血清中PD-L1含量与胃癌病人预后的关系

目的:分析胃癌病人血清中程序性死亡配体1(programmed death-ligand 1,PD-L1)含量及其与肿瘤分期和预后的关系。方法:收集我院2018年8月至2019年12月60例胃癌病人血清,15例健康成人血清作为对照,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清PD-L1的含量,比较胃癌病人与健康成人血清PD-L1含量的差异,分析胃癌病人血清PD-L1的含量与病期及预后的关系。免疫组织化学检测肿瘤组织内PD-L1的表达情况,并分析其与血清中PD-L1含量的相关性。结果:胃癌组血清中PD-L1的含量明显高于对照组。Ⅲ、Ⅳ期胃癌病人血清PD-L1含量明显高于Ⅰ、Ⅱ期胃癌病人。胃癌病人合并腹膜转移者血清PD-L1含量明显升高,提示预后不良。生存分析显示,血清PD-L1含量高的胃癌病人生存期明显短于低者。检测肿瘤组织标本中PD-L1的表达水平,发现其与血清中PD-L1含量无明显相关性。结论:胃癌病人血清中PD-L1含量高于健康成人。随病期进展逐渐升高。胃癌伴腹膜转移的病人血清中PD-L1升高明显。血清中PD-L1含量与肿瘤组织中的PD-L1表达不相关。

血清淀粉样蛋白A在疾病应用中的研究进展

血清淀粉样蛋白A（serum amyloid A,SAA）是一类多基因编码的多形态蛋白家族,组织淀粉样蛋白A的前体物质,属于急性时相反应蛋白。炎症或感染急性期其在48～72 h内即迅速升高,并且在疾病的恢复期迅速下降。目前,细菌、病毒感染、动脉粥样硬化、冠心病、急性移植排斥反应、

斑点免疫金渗滤法定量测定血清淀粉样蛋白A方法的建立及性能评估

目的建立斑点免疫金渗滤法(DIGFA)定量测定血清淀粉样蛋白A(SAA)并评估其分析性能。方法选用2株商品化抗SAA单克隆抗体,分别结合于硝酸纤维素膜和胶体金,制备免疫金渗滤试剂板条(SAADOT)以定量检测SAA。按照EP文件,评估SAA-DOT的分析性能(检测限、精密度、准确性、线性范围等)。结果SAA-DOT最低检测限为5 mg/L;10和100 mg/L的批内变异系数(CV)分别为9.07%和10.21%,天间CV分别为11.33%和11.53%;线性范围为5～230 mg/L;SAA-DOT的测定结果与商品化乳胶增强速率散射比浊法(LERN)试剂具有良好的相关性(r=0.995,P<0.05)。表观健康者血清SAA浓度中位数为5.7 mg/L,95%可信区间为0～9.6 mg/L。结论基于DIGFA的SAA-DOT简便、快速,能在5 min内完成检测,各项分析性能指标达到国家食品药品监督管理局(SFDA)对体外诊断试剂的要求,可用于临床患者血清标本的检测。

定点医院新型冠状病毒肺炎患者核酸检测工作的实践和探索

目的:探讨现阶段新型冠状病毒(新冠)肺炎患者核酸检测中的相关问题和解决方案,为临床实验室提供参考。方法:选取2022年4月1日至4月10日入院的462例新冠肺炎患者,对其核酸检测基础循环阈值(cycle threshold,Ct值)和时间变化规律进行分析;分析3月20日至3月31日和4月1日至4月10日2个时间段内,因样本采集原因导致的核酸检测结果假阴性的情况。选取213份临床核酸检测样本,采用试剂A和试剂B进行平行检测,比较两者间的差异。根据相关文件,制定可疑样本的复检标准作业程序(standard operation procedure,SOP)文件;制备弱阳性质控品,参考定量试验的质控方法,每天分5批次检测,共4 d,获得20组数据,以此为初始数据制作质控图。结果:462例新冠肺炎患者的ORF1ab和N基因基础Ct值中位数分别为24.50(20.58~32.10)和23.38(19.43~31.24),184例Ct值<30的患者,其Ct值升至30以上所需的中位时间为6(4~8)d。北部院区转型前期和转型后期,采样不合格率分别为12.4%和2.4%,差异具有统计学意义(P<0.01)。2种试剂在新冠核酸检测Ct值<30的样本中一致性较好,但检测Ct值在30~40的样本时,两者一致性降低。自制弱阳性质控品20次检测ORF1ab和N基因Ct值分别为35.17±0.55和35.23±0.88,能较好地监控临床上较为关注的Ct值在35左右的样本检测情况。结论:对于入院基础Ct值<30的新冠肺炎患者,其核酸检测频次可设定为3~4 d进行1次。2种常用新冠核酸检测试剂,在检测Ct值≤30的样本时一致性较好,但检测Ct值在30~40的样本时,两者结果差异明显。建立适用于定点医院实验室的样本复检规范和流程,同时应加强对Ct值处于35左右样品检测的质量监控,以保证实验室新冠核酸检测结果的一致性。

