FABP-5基因沉默对宫颈癌SiHa细胞生物学特性的影响

背景:研究发现肿瘤相关基因以及肿瘤基因通路的改变在肿瘤的形成与发展中起重要作用。目的:探讨siRNA干扰技术沉默FABP-5基因表达对人宫颈癌SiHa细胞生物学特性的影响。方法:以人宫颈癌SiHa细胞为研究对象,根据FABP-5 mRNA编码序列设计并合成干扰si RNA序列,瞬时转染SiHa细胞。用RT-PCR和Western blot法分别从mRNA水平和蛋白水平检测FABP-5基因的表达;流式细胞技术检测各组细胞周期的变化;CCK-8法测定细胞体外增殖能力;细胞侵袭小室法检测各组细胞的体外侵袭力;TUNEL染色检测各组细胞的凋亡情况。结果与结论:与转染空病毒阴性对照组和未转染空白对照组比较,FABP-5 siRNA组FABP-5 mRNA和蛋白表达明显下降,细胞生长速度明显减慢,细胞周期阻滞在G_0/G_1期,S期细胞数减少,细胞侵袭力显著下降,细胞凋亡率明显升高。结果说明siRNA技术可以成功诱导FABP-5基因沉默,从而影响宫颈癌SiHa细胞的的生长、增殖和凋亡。

脐血间充质干细胞移植联合紫杉醇对卵巢癌A2780细胞增殖、凋亡及侵袭的影响

背景:深入进行卵巢癌肿瘤干细胞的研究,有助于以卵巢癌肿瘤干细胞为靶点,改进卵巢癌的治疗策略,提高卵巢癌的生存率。目的:探讨脐血间充质干细胞联合紫杉醇对卵巢癌A2780细胞增殖、凋亡、侵袭能力的影响。方法:将人卵巢癌A2780细胞分为3组:空白对照组(常规培养细胞)、脐血间充质干细胞组(加入1×10~6个脐血间充质干细胞悬液)、联合组(加入1×10~6个脐血间充质干细胞悬液的同时加入1μmol/L紫杉醇溶液250μL)。采用免疫荧光法检测卵巢癌A2780细胞CD133^+抗原表达,流式细胞仪、TUNEL染色法、Transwell小室侵袭实验检测卵巢癌A2780细胞的增殖、凋亡和侵袭能力。结果与结论:(1)空白对照组CD133^+阳性抗原表达量很多,明显高于脐血间充质干细胞组及联合组,差异有显著性意义(P<0.05);(2)联合组细胞增殖能力、侵袭能力明显减弱,凋亡细胞数明显增多,与其他两组比较差异有显著性意义(P<0.05);(3)结果表明,脐血间充质干细胞联合紫杉醇能抑制卵巢癌A2780细胞的增殖、侵袭,并促进其凋亡。

多囊卵巢综合征患者抗苗勒氏管激素与相关临床指标的关系

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者抗苗勒氏管激素(AMH)水平与体质指数(BMI)、激素及代谢指标的关系。方法将60例PCOS患者和30例不孕患者分为PCOS组1(BMI≥25kg/m2)、PCOS组2(BMI<25kg/m2),每组30例;对照组1(BMI≥25kg/m2)、对照组2(BMI<25kg/m2),每组15例。空腹采血并测定血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇、睾酮、血清AMH、空腹血糖和空腹血清胰岛素,计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),比较4组的上述指标并进行相关性分析。结果PCOS组AMH、LH、LH/FSH、睾酮、空腹胰岛素及HOMA-IR均高于对照组,PCOS组1和PCOS组2AMH差异无统计学意义,PCOS组1LH、LH/FSH低于PCOS组2,空腹胰岛素、HOMA-IR高于PCOS组2。PCOS组AMH与BMI无相关性。PCOS组1AMH与睾酮、空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR呈正相关,与雌二醇、FSH呈负相关;PCOS组2AMH与LH、LH/FSH、睾酮呈正相关(均P<0.05)。结论PCOS患者血清AMH显著升高,其升高与体质量无关,可能与激素紊乱和糖代谢紊乱有关。

