脂多糖对大鼠星形胶质细胞Ski蛋白表达的影响

目的探讨内毒素脂多糖对大鼠星形胶质细胞ski蛋白表达规律及胞定位的影响。方法新生3 d内Sprague-Dawley大鼠,取大脑皮质分离星形胶质细胞,体外培养。采用0μg/ml、0.001μg/ml、0.01μg/ml、0.1μg/ml、1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml脂多糖诱导6 h;采用0.1μg/ml脂多糖诱导0 d、2 d、4 d、6 d、8 d。Western blotting法检测星形胶质细胞中ski蛋白的表达,间接免疫荧光双标法检测ski在星形胶质细胞中的定位。结果 0.1μg/ml脂多糖诱导下,ski蛋白表达最高(F=46.656,P<0.001)。0.1μg/ml脂多糖诱导4 d时最高,6 d时逐渐降低。在无脂多糖诱导及脂多糖诱导6 d时,ski蛋白主要表达于细胞核;脂多糖诱导2 d、4 d时,细胞质中出现ski表达。结论脂多糖可诱导星形胶质细胞ski蛋白表达,可能参与炎症反应。

Ski对脂多糖诱导大鼠星形胶质细胞炎症因子释放的影响

目的探讨Ski对激活星形胶质细胞炎症因子分泌的影响。方法从3日龄Sprague-Dawley大鼠大脑皮质分离星形胶质细胞,分为空白对照组、阴性对照组、siRNA组,siRNA组沉默Ski基因。48 h后,采用Western blotting和免疫荧光染色检测Ski表达;再以脂多糖激活星形胶质细胞24 h。ELISA检测各组细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的浓度。结果 siRNA组Ski蛋白表达显著降低(P<0.001);激活后,TNF-α、IL-1β浓度显著减少(P<0.001)。结论 Ski可能参与星形胶质细胞炎症反应。

微管蛋白、水通道蛋白4和K+通道蛋白4.1在大鼠脊髓损伤后不同时间的表达变化

目的探究微管骨架、水通道蛋白4(AQP4)和K+通道4.1(Kir4.1)在大鼠急性脊髓损伤后的时间变化规律。方法 90只成年雌性Sprague-Dawley大鼠,随机分组为假手术组(n=30)和损伤组(n=60),损伤组设6 h、1 d、3d、5 d、7 d,每个亚组12只大鼠。用Allen打击法制备T10打击损伤模型。损伤后各时间点各组行脊髓含水量检测、脊髓HE染色,观察急性脊髓损伤后的病理变化;行微管蛋白、AQP4和Kir4.1免疫组织化学染色和Western blotting检测,观察急性损伤后三组蛋白的表达变化及相对灰度值分析。结果损伤组各时间点脊髓含水量均高于假手术组(P<0.05),且5 d时最高。HE染色显示,损伤后6 h,灰质主要以出血为主;损伤后1 d,灰质出血严重,神经元肿胀加重;损伤后3 d,灰质坏死面积加大,水肿现象明显;损伤后5 d、7 d,灰质坏死更加明显,水肿现象更加严重。Western blotting和免疫组织化学染色结果显示,损伤后AQP4在灰质表达逐渐增高,且5 d表达为高峰,微管蛋白和Kir4.1表达趋势基本相同,为损伤后表达逐渐下降,5 d表达最低。结论脊髓损伤后微管蛋白表达与Kir4.1表达趋势相似,与AQP4表达趋势相反,可能共同参与水肿形成。

脊髓损伤炎症反应的研究进展

脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是一种致残率极高的中枢神经系统(central nervous system,CNS)创伤,常引起感觉、运动和括约肌功能丧失,SCI后炎症病理过程扮演着重要的角色,对SCI后功能恢复、组织修复非常重要。本文阐述了SCI炎症反应的作用机制以及调控炎症反应治疗SCI的前景。

胸椎管内神经鞘瘤伴胸腰段椎管囊肿1例

1病例资料女,53岁,因腰背部疼痛2年、加重伴双下肢麻木无力3个月入院。入院时体格检查:胸12~腰1水平压痛、叩击痛;双下肢股四头肌肌力左侧Ⅳ级、右侧Ⅲ级,胫前肌肌力左侧Ⅳ级、右侧Ⅳ级;耻骨联合水平以下及双下肢内侧浅感觉障碍,双侧膝腱反射亢进,踝反射亢进。术前胸腰椎增强MRI示胸8水平硬膜下占位病变,局部沿左椎间孔蔓延,脊髓受压;胸12~腰1椎体平面髓内囊性占位(图1)。经科室讨论决定分期手术,一期清除椎管囊肿,二期切除椎管内神经鞘瘤。一期手术采用后正中入路,在胸12~腰1水平,切除胸12下部分椎板及腰1上部分椎板,见硬脊膜膨胀,显微镜下切开硬脊膜,见脊髓后方椭圆形占位,呈囊性,吸除囊性液体,缝合硬脊膜,胸12、腰1~2椎体共置入六枚椎弓根螺钉固定。术后第二天双下肢肌力降至Ⅰ级,感觉障碍平面升至肋弓水平。急诊全麻下手术。采用后正中切口,分离椎旁肌肉后显露胸8双侧椎板,全椎板切除后,显微镜下切开硬脊膜发现肿瘤位于硬脊膜腹侧,呈哑铃状,沿椎管向外生长,沿肿瘤与脊髓边缘仔细分离,瘤内瘤外操作交替进行,整块切除肿瘤,严密缝合硬脊膜。术后双下肢麻木无力感觉消失,肌力较术前明显改善。术后随访6个月,双下肢肌力恢复Ⅳ级,感觉平面消失;MRI复查示肿瘤全切。术后病理检查为神经鞘瘤(图2)。