乳胶颗粒凝集法检测梅毒特异性抗体的性能评估

目的对乳胶颗粒凝集法梅毒螺旋体特异性抗体检测试剂（Mediace TPLA）进行性能评估。方法参考美国临床实验室标准化协会（CLSI）EP系列文件,评估Mediace TPLA的分析性能。用Mediace TPLA检测111例梅毒确诊患者和78例排除梅毒感染者的血清,并与化学发光微粒子免疫分析法（CMIA）进行比较。结果Mediace TPLA检测结果在8.0、28.6及166.0 T.U.这3个水平的总变异系数（CV）分别为8.77%、3.94%和6.57%;检测线性范围为0-250 T.U.;总回收率为95.31%;一定程度的溶血（血红蛋白〈4.8 g/L）、脂血（甘油三酯〈8 mmol/L）、黄疸（胆红素〈20μmol/L）及类风湿因子（〈450 IU/mL）对检测结果无明显影响;排除梅毒感染的30例抗核抗体（ANA）阳性患者、10例肝炎患者及10例妊娠期妇女血清检测结果为阴性。以CMIA结果为相对标准,Mediace TPLA Cut-off值取10 T.U.时,其检测灵敏度为99%、特异性为100%。结论 Mediace TPLA具有抗干扰能力强、重复性好、准确性好、线性范围宽及特异度高等特点,可在全自动生化分析仪中使用。

紧急转制的新型冠状病毒感染患者定点收治医院检验科的应急转型经验

2021年2月下旬,上海出现了一轮本土新型冠状病毒(简称新冠病毒)感染疫情,使得新冠疫情由常态化防控转为疫情防控攻坚战。根据国家卫生健康委印发《区域新型冠状病毒核酸检测组织实施指南(第三版)》要求,具备核酸检测能力的各级医疗机构迅速开展新型冠状病毒核酸检测,这给非定点收治新冠患者医院紧急转制为定点医院提出了更高的检测防控要求。检验科作为与新冠病毒检测标本近距离接触的临床科室,存在实验室工作时间长、工作强度大,面临临床常规标本和核酸标本气溶胶和接触传播的潜在风险,更需科室组织管理、人力资源规划、实验室核酸检测、实验室感染防控、医疗物资保障、工作人员心理疏导等多方面完善。本文结合上海交通大学医学院附属瑞金医院北部院区检验科应急转型工作实践,包括人员配置、临床样本的检测项目规划、核酸应急检测建立,科学、规范、有序开展相关工作,为兄弟单位提供检验科在应对新冠肺炎疫情紧急检测统筹管理方面的经验。

液体活检在肺癌诊疗中的应用

肺癌是目前我国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一,早期肺癌患者多无明显症状,而约60%的肺癌患者在初诊时即有远处转移,晚期患者5年生存率不高。因此,临床亟需可用于肺癌早期筛查和诊断、个体化治疗监测、预后评估及耐药监测等方面的新兴肿瘤标志物。相较于传统的组织活检,液体活检因其无创、样本易获得、重复性高、可反映肿瘤的整体状态等优势,能够实现对肿瘤实时监测,已成为近年研究的热点。本文就液体活检在肺癌临床诊疗中的应用作一综述。

MxA、CRP和WBC计数鉴别诊断急性呼吸道病毒感染与细菌感染的价值

目的探讨黏病毒抗性蛋白A(MxA)、C反应蛋白(CRP)和白细胞(WBC)计数在急性呼吸道病毒感染与细菌感染鉴别诊断中的应用价值。方法选取急性呼吸道感染性疾病患者594例,其中流感病毒感染350例(病毒感染组)、细菌感染244例(细菌感染组)。另选取体检健康者100名作为正常对照组。检测所有对象的MxA、CRP和WBC计数。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价各项指标鉴别诊断呼吸道病毒感染与细菌感染的效能。结果病毒感染组MxA水平显著高于细菌感染组和正常对照组(P<0.05、P<0.01),细菌感染组显著高于正常对照组(P<0.05)。细菌感染组CRP水平和WBC计数显著高于病毒感染组和正常对照组(P<0.05、P<0.01),病毒感染组显著高于正常对照组(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,MxA、CRP和WBC计数单项检测及联合检测模型鉴别诊断呼吸道病毒感染与细菌感染的曲线下面积(AUC)分别为0.829、0.703、0.665、0.850。联合检测模型的鉴别诊断效能优于各项指标单独检测(P<0.01)。结论MxA、CRP和WBC计数在急性呼吸道感染性疾病中具有较好的临床应用价值,MxA在鉴别呼吸道病毒感染和细菌感染中优于CRP和WBC计数,三者联合检测效率更高。

