吉祥草活性成分RCE-4抑制宫颈癌Ca Ski细胞增殖、侵袭和迁移的活性及机制研究

本文探讨吉祥草活性单体RCE-4对宫颈癌Ca Ski细胞增殖、侵袭和迁移的影响及机制。采用MTT法和克隆形成实验检测RCE-4对Ca Ski细胞增殖的影响,划痕实验及Transwell小室实验研究RCE-4对Ca Ski细胞的迁移和侵袭的影响,间接免疫荧光实验和Western blot法检测RCE-4对β-catenin和YAP/TAZ蛋白入核转运的影响,采用Western blot法检测RCE-4对Wnt/β-catenin、Hippo/YAP信号路通及下游靶蛋白表达的影响。结果显示,RCE-4可以显著抑制Ca Ski细胞的增殖、迁移和侵袭;RCE-4处理后,β-catenin和YAP/TAZ蛋白入核减弱,GSK3β、p-β-catenin、p-YAP、p-LATS1的蛋白表达量增加,PAK4、p-GSK3β、β-catenin、MST1、LATS1、NUAK2、YAP/TAZ、YAP的蛋白表达量减少,下游靶蛋白MMPs、c-Myc、SOX2、CYR61、VCAM-1、ICAM-1的表达被抑制,提示RCE-4体外可能通过对Wnt/β-catenin和Hippo/YAP信号通路的调控发挥其抗Ca Ski细胞侵袭和迁移的作用。

吉祥草活性成分RCE-4触发内质网应激调控人宫颈癌Ca Ski细胞周期阻滞

目的探索吉祥草活性成分RCE-4抑制宫颈癌Ca Ski细胞增殖的机制。方法四甲基偶氮唑蓝法(MTT法)和克隆形成实验考察RCE-4对Ca Ski细胞生长的影响,并计算其半抑制浓度(IC_(50));流式细胞术检测细胞周期的变化;Western blot检测内质网应激及细胞周期相关分子蛋白水平的表达。结果RCE-4对人宫颈癌Ca Ski细胞的增殖具有明显抑制作用,作用24、48、72 h的IC_(50)值分别为8.61、4.69、4.34μmol·L^(-1)。Western blot结果显示RCE-4激活了内质网应激PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路。流式细胞术结果显示RCE-4可明显诱导细胞G 2/M期阻滞,细胞内CDK1、cdc25C、p-cdc25C、CyclinB1、Chk2、p-Chk2、GADD45α、MDM2蛋白水平明显降低,p21、p27和ATM蛋白水平明显升高。结论RCE-4可能通过触发内质网应激诱导Ca Ski细胞G 2/M期阻滞从而抑制人宫颈癌Ca Ski细胞增殖。

大学生非正式组织现状及对策探析

大学生非正式组织的存在对于高校的教育管理工作有重要影响,本文将非正式组织理论运用于高校组织的管理实践,分析了大学生非正式组织的类型、特点、作用与影响,并最终提出了发挥非正式组织在学生工作中的积极作用,控制其消极作用的管理对策。

新标准下汽油车下线尾气排放检验分析及建议

为解决我国汽油车污染物排放控制的问题,生态环境部发布了有关汽油车污染物排放限值及测量方法的新国标,从国标变化点解析、新国标实施流程和内部标准建议等方面研究了汽车生产企业应该重点关注的流程和管控点,搭建新标准下新生产汽油车污染物排放测试管控体系框架,为车企污染物排放测试管控工作提供参考,并为改进和创新国家的排放标准体系进行初步探索。

吉祥草活性成分RCE-4与塞来昔布联合应用抗宫颈癌Ca Ski细胞增殖效果与机制研究

本研究旨在探讨RCE-4与非甾体抗炎药联用抗宫颈癌Ca Ski细胞增殖的协同作用及分子机制。采用MTT法和CalcuSyn V2.0软件检测细胞增殖并计算联合用药指数(combination index,CI);Western blot法分析蛋白表达;Jc-1染色检测线粒体膜电位;吖啶橙/溴化乙锭(acridine orange/ethidium bromide,AO/EB)染色检测细胞凋亡;免疫共沉淀法检测Bcl-2-Beclin 1复合体的相对含量。结果显示,塞来昔布与RCE-4的协同效果最好,最佳协同指数为0.32。二者联用能显著抑制环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)和核转录因子κB(nuclear transcription factor kappa B,NF-κB)的表达,促进非甾体抗炎药活化因子1(non-steroidal anti-inflammatory drugs activity gene-1,NAG-1)的表达。同时,联用也显著抑制了微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein 3,LC3)-II、Beclin 1、p62以及自噬相关基因(autophagy-related gene,ATG)3/4B/5/7/14的表达,促进了线粒体膜电位的去极化,显著抑制了B淋巴细胞瘤-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-xl(B cell lymphoma-xl,Bcl-xl)的表达,促进了Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、Bcl-2/Bcl-xl相关死亡启动因子(Bcl-2/Bcl-xl-associated death promoter,Bad)以及活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase,cleaved-caspase)3/7/9的表达。另外,二者联用也极显著地抑制了Bcl-2-Beclin 1复合体的形成。综上所述,RCE-4与塞来昔布联用可能通过抑制Bcl-2-Beclin 1复合体的形成,抑制RCE-4诱导的自噬并增强其凋亡,从而提高RCE-4对宫颈癌Ca Ski细胞的敏感性。