大鼠脊髓损伤后神经连接蛋白1的表达

目的探究神经连接蛋白1(NL1)在大鼠脊髓损伤后不同时间表达的变化。方法成年雌性Sprague-Dawley大鼠60只随机分为假手术组(n=30)和实验组(n=30),每组再等分为3 d、7 d、14d、21 d和28 d亚组。假手术组行T9-11椎板切除术,实验组用Allen打击仪(10 g×25 mm)制造T10脊髓损伤模型。术后相应时间点行BBB评分,Golgi-Cox染色观察损伤中心上端脊髓白质树突及树突棘变化,免疫荧光染色检测NL1在损伤中心上端脊髓白质中的表达。结果与假手术组相比,实验组各时间点BBB评分均显著降低(P<0.001);脊髓白质树突逐渐减少,树突棘密度逐渐降低(P<0.001);NL1于损伤后3 d开始升高,至14 d时达到峰值(P<0.05)。结论 NL1在脊髓损伤后自发性升高,但不足以诱导突触再生。

水通道蛋白-4与钾离子通道4.1在脊髓水肿中作用机制的研究进展

脊髓水肿是脊髓继发性损伤非常重要的病理生理基础,影响着脊髓损伤的修复与预后。水通道蛋白-4广泛分布于机体各器官,在脑和脊髓中高表达。内向整流钾离子通道4.1是近年发现的表达于中枢神经系统星形胶质细胞上的蛋白,在功能上与水通道蛋白互通。水通道蛋白-4和内向型整流钾离子通道4.1在脊髓水肿形成和消除过程中发挥重要作用,并且对抑制胶质瘢痕形成,促进兴奋性毒物的清除有一定作用。

A型肉毒毒素在神经系统疾病中的临床应用

A型肉毒毒素(botulinum neurotoxin type A,BoNT/A)是一种嗜神经性的细菌外毒素,具有解痉和镇痛作用,可多次使用,因而在神经系统相关的疾病中得到广泛应用。BoNT/A还参与调节降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)、K+和P物质的释放,并具有潜在的抗有丝分裂和抗肿瘤活性,这为扩大BoNT/A应用和研究提供了理论基础。本文就近年A型肉毒毒素在肌张力障碍、痉挛、神经性病理性疼痛、自主神经失调、原发性头痛和脊髓损伤等神经系统相关疾病中的应用以及研究综述,为A型肉毒毒素的运用和研究提供新视角、新指导。

雷公藤多苷对脂多糖诱导大鼠星形胶质细胞产生炎症因子的影响

目的观察雷公藤多苷对脂多糖诱导的大鼠星形胶质细胞炎症反应的影响。方法取新生3 d内SD大鼠的大脑皮质,分离提取星形胶质细胞,用脂多糖1μg·mL^(-1)刺激星形胶质细胞制备炎症模型。将分离纯化后的星形胶质细胞细胞分为5组:空白组、模型组和低、中、高3个剂量实验组,空白组加基础培养基;模型组加1μg·mL^(-1)脂多糖;低、中、高3个剂量实验组分别加入25,50,100μg·L^(-1)雷公藤多苷预处理细胞,然后加入1μg·mL^(-1)脂多糖诱导细胞。以CCK8检测各组细胞存活率,以酶联免疫吸附实验检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的表达变化,蛋白质免疫印迹法分析细胞中一氧化氮合酶(i NOS)蛋白表达变化。结果空白组、模型组和低、中、高3个剂量实验组的细胞存活率分别为(100. 33±5. 61)%,(50. 74±6. 67)%,(74. 85±3. 48)%,(85. 68±5. 51)%,(94. 12±3. 43)%;这5组的TNF-α(pg·mL^(-1))分别为39. 23±15. 34,169. 43±15. 19,117. 83±12. 16,80. 81±5. 28,57. 87±7. 92;这5组的IL-6 (pg·mL^(-1))分别为47. 62±7. 93,299. 46±18. 45,232. 57±23. 18,170. 66±26. 67,94. 51±24. 36;这5组的i NOS表达灰度值分别为0. 32±0. 02,1. 10±0. 04,0. 78±0. 05,0. 58±0. 04,0. 37±0. 04,模型组与空白组比较,上述指标差异均有统计学意义(均P <0. 05);低、中、高3个剂量实验组与模型组比较,上述指标差异均有统计学意义(P <0. 05,P <0. 001)。结论雷公藤多苷可明显改善脂多糖诱导的星形胶质细胞炎症损伤。