基因具有抑制炎性因子表达的功能,这为进一步注释ASFV MGF360-13L基因功能提供了线索。

小尾寒羊绵羊痘病例的诊断

旨在对甘肃某羊场小尾寒羊疑似绵羊痘进行确诊,并深入探讨其病理变化特点。对临诊疑似患绵羊痘的小尾寒羊进行了羊痘间接ELISA抗体检测和PCR检测确诊,并对6只病羊进行病理剖检、病理组织学和超微结构研究。结果如下:羊痘间接ELISA抗体检测显示6例病羊样品均为阳性;同时,对2例病羊样品进行PCR检测,均扩增出绵羊痘病毒(SPV) 585 bp的目的基因片段,表明本次小尾寒羊所患疫病为绵羊痘。病理剖检显示,病羊皮肤无毛或少毛处充血,局部有红斑和坏死,尾部常有感染化脓形成溃疡;消化道黏膜,尤其舌和瘤胃黏膜有大小不等痘疹与坏死病灶,局部甚至形成糜烂或溃疡。肺膈叶以及肝、脾等常有痘疹和坏死病灶。病理组织学观察显示,肺痘疹病灶主要呈现渗出-增生结节和坏死-增生结节变化,病灶内血管、细支气管等周围常有大量绵羊痘细胞,胞质内有嗜酸性包涵体;病变消化道黏膜局部,上皮细胞程度不等增生、水泡变性,固有层及黏膜下层充血、水肿,有大量绵羊痘细胞,其细胞质内包涵体明显。肝、脾、肾也有程度不等坏死-增生结节变化。肺超微结构观察显示,肺泡上皮细胞肿大,细胞核浓缩、染色质聚集,线粒体程度不等肿胀、嵴断裂、空泡化,可见细胞质内包涵体。研究证明,除局部皮肤病变外,消化道黏膜和肺等实质器官的痘疹病变是患绵羊痘小尾寒羊具代表性的病理变化,尤其痘疹病灶中大量绵羊痘细胞的出现具有证病性意义。

沙冬青种子总黄酮对小鼠免疫器官淋巴细胞活性的影响

【目的】探索沙冬青种子总黄酮对小鼠免疫器官淋巴细胞活性的影响.【方法】将50只试验小鼠随机分为空白组、免疫抑制组、黄酮Ⅰ组、黄酮Ⅱ组及黄酮Ⅲ组,每组10只,灌胃给药.试验28 d后,分别测定脏器指数(胸腺、脾脏)并采集样品进一步采用石蜡包埋切片和染色技术、免疫组织化学分析技术等,探讨胸腺、脾脏中淋巴细胞活性的变化.【结果】小鼠免疫抑制模型复制成功,CTX显著诱导小鼠免疫器官淋巴细胞凋亡.同时,不同剂量沙冬青种子总黄酮灌胃试验组,能不同程度促使免疫抑制小鼠脾脏和胸腺淋巴细胞增殖,进而促使胸腺皮质和脾脏白髓面积增大,尤其总黄酮灌胃剂量150 mg/(kg•d)组小鼠表现最明显,胸腺皮质和脾脏白髓面积分别达到(83.11±1.25)μm^(2)、(47.00±1.55)μm^(2),显著高于免疫抑制组(P<0.01).免疫组化分析显示,不同剂量沙冬青种子总黄酮灌胃试验组,能不同程度促使免疫抑制小鼠脾脏和胸腺CD3阳性T淋巴细胞及CD20阳性B细胞增殖,尤其在总黄酮灌胃剂量150 mg/(kg•d)组增殖效果最突出,均显著高于免疫抑制组(P<0.01).【结论】沙冬青种子总黄酮可显著促进免疫抑制小鼠T、B淋巴细胞增殖,修复受损免疫器官,从而改善和增强机体免疫功能.

培养孩子管理情绪的能力

一朋友曾对我说:“我八岁时,父母离婚,然后我就和我妈一起生活。我的噩梦从此开始。我妈妈情绪不稳定,我无法猜测接下来妈妈的情绪会怎样。妈妈的坏情绪给我的心灵带来了阴影,所以我一直过得不幸福。”她的一席话使我觉得,好脾气是人生的一笔大财富,父母给予孩子最好的财富并不是金钱和地位。如果孩子是上天赐给我们的礼物,那么做父母的能回馈孩子什么呢?我想教会孩子控制自己的情绪,并培养孩子管理情绪的能力,这是父母能送给孩子的最好财富。那么怎样培养孩子管理情绪的能力呢?

仔猪伪狂犬病的诊断与病理解剖学研究

为了确诊伪狂犬病并探讨其系统病理变化特点,对甘肃某猪场疑似患猪伪狂犬病仔猪进行病原分离、荧光定量PCR检测和系统病理剖检、病理组织学和超微结构研究。结果显示,从5例患病仔猪组织中未分离出致病菌,脑组织悬液接种家兔后出现明显神经症状和死亡;荧光定量PCR检测显示,5例样品均为猪伪狂犬病病毒核酸阳性,表明该猪场仔猪所患疫病为猪伪狂犬病。病理学检测显示,患病仔猪组织呈败血性变化,实质器官有粟粒大小坏死灶;脑组织出血、水肿;扁桃体黏膜有出血和坏死;在显微镜下,患病仔猪的实质器官散在细胞核碎片性坏死灶,其内有炎性细胞;肺呈间质性肺炎,上皮细胞有嗜酸性核内包涵体;扁桃体黏膜与隐窝上皮变性,有嗜酸性核内包涵体;大脑呈非化脓性脑炎,变性神经细胞内有嗜酸性核内包涵体。电镜下,肺泡上皮细胞肿大,核浓缩或破碎,线粒体肿胀、嵴断裂和空泡化,细胞内有包涵体;扁桃体隐窝上皮细胞核染色质边集,细胞内有包涵体。结果证明,仔猪所患伪狂犬病。