全胸腔镜经主动脉切口行改良Morrow术的可行性

目的探索全胸腔镜经主动脉切口行改良Morrow术的可行性及早期效果。方法收集梗阻性肥厚型心肌病(HCM)患者13例,男性9例,女性4例,年龄(59.3±13.3)岁(30~77岁),术前室间隔厚度为(1.83±0.21)mm、左心室流出道峰值压差(LVOTGP)为(76.90±27.61)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),收缩期前向运动(SAM)征均阳性。患者均接受全胸腔镜下经主动脉切口行改良Morrow术,同期行二尖瓣二孔成形术3例。结果全组手术成功,无中转开胸,术中主动脉阻断时间(93.00±18.68)min,体外循环时间(137.70±20.49)min,术后气管插管时间(10.70±4.30)h。术后室间隔厚度为(1.18±0.26)mm、LVOTGP为(13.46±9.46)mmHg,均较术前降低,差别有统计学意义(P<0.001)。术后二尖瓣均为轻微反流,无中度以上反流,SAM征消失。随访3~12个月,临床症状改善,患者无死亡,无室间隔穿孔、左心室流出道残留梗阻和Ⅲ度房室传导阻滞。结论全胸腔镜入路经主动脉切口可更好地暴露梗阻的室间隔组织,保留胸廓的完整性,避免损伤二尖瓣前叶,早期效果良好,是一种良好的手术入路方式。

基于WGCNA和机器学习方法筛选冠脉搭桥术后氧化应激相关的核心基因

目的 利用加权基因共表达网络分析(WGCNA)和机器学习方法,筛选出冠脉搭桥(CABG)术后氧化应激(OS)相关的核心基因,并预测治疗心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的靶向药物。方法 从GEO数据库CABG术前、术后心室组织表达谱,利用WGCNA得到术后最关联模块和基因,从而获得OS相关基因(OSRG),进一步富集分析。再通过最小绝对值收敛和选择算子(LASSO)回归和随机森林算法,筛选出冠脉搭桥术后核心OSRG,术前术后差异表达比较,预测靶向药物。结果 WGCNA结果得到32个CABG术后OSRG,富集分析结果显示这些基因主要参与细胞死亡调控、细胞程序性死亡、细胞凋亡、免疫过程以及多种信号通路的调节。机器学习筛选出3个核心OSRG:ATF3、JUN、VEGFA,其均在CABG术后上调表达(P<0.01)。并预测5种靶向药物。结论 本研究通过综合运用WGCNA和机器学习方法,成功筛选出CABG术后核心OSRG,这些核心基因术后均明显上调,通过诱导细胞死亡、免疫等方式,引起MIRI。

回弹法在建筑主体结构检测中应用研究

回弹法是一种常见的混凝土强度检测方法,对检测现场条件要求较低,检测速度较快,因而被广泛应用。本文首先介绍回弹法检测原理,并从材料、混凝土施工、试验操作几点分析回弹法检测的主要影响因素,最后依托实际工程,探讨回弹法在建筑主体结构检测中的应用。

封闭式博物馆室内空气颗粒物离子成分特征

采用气体悬浮物粒子监测仪和NanoMoudi-Ⅱ125A型分级采样器对某封闭式博物馆进行颗粒物数浓度监测和颗粒物采样,测定了不同粒径段颗粒物中的主要离子组分。结果表明,监测期间粗颗粒物（粒径≥2.5μm）、细颗粒物（粒径在0.1~2.5μm之间）和超细颗粒物（粒径≤0.1μm）质量浓度分别为20.50~24.38μg/m3、23.39~24.08μg/m3和16.02~17.48μg/m3。颗粒物数浓度集中在粒径≤0.3μm范围,PM1数浓度占PM10数浓度的97%以上,游客扰动和清洁活动使粗颗粒物数浓度增加了8~172倍。SO42-、NO3-、NH4＋峰值出现在0.32~0.56μm粒径段,Na＋、Cl-分布较平均,K＋峰值出现在0.32~0.56μm和3.2~5.6μm粒径段,Mg2＋的峰值出现在3.2~5.6μm粒径段,Ca2＋峰值出现在1.8~3.2μm粒径段;总有机酸根离子无明显峰值;乙酸根离子浓度为1.238μg/m3,高于甲酸根和乙二酸根。颗粒物的阳/阴离子比均值为2.83,说明阴离子测定可能有缺失,如碳酸盐等。颗粒物中水溶性离子浓度水平和粒径分布受游客影响不明显,受室外空气输送的影响较大。