谈班级的民主管理和民主监督

建设一个民主、团结、上进的班集体是每一位班主任追求的目标，但如何加强班级的民主化建设却又是每一位班主任特别是年轻班主任头疼的问题。笔者也是如此，在做班主任的前两次实践中，分别犯了两个班级建设方面的错误，在思考这些错误的同时也促进了我的成长，形成了现在班级建设的自己的一些方法。

长株潭城际铁路开福寺站主体结构基坑施工监测研究

本文结合长株潭城际铁路开福寺站基坑工程特点,建立了车站主体结构基坑施工监测系统,实施了全过程施工监测,分析了监测数据。分析结果表明:基坑冠梁、支撑协同作用突出,能有效减小基坑变形;基坑围护结构变形主要发生在基坑开挖阶段,底板浇筑后变形较小;基坑周边旋喷桩止水帷幕隔水效果显著;基坑开挖的土体要及时移除;基坑位移变形量未超过限值,车站结构施工监测能有效保证车站结构施工安全。

红细胞分布宽度、血清总胆红素与冠心病及冠状动脉病变程度相关性研究

目的探讨红细胞分布宽度(RDW)和血清总胆红素(TB)与冠心病(CHD)及冠状动脉病变支数和Gensini积分之间的关系。方法选取200例行诊断性冠状动脉造影的CHD患者(CHD组),以冠状动脉造影结果阳性(主要血管直径狭窄≥50%)作为诊断CHD的标准。另选取体检健康者100名为正常对照组。检测所有对象的RDW和TB。采用Pearson线性相关分析评估RDW和TB与总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌红蛋白(MYO)、B型钠尿肽(BNP)和肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)的相关性;比较不同冠状动脉病变支数患者RDW和TB的差异。采用Spearman相关分析评估RDW和TB与Gensini积分的相关性。结果与正常对照组比较,CHD组RDW明显升高(P<0.05),TB水平明显降低(P<0.05)。CHD组RDW与HDL-C呈负相关(r=-0.677,P<0.05),与cTnI呈正相关(r=0.196,P<0.01);TB与HDL-C呈正相关(r=0.525,P<0.05),与cTnI呈负相关((r=-0.118,P<0.05)。冠状动脉1支、2支和3支病变患者RDW依次显著升高(P<0.01),TB依次显著降低(P<0.01)。RDW与Gensini积分呈正相关(r=0.437,P<0.05),TB与Gensini积分呈负相关(r=-0.385,P<0.05)。结论RDW、TB与CHD患者冠状动脉病变严重程度相关,在CHD风险和预后评估中有一定价值。

长沙营盘路湘江隧道分岔大跨施工技术

长沙营盘路湘江隧道匝道与正洞分岔合流大跨段断面大、变化多、埋深浅、地质差、受力变形复杂。为了安全顺利地完成合流大跨段开挖,介绍了一套完整的分岔大跨合流段施工技术,并对开挖断面渐变分部、异型二次衬砌等关键控制技术进行了详细阐述。实践证明,本分岔合流段大跨在埋深浅、地质差、环境复杂的情况下采用合适的地层加固措施、不同断面的合理渐变、超大断面的合理分块、保留临时支撑施作二次衬砌等技术是切实有效的,可为其他类似工程施工提供参考。

二例H7N9禽流感病毒感染患者实验室检测分析报告

2013年3月31日,3例H7N9禽流感病毒感染患者经中国疾病预防控制中心（Chinese Center for Disease Control and Prevention,CDC）确认[1]。由于H7N9禽流感病毒是一类新亚型的禽流感病毒,人感染H7N9禽流感病毒在全球尚属首发,具有起病急、进展快、致死率高等特点[2]。然而,目前医学界对人感染H7N9禽流感病毒的发病和病情演变规律了解甚少,

