小鼠输卵管上皮类器官的构建及表型验证

目的·构建野生型(wild type,WT)小鼠和miR-34b/c^(−/−)且miR-449^(−/−)双敲除(double knockout,dKO)小鼠输卵管上皮类器官的培养体系,并进行表型验证。方法·利用酶消化法和差速贴壁法分离纯化WT小鼠和dKO小鼠输卵管上皮细胞,并利用免疫荧光法鉴定得到的输卵管上皮细胞的纯度;通过计数和直径测量比较WT小鼠和dKO小鼠输卵管上皮类器官数量、生长速度和生长大小;利用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,H-E)染色和透射电子显微镜(透射电镜)对输卵管上皮类器官进行形态和结构观察;采用免疫荧光法观察并统计纤毛细胞和分泌细胞在WT小鼠和dKO小鼠输卵管上皮类器官中的比例;采用免疫组织化学法、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting检测分泌细胞、纤毛细胞相关基因在输卵管上皮类器官中的表达。结果·分离纯化得到的输卵管上皮细胞纯度较高。与WT小鼠相比,dKO小鼠输卵管上皮类器官生长更快,体积更大,数量也更多;但dKO小鼠输卵管上皮类器官发育较慢,于培养28 d时才出现上皮内陷,而WT小鼠的类器官于培养16 d时已经出现。H-E染色和透射电镜结果显示输卵管上皮类器官呈现出与在体输卵管类似的结构。免疫荧光检测显示dKO小鼠输卵管上皮类器官的纤毛细胞显著减少而分泌细胞显著增多(均P<0.05)。免疫组织化学法检测结果显示,dKO小鼠输卵管上皮类器官的分子表达模式与在体输卵管组织基本一致,即纤毛细胞标志物乙酰化微管蛋白α(Ac-α-tubulin)、叉头框J1(forkhead box J1,FOXJ1)表达减少,分泌细胞标志物配对盒8(paired box 8,PAX8)表达增加;RT-qPCR结果显示dKO小鼠输卵管上皮类器官中Foxj1和微管蛋白β4A(tubulinβclassⅣa,Tubb4a)的mRNA水平均降低(均P<0.05),而Pax8 mRNA水平升高(P<0.05);Western blotting结果显示,dKO小鼠类器官中FOXJ1的蛋白表达水平显著降低,PAX8表达显著升高(均P<0.05)。结论·研究成功构建WT小鼠和dKO小鼠的输卵管上皮类器官培养体系,该体系可模拟小鼠在体输卵管的表型。

PID控制理论在国华站调压系统优化中的实际应用

PID调节控制是对控制系统调节能力分析的一种经典算法,在天然气调压站的实际应用中,多采用增量型PID控制方法进行调节。然而在实际应用中,由于控制的滞后性以及输气用户的特性,往往需要对调压系统进行针对性的调整。选取天然气国华电厂站作为研究对象,研究由供气特性及执行器滞后影响带来的调节发散问题。在分析了控制算法中比例、积分的调节作用基础上,通过提高执行器性能、调整调节参数,降低了信号阶跃带来的扰动,提高了调压系统的可靠性。

智能小车发展应用研究

智能小车是一种可以通过预先给予其特定的指令,从而使其完成预期目标的设备。智能小车可以在很大程度上减少人员的工作量,又因其自身良好的循迹、避障等功能,所以被广泛地应用于军事、医疗、物流、家居等领域。智能小车在智能制造领域的未来发展中有着不可或缺的地位。本研究针对智能小车的发展现状、应用领域进行市场调查,从经济、科技等方面对所采集到的信息进行数据分析,得出智能小车市场的应用及发展的主要走向与趋势,进一步研究未来智能小车的发展应用前景。

“棋师”爸爸

大家都说我长得像妈妈，一点也不像爸爸。每当这时，我总是争得面红耳赤：“我就像爸爸，爸爸会下象棋，我也会下象棋!”。