诊断用苛求芽孢杆菌尿酸酶的剂型与储存方法

目的:考察重组苛求芽孢杆菌尿酸酶作为诊断试剂的剂型和储存方法。方法:将此重组尿酸酶制成干粉和液体剂型于-18℃和4℃储存,定期测定酶活性;在干粉制剂时加入保护剂于-18℃储存,在液体制剂时加入防腐剂于4℃储存,间隔适当时间监测酶活性。聚丙烯酰胺凝胶电泳分离此尿酸酶四聚体和二聚体,染色检测蛋白和酶活性。结果:此尿酸酶干粉和液体制剂在4℃储存28 d后对应的剩余酶活性分别为12%和100%,在-18℃冻存28 d后对应的剩余酶活性分别为24%和92%。在干粉制剂时加海藻糖、蔗糖或甘露醇作为保护剂于-18℃储存56 d后,剩余酶活性对应分别为100%、76%和43%。加叠氮钠或苯甲酸的液体制剂,在4℃储存56 d后对应的剩余酶活性分别为99%和82%。在-18℃储存至无活性的冻干粉制剂经非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,发现此尿酸酶主要以无活性二聚体存在而活性四聚体很少。结论:此尿酸酶作为诊断试剂,可加入叠氮钠制成液体剂型在4℃储存。

体外循环术后认知功能障碍患者的血清tau蛋白、β-淀粉样蛋白的测定及临床意义

目的探讨心脏体外循环术后患者血清tau蛋白、β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein, Aβ)含量与认知功能障碍(postoperative cognitive dysfunction, POCD)的相关性。方法筛选择期行心脏体外循环手术患者于术前1天、术后第7天全套量表法评估精神神经功能。分别于手术前5分钟、体外循环术后1、6、24小时以及术后第3天、第7天定时采取静脉血4 ml,酶联免疫吸附测定法检测血清Aβ1-40、Aβ1-42蛋白、tau蛋白水平。术后根据认知功能评估结果将所有患者分为POCD组以及非POCD组,应用统计学分析两组在每一种蛋白血清水平的差异,验证血清中三种蛋白对心脏低温体外循环术后认知功能障碍检测的准确性和可靠性。结果总计108例患者纳入统计,按量表评估结果,其中POCD 39例,非POCD 69例,POCD发生率为36.1%,围术期资料分析,年龄是POCD的危险因素(t=2.760,P=0.007 <0.05),与术前相比,术后患者POCD组血清tau蛋白、Aβ蛋白均有升高,但两组比较仅血清tau蛋白差异有统计学意义(P <0.05)。结论①年龄为术后认知功能障碍发生的重要高危因素;②心脏手术后POCD组患者血清tau蛋白明显高于非POCD组;③tau蛋白与术后认知功能障碍密切相关,其早期明显升高对于POCD的诊断有重要意义。

不停跳冠脉搭桥术后差异基因的生信分析

目的通过生信分析探讨不停跳冠脉搭桥(OPCAB)术后基因变化,并筛选关键(Hub)基因.方法通过纳入数据集GSE12485(心肌)和GSE4386(心房),使用R包对OPCAB术前术后心脏组织进行差异分析,筛选差异基因(DEGs).两组DEGs交集得到共同DEGs进一步分析,然后进行GO和KEGG功能富集分析.最后使用STRING进行蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)分析,通过Cytoscape软件中cytoHubba的Degree算法筛选Hub基因.结果共获得36个共同上调DEGs.GO和KEGG分析结果显示,OPCAB术后主要与炎症反应相关.PPI网络分析,并得到4个Hub基因.结论炎症反应在OPCAB术后起重要作用,而4个Hub基因均具有重要的价值,将为后续研究提供依据.