免疫磁性微球富集检测结核分枝杆菌方法的建立

目的:建立一种基于免疫磁性微球富集的检测结核分枝杆菌的新方法 ,以提高其临床阳性检出率。方法:提取结核分枝杆菌H37Rv抗原,并免疫新西兰白兔,制备兔抗结核分枝杆菌H37Rv血清。分离纯化抗血清,采用酶联免疫吸附试验和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术鉴定抗体的效价和纯度。将抗结核分枝杆菌抗体与生物素标记,并与结合有链霉亲和素的磁性微球进行连接获得免疫磁性微球,优化反应条件,建立免疫磁性微球富集检测结核分枝杆菌的方法。以培养结果作为判断金标准,比较免疫磁性微球富集方法与常规涂片镜检方法的检出率。结果:制备的抗结核分枝杆菌抗体浓度为14 mg/mL,最终效价为1∶20 000。检测158例临床标本,免疫磁性微球富集方法可使涂片镜检阳性率从5.1%提高到13.9%。22例免疫磁性微球富集后涂片镜检阳性的标本培养均为阳性,其特异度为100%。结论:建立的免疫磁性微球富集方法简便、有效,能显著提高结核分枝杆菌镜检的灵敏度和特异度。

FAK突变体的亚细胞定位及生物学特性

目的探讨外显子33缺失型黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)突变体(FAK-Del33)的亚细胞定位及生物学特性。方法采用基础实验研究设计。将野生型FAK以及突变型FAK-Del33分别构建到pEGFP表达载体,并转染乳腺癌细胞株,以研究分析其细胞表达和定位情况。另构建过表达FAK或FAK-Del33的MDA-MB-468乳腺癌稳转细胞株,研究评价其细胞表达和体外克隆形成能力。结果构建FAK-GFP融合蛋白表达载体转染MDA-MB-468后的细胞定位显示,野生型FAK在胞浆中弥散分布,而FAK突变体蛋白在胞浆中呈点状不均匀分布,并聚集成簇。经限制性内切酶酶切分析与测序分析,成功构建出过表达FAK的慢病毒载体,以293T细胞包装的重组慢病毒能够高效感染乳腺癌细胞;经抗生素puromycin筛选和荧光定量PCR鉴定,成功筛选到稳定表达FAK的细胞株。在软琼脂克隆形成实验中,FAK野生型的克隆形成数为(335±48)/1000个,FAK突变体为(735±91)/1000个,后者对MDA-MB-468乳腺癌稳转细胞株的增殖能力高于前者(t=9.437,P<0.01)。结论初步研究表明外显子33缺失可改变FAK的亚细胞定位;并能增强肿瘤细胞株的体外克隆形成能力,这种FAK突变体可能参与肿瘤的发生发展。

Wells量表和修正Geneva量表及其简化版对肺栓塞临床可能性评估的应用

目的 :回顾性分析肺动脉栓塞(pulmonary embolism,PE)患者确诊前的临床资料,探讨临床评估量表在PE诊断中的应用价值。方法:纳入上海交通大学医学院附属瑞金医院呼吸科2011年6月至2016年6月及瑞金北院呼吸科2012年12月至2016年6月确诊的PE患者共78例,回顾性分析其临床资料,用Wells量表和修正Geneva量表及各自简化量表分别对患者进行临床评估,并分析、比较其诊断PE的价值。结果:(1)用Wells量表对患者进行评分,其中低度PE可能性者为12例(15.38%),中度PE可能性者55例(70.51%),高度PE可能性者11例(14.10%);(2)用修正Geneva量表进行评估,低度PE可能性者为16例(20.52%),中度PE可能性者55例(70.51%),高度PE可能性者7例(8.98%);(3)用简化Wells量表进行评估,PE不可能组为26例(33.33%),PE可能组为52例(66.67%);(4)用简化Geneva量表二分类评分,PE不可能组为43例(55.13%),PE可能组为35例(44.87%);用简化Geneva量表三分类评分,低度PE可能性者为15例(19.23%),中度PE可能性者58例(74.36%),高度PE可能性者5例(1.28%);(5)Wells量表与修正Geneva量表两者分值大部分都集中于中度和高度PE可能性分值区域,其比例分别为84.61%和79.49%,两者间差异无统计学意义(P=0.482);(6)Wells量表和简化Wells量表诊断78例PE患者的灵敏度分别为84.61%和66.67%,差异有统计学意义(P<0.01)。78例确诊PE的患者中,经简化Wells量表和简化Geneva量表(二分类、三分类)评估为PE的比例分别为66.67%、44.87%和75.64%,其中,简化Geneva量表二分类与简化Wells量表、简化Geneva三分类评估法间差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:在对PE临床可能性的评估中,Wells量表、修正Geneva量表及其简化量表预测风险评分越高,则诊断PE的灵敏度越高。Wells量表和修正Geneva量表评估PE的价值相似,而简化Geneva量表三分类法较二分类、简化Wells量表更能提高临床医师对PE的警惕性,降低漏诊率。