肥胖与非肥胖型多囊卵巢综合征患者血清胃促生长素分泌特点与发病机制探讨

目的比较肥胖与非肥胖型多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清胃促生长素(Ghrelin)分泌特点及其与代谢紊乱机制的关系。方法以体质量指数(BMI)为标准,将60例PCOS患者分为肥胖组(BMI≥25kg/m2)30例和非肥胖组(BMI<25kg/m2)30例,以30例月经正常的输卵管性不孕患者为对照组。3组患者均采用全自动化学发光法测定血清生殖激素,并进行糖耐量和胰岛素释放试验;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清Ghrelin水平,并分析其水平与黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)、睾酮(T)及其他代谢指标间的关系。结果 (1)肥胖与非肥胖组空腹血清Ghrelin水平低于对照组(2.52±0.78),且肥胖组(1.84±0.46)低于非肥胖组(2.13±0.52),差异有统计学意义(P<0.05)。(2)肥胖组空腹胰岛素(FIN)、稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、服糖后2h及3h血清胰岛素水平高于非肥胖组和对照组,非肥胖组血清LH及LH/FSH高于肥胖组和对照组(均P<0.05)。(3)肥胖组血清Ghrelin水平与FIN、HOMA-IR呈负相关(r分别为-0.542、-0.503,P<0.05);非肥胖组血清Ghrelin水平与睾酮呈负相关(r=-0.568,P<0.05)。结论血清Ghrelin水平分泌紊乱可能在PCOS患者特别是肥胖型PCOS患者发病中起重要作用。

子宫、卵巢不同术式对围绝经期女性生活质量的影响

目的:探讨围绝经期女性子宫切除同时是否保留卵巢对其生活质量的影响。方法:将因子宫或卵巢良性疾病而行手术的围绝经期女性分为3组。A组(40例)为子宫切除术+双附件切除,B组(20例)为子宫切除术+一侧附件切除,C组(40例)为单纯子宫切除术。分别在术前及术后2个月、6个月测定血卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和雌二醇(E2)水平,并随访至术后6个月。结果:术后2个月和6个月A组与B、C组相比,体内激素水平差异有统计学意义(P<0.05),B组与C组相比,术后2个月激素水平下降差异有统计学意义,术后6个月差异无统计学意义。A组围绝经期症状较明显;术后6个月B、C组间围绝经期症状表现差异无统计学意义(P>0.05)。结论:围绝经期女性行子宫切除术时同时切除卵巢会出现较明显绝经期综合征。

miR-484靶向HNF1A对宫颈癌细胞增殖和迁移的影响

目的探讨miR-484在宫颈癌细胞中的表达及对宫颈癌细胞增殖、迁移的影响,探讨具体作用机制是否与肝细胞核因子1A(HNF1A)有关。方法研究起止时间2021年11月15日—2022年3月10日。正常宫颈上皮细胞Ect1/E6E7与宫颈癌细胞HeLa、SiHa、Caski传代培养,采用qRT-PCR法检测各细胞中miR-484与HNF1A mRNA的表达,并采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-484与HNF1A的靶向关系。将宫颈癌HeLa细胞分为miR-NC组(转染miRNA空质粒)、miR-484组(转染miR-484 mimics)、anti-miR-484组(转染miR-484 inhibitor)、si-NC组(转染siRNA空质粒)、si-HNF1A组(转染si-HNF1A)、anti-miR-484+si-NC组(转染miR-484 inhibitor和siRNA空质粒)、anti-miR-484+si-HNF1A组(转染miR-484 inhibitor和si-HNF1A),采用MTT法检测细胞增殖情况;采用Transwell法检测细胞迁移情况;采用Western Blot法检测细胞中CyclinD1、CDK4、β-catenin蛋白表达情况。结果HNF1A mRNA在Ect1/E6E7、Caski、SiHa、HeLa细胞中的表达量分别为(1.07±0.11)、(1.47±0.12)、(1.51±0.14)、(1.86±0.20);miR-484mRNA在Ect1/E6E7、Caski、SiHa、HeLa细胞中的表达量分别为(1.14±0.10)、(0.56±0.06)、(0.52±0.05)、(0.33±0.03)。miR-NC组HNF1A-WT和HNF1A-MUT荧光素酶活性分别为(1.03±0.10)和(1.01±0.10),miR-484组HNF1A-WT和HNF1A-MUT荧光素酶活性分别为(0.42±0.06)和(0.98±0.09)。与miR-NC组比较,miR-484组显著抑制HNF1A-WT荧光素酶活性(t=12.813,P<0.05),对HNF1A-MUT荧光素酶活性无显著影响(t=0.546,P>0.05)。与miR-NC组比较,miR-484组HeLa细胞中miR-484表达显著上调,细胞活力显著降低,迁移能力显著下降,CyclinD1、CDK4、β-catenin蛋白表达显著降低(均P<0.05)。与miR-NC组比较,anti-miR-484组HeLa细胞中miR-484表达显著下调,细胞活力显著升高,迁移能力显著上升,CyclinD1、CDK4、β-catenin蛋白表达显著升高(均P<0.05)。与si-NC组比较,si-HNF1A组HeLa细胞中HNF1A mRNA表达显著下调,细胞活力显著降低,迁移能力显著降低,CyclinD1、CDK4、β-catenin蛋白表达显著下调(均P<0.05)。与si-NC组比较,anti-miR-484+si-NC组HeLa细胞中miR-484表达显著降低,HNF1A mRNA表达显著升高,细胞活力与迁移能力均显著升高,CyclinD1、CDK4、β-catenin蛋白表达显著升高(均P<0.05)。与anti-miR-484+si-NC组比较,anti-miR-484+si-HNF1A组HeLa细胞中miR-484表达差异无统计学意义(P>0.05),HNF1A mRNA表达显著降低,细胞活力与迁移能力显著降低,CyclinD1、CDK4、β-catenin蛋白表达显著降低(均P<0.05)。结论miR-484过表达可能通过靶向抑制HNF1A表达而抑制宫颈癌细胞增殖、迁移。