吡虫啉的酶联免疫吸附分析方法研究

通过碳二亚胺法将吡虫啉交联于牛血清蛋白(BSA)作为免疫抗原,混合酸酐法将吡虫啉交联于卵清蛋白(OVA)作为包被抗原,免疫Balb/c小鼠,采用B细胞杂交瘤技术,经免疫、融合、筛选、克隆,得到抗吡虫啉单克隆抗体,抗体亚类为IgG1,制备的单克隆抗体效价达1×107,确定了吡虫啉酶联免疫吸附分析方法(ELISA)的最佳工作条件,建立了定量测定吡虫啉的间接竞争ELISA方法。本方法的IC50为(15.12±1.28)μg/L,检出限为(1.76±0.02)μg/L。与其它吡虫啉结构类似物无交叉反应。批内相对标准偏差为4.5%;批间相对标准偏差5.1%,饮用水、重庆理工大学地下水和重庆市花溪河地表水平均添加回收率分别为102%,97%和85%。本研究建立了一种快速检测环境水中吡虫啉残留的方法。

HPV 16L1基因的原核表达及表达条件的优化

目的:构建HPV16L1基因的原核表达质粒,并优化其表达条件。方法:根据GeneBank中的HPV序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物,以含有HPV全长基因片段重组质粒为模板,经PCR扩增出1 500 bp的DNA片段。将所得片段与pGEX-KG载体连接,转化JM109大肠杆菌,筛选阳性克隆。其扩增片段测序结果与原序列一致,表明原核表达载体pGEX-KG-HPV16L1已构建成功。提取pGEX-KG-HPV16L1质粒转化到BL21(DE3)表达菌株中,经IPTG诱导后收集菌体,进行SDS-PAGE,Western Blot鉴定。结果:在大肠杆菌中获得HPV16L1基因融合表达,融合蛋白的相对分子量为83kDa;表达的蛋白能与抗HPV16L1抗体发生特异性反应。结论:HPV16L1基因在大肠杆菌中获得高效表达,为HPV16L1疫苗的研制奠定了基础。

上海某地铁站黑碳浓度水平及个体暴露特征

基于对职业环境空气污染物的个体暴露风险关注,在上海某地铁站进行了ρ(黑碳)的连续定点(新风井和车辆控制室)监测;同时对地铁工作人员进行个体黑碳暴露采样,并与定点监测的ρ(黑碳)比较,探讨个体采样在黑碳暴露研究中的作用.结果表明:某地铁站新风井处ρ(黑碳)与ρ(NO2)呈显著相关(R=0.75,P<0.05),而与ρ(PM10)无显著相关性(R=0.43,P>0.1);由ρ(黑碳)日变化及其在工作日和休息日的差异可知,地铁站内ρ(黑碳)可能与室外机动车尾气排放相关;与定点监测结果不同,个体黑碳暴露浓度波动范围大,出现了未在定点监测中观测到的极高值,并且个体黑碳暴露浓度的四分位差值(IQR)是定点监测结果的2倍;尽管车控室内平均个体黑碳暴露浓度较低,但由于个体72%的工作时间是在车控室内度过的,因此车控室的个体黑碳暴露剂量比非车控室环境高.

发光细菌冷冻干燥条件优化研究与应用

发光细菌用于水质毒性快速检测时,使用冷冻干燥制剂复苏发光细菌非常必要。配制冷冻干燥保护剂时,采用较低浓度脱脂牛奶(质量分数分别为4%、6%、8%、10%、12%)以及NaCl溶液(质量分数分别为0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%)进行双因素多梯度的实验,确定发光细菌的最佳冷冻干燥保护剂配方为12%脱脂牛奶以及2.0%NaCl溶液。采用复苏后的发光细菌,检测实际水样的毒性,结果与工业废水毒性评价结果相符。

