中药合剂在大鼠烧伤炎症反应中的作用

目的 :探讨中药合剂对烧伤炎症反应的调理作用。方法 :SD大鼠 110只随机分为对照组、烫伤组和烫伤后中药合剂喂服组 (中药组 ) ,烫伤组和中药组制备成III度 30 %总体表面积烫伤模型 ;采用放射免疫法 ,分别于伤后 6h ,1,5 ,10 ,2 0d时检测大鼠血清TNF α,IL 1β ,IL 6 ,IL 8,IL 4和IL 10含量。结果 :烫伤组和中药组血清中各指标伤后明显升高 ,中药组促炎因子 (TNF α ,IL 1β ,IL 6 ,IL 8)分别在不同时相点低于烫伤组 ,而抗炎因子 (IL 4 ,IL 10 )分别在不同时相点高于烫伤组。结论 :中药合剂对烧伤炎症反应具有明显调理作用 。

循证医学与医学教育

循证医学的产生、发展掀起了临床医学模式的巨大变革 ,也同样给传统的医学教育体系提出了严峻的挑战。

乳腺癌组织中ERβmRNA和VEGFmRNA的表达及两者的关系

目的探讨雌激素受体亚型β(ERβ)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)在乳腺癌组织中的表达及两者之间的关系。方法采用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测3 5例乳腺癌组织中ERβmRNA和VEGFmRNA的表达,分析两者表达的相关性及其与肿瘤病理参数的关系。结果ERβmRNA表达水平与VEGF1 2 1和VEGF1 6 5mRNA的表达水平呈正相关(r=0.7 8 5和0.6 4 1,均P=0.0 0 0)。VEGF1 2 1和VEGF 1 6 5mRNA在有淋巴结转移的乳腺癌组织中表达水平明显高于无淋巴结转移者(P=0.0 3 3,0.0 0 4)。结论乳腺肿瘤血管生成可能受ERβ的影响,而乳腺癌组织中VEGFmRNA的表达水平高者可能易于发生淋巴结转移。

人血管内皮生长因子基因转染原代成人皮肤成纤维细胞研究

目的 将人血管内皮生长因子 (hVEGF)基因导入原代离体成人皮肤成纤维细胞 ,验证转基因细胞分泌hVEGF情况 ,探讨成人自体细胞基因修饰后移植的可行性。方法 采用酶消化法获取成纤维细胞 ,以杜氏改良培养基 (DMEM )传代培养。以脂质体转染法将pcDNA3 .1(+ ) /hVEGF12 1导入成纤维细胞 ,培养 48h后取细胞作逆转录 多聚酶链式反应 (RT PCR) ,上清行酶联免疫吸附反应 (ELISA)检测、MTT测定和Mile’s实验。结果 转基因细胞经RT PCR扩增出一条约 44 4bp条带 ,ELISA显示转基因细胞培养上清VEGF浓度约 (12 .3 2± 0 .3 9) μg/L ,MTT显示上清明显促内皮细胞增殖 ,Mile’s实验显示上清明显增加毛细血管通透性。结论 质粒 pcDNA3 .1(+ ) /hVEGF12 1成功转染成人皮肤成纤维细胞 ,转基因细胞能表达分泌有生物活性的VEGF12 1蛋白。

乳腺癌组织中雌激素受体亚型βmRNA和血管内皮细胞生长因子mRNA的表达及其意义

目的探讨雌激素受体亚型β(ERβ)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)在乳腺癌组织中的表达及其表达的关系。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测35例乳腺癌、12例癌旁乳腺组织和10例乳腺纤维腺瘤组织中ERβmRNA和VEGFmRNA表达,分析其表达之间的关系。结果ERβmRNA在乳腺癌中的表达水平(0.274±0.124)明显低于癌旁乳腺组织(0.538±0.124)和乳腺纤维腺瘤组织(0.459±0.13)(t=6.37、4.09,P均<0.01)。VEGF121、165mRNA在乳腺癌中的表达水平(0.530±0.142、0.336±0.114)明显高于癌旁乳腺组织(0.184±0.098、0.137±0.059)和乳腺纤维腺瘤组织(0.280±0.078、0.187±0.090)的表达(t=6.87和4.69、5.73和3.89,P均<0.01)。VEGF121、165mRNA在有淋巴结转移的乳腺癌组织中表达水平明显高于无淋巴结转移者(P<0.05)。ERβmRNA表达水平与VEGF121、165mRNA的表达水平呈正相关(r=0.785和0.641,P均<0.01)。结论乳腺癌组织中ERβmRNA表达下调,而VEGFmRNA表达上调。VEGFmRNA的表达水平高者可能有利于淋巴结转移。乳腺肿瘤血管生成可能受ERβ的影响。

应用RT-PCR构建人表皮生长因子基因真核表达质粒

目的体外克隆及构建带信号肽的人表皮生长因子(hEGF)基因真核表达质粒。方法设计人表皮生长因子(hEGF)基因和信号肽基因引物,采用RT-PCR技术从胎肾组织总RNA中扩增出hEGF基因和信号肽基因序列,克隆入pGEM-T载体,酶切鉴定和序列分析后经T4连接酶连接并克隆入表达质粒pcDNA3.1(+),再次酶切鉴定和序列分析。结果RT-PCR扩增产物电泳获得约90 bp和180 bp条带,与hEGF及其信号肽cDNA大小符合;克隆入T载体后经序列分析与hEGF及信号肽基因一致,克隆入pcDNA3.1(+)质粒后双酶切获得约230 bp和5.4 kb条带,再次测序与hEGF cDNA一致。结论成功构建带信号肽的hEGF基因的真核表达质粒。