miR-21 SIRT1在早发性卵巢功能不全中的表达及相关性分析

目的分析微小核糖核酸-21(miR-21)、沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)在早发性卵巢功能不全中的表达及相关性。方法选取60例2019年8月—2020年9月早发性卵巢功能不全患者于天津医科大学第二医院进行就诊作为研究组,同时期进行健康体检的正常女性60例作为正常组,实时定量PCR检测miR-21表达,SIRT1表达采用蛋白免疫印迹法,化学发光法检测性激素表达,超声检查子宫体积、卵巢体积、内膜厚度变化情况。受试者特征曲线(ROC)分析miR-21、SIRT1在早发性卵巢功能不全中诊断价值。结果研究组miR-21、SIRT1、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E_(2))、子宫体积、卵巢体积及内膜厚度分别为(0.61±0.17)、(0.59±0.13)、(42.59±9.39)U/L、(32.98±10.03)U/L、(109.59±31.26)pmol/L、(24.98±7.36)cm^(3)、(3.02±1.23)cm^(3)、(4.12±1.36)mm,正常组miR-21、SIRT1、FSH、LH、E_(2)、子宫体积、卵巢体积及内膜厚度分别为(1.03±0.30)、(1.12±0.36)、(7.59±2.81)U/L、(6.14±2.01)U/L、(269.59±80.69)pmol/L、(43.12±12.59)cm^(3)、(7.26±2.36)cm^(3)、(5.83±1.59)mm,研究组miR-21、SIRT1、E_(2)表达以及子宫体积、卵巢体积、内膜厚度低于正常组,FSH、LH表达高于正常组,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-21与FSH、LH呈负相关(r=-0.431,P<0.01;r=-0.421,P<0.01),与E_(2)、子宫体积、卵巢体积、内膜厚度呈正相关(r=0.551,P<0.01;r=0.542,P<0.01;r=0.544,P<0.01;r=0.498,P<0.01)。SIRT1与FSH、LH呈负相关,与E_(2)、子宫体积、卵巢体积、内膜厚度呈正相关(P<0.05)。ROC分析miR-21、SIRT1诊断早发性卵巢功能不全的曲线下面积(AUC)低于两项联合,两项联合检测对早发性卵巢功能不全患者诊断效能较高(P<0.05)。结论miR-21、SIRT1在早发性卵巢功能不全中低表达,二者具有相关性,低表达miR-21、SIRT1是预测早发性卵巢功能不全发病的重要指标。

DNA倍体分析在宫颈癌早期筛查中的应用价值

目的探讨DNA倍体定量分析在诊断宫颈早期病变中的应用价值。方法选择2018年7-12月在南开大学附属医院(天津市第四医院)妇科门诊行阴道镜下宫颈活检300例患者,术前均行液基细胞学检查(TCT)和DNA倍体定量分析。以组织学病理结果为诊断金标准,评价两种方法在宫颈早期病变筛查中的作用。结果 300例患者病理显示:炎性34例,CIN Ⅰ 45例,CIN Ⅱ~Ⅲ 211例,宫颈癌10例。122例TCT阳性者中有103例病理结果阳性,178例阴性者中有118例病理结果阳性,其中3例TCT结果阴性,而病理学组织结果确诊为宫颈癌。185例DNA倍体定量分析阳性者中有158例病理结果阳性,115例阴性者中有63例病理结果阳性。DNA倍体定量分析对组织病理学的诊断灵敏度明显高于TCT(71.49%vs. 46.61%),差异有统计学意义(P<0.05),且无宫颈癌漏诊病例。结论 DNA倍体定量分析用于宫颈早期病变筛查,可明显提高敏感性,降低漏诊率,有利于早期诊治。