原位杂交检测HPV-16E6,-18E6在喉癌组织中的表达

目的检测HPV L1和16/18DNA在喉癌组织中的表达,探讨HPV在喉癌发生中的作用。方法用原位杂交(ISH)检测123例喉癌组织及123例"正常人"的喉粘膜上皮组织中HPV-16/18 mRNA。结果在123例喉癌标本中,ISH检出HPV-16E6的阳性率为46.34%,HPV-18E6的阳性率为35.77%。123例"正常人"的喉粘膜ISH结果表明:低危型HPV的阳性率与喉癌相近;高危型HPV的阳性率虽远远低于喉癌,但随着组织病变程度加重阳性率逐渐升高。对上述结果用SPSS 10.0软件进行case-controlχ2分析,HPV-16感染会增加喉上皮病变的风险(OR=14.58),感染HPV-18时,喉上皮病变的风险(OR=10.77)。结论HPV-16感染是重庆地区喉癌的重要发病因素;HPV-16感染后E6片段的保留并持续表达与喉组织的癌变进程密切相关;HPV-16感染会增强喉上皮病变的风险,而HPV-18有协同作用。

浙江、上海环境污染第三方治理经验及对云南的启示

环境污染第三方治理当下正逐渐成为国内环境污染治理的主流趋势,浙江省、上海市在国内较早开展了环境污染第三方治理,取得了较好的成效。对浙江、上海的环境污染第三方治理工作进行调研,总结其成功经验,为云南省第三方治理市场建设提供经验借鉴与启示。

枇杷叶有效成分的研究进展

综述了枇杷叶的化学成分、药理作用及其应用研究进展,指出枇杷叶含有挥发油、三萜酸类、倍半萜类、皂苷类、黄酮类、多酚类、有机酸类等多种化学成分,具有止咳祛痰、降血糖、抗病毒和抗肿瘤等药理活性,有重要的开发利用价值.

感冒康注射液的制备及其质量控制

采用超滤法制备感冒康注射液,通过对质量进行控制来探究超滤法制备注射液的可行性,并对其制剂的澄明度、有效成分含量测定、pH值、杂质检查、无菌检查、安全试验进行检查.结果表明,所有试验均符合中国药典(2005年版)规定,所建立的超滤法可用于感冒康注射液的制备,且方法简便、快速.

阿司匹林栓剂制备工艺

用热熔法制备阿司匹林栓剂,并通过改变制备过程中冷凝方式、灌模温度等条件对该制剂稳定性进行考察.结果显示冷凝方式、灌模温度等条件对栓剂成形有直接影响,该制备工艺是合理、可行的.

HPV18E6基因的原核克隆及表达

目的:构建pET32a(+)HPV18E6原核表达质粒并优化其表达条件,探讨喉癌组织中HPV18E6蛋白的表达及意义。方法:应用基因重组技术,构建pET32a(+)与HPV18E6的原核表达重组质粒,采用PCR方法扩增HPV18E6基因,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后插入相同酶切pET32a(+)载体,转化JM109感受态细胞并进行阳性克隆筛选,用限制性内切酶酶切和核酸序列检测方法鉴定重组质粒DNA,将其转入宿主菌E.coli BL21(DE3),用IPTG对重组质粒进行诱导表达,SDS-PAGE及Western blot方法鉴定表达蛋白的分子质量及特异性。结果:成功构建了原核表达质粒Pet32/HPV18E6,限制性内切酶酶切和核酸序列检测证实重组质粒中插入的是目的基因,其DNA大小、方向、插入位点和阅读框架均正确;HPV18E6蛋白得到高效原核表达,表达HPV18E6的工程菌BL21(DE3)的最佳诱导温度是37℃,诱导剂IPTG的浓度为1mmol/L。结论:HPV18E6融合蛋白的表达为进一步深入研究HPV18E6蛋白的生物学特性及其致细胞转化的作用机制奠定了基础。

洱源县农作物产量对气候变化响应的敏感性分析

以洱源县为试点,采用农作物产量分解方法和气候生产潜力计算方法,定量分析农作物产量受历史气候变化影响的程度。分析结果显示:1952—2012年,洱源县温度生产潜力呈上升趋势,降水生产潜力呈下降趋势;气候生产潜力与研究时段年均温度相关系数为-0.11,与年均降水量相关系数为0.96,表明降水量是决定洱源县气候生产潜力的主导因子。研究表明,近60a来洱源县农作物产量受气候变化影响的程度正不断上升,以负面影响为主。