水溶性蜂胶对溃疡性结肠炎大鼠肠系膜动脉内皮的保护作用

目的:探究水溶性蜂胶(WSP)对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠系膜动脉血管内皮功能的影响。方法:SD雄性大鼠随机分成4组(n=6),即正常对照组(NC组)、溃疡性结肠炎组(DSS组)、蜂胶低剂量组(L-WSP组)、蜂胶高剂量组(H-WSP组)。测量并记录各组大鼠结肠长度,HE染色观察结肠组织形态学变化。张力测定仪检测离体肠系膜动脉舒张功能。肠系膜血管HE染色并分析血管壁厚度/管腔半径(WT/LR)。检测肠系膜动脉中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性和一氧化氮(NO)含量。结果:与DSS组相比,L-WSP组和H-WSP组大鼠结肠长度增长(P<0.05),结肠组织的结构和形态损伤减轻,肠系膜动脉血管壁变薄,WT/LR下降(P<0.01),肠系膜动脉对乙酰胆碱(ACh)介导的舒张反应减弱(P<0.01),肠系膜动脉eNOS活性和NO含量增加(P<0.01);经左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)孵育30 min后,肠系膜动脉对ACh介导的舒张反应减弱(P<0.05)。结论:WSP能保护UC大鼠肠系膜动脉内皮损伤并改善动脉舒张功能,其机制可能与调节eNOS/NO信号通路有关。

遗传群体构建的分子标记检测体系

为了建立遗传群体构建的分子标记检测体系,利用SSR分子标记技术构建了从DNA提取、引物多态性筛选、亲本和子代植株的PCR扩增、扩增产物的电泳检测等4步检测体系,实验中仅用1对位于大麦7H染色体上的引物HvWaxy4就对7个F1子代植株进行了鉴定,通过鉴定判断出其中3个植株为F1子代,4个单株为自花授粉产生的子代。表明SSR标记技术在验证遗传群体构建过程中F1杂交植株真伪的可行性,该方法适用于自花授粉作物的遗传群体构建过程中F1植株的真伪检测。

雷公藤甲素调节NF-κB通路对脓毒血症大鼠心肌损伤的保护作用

目的:探讨雷公藤甲素(TP)对脓毒血症大鼠心肌损伤保护作用的分子机制。方法:60只SD雄性大鼠随机分为6组(n=10):假手术(sham)组、脓毒血症(CLP)组、TP低浓度干预(CLP+TP-L)组、TP中浓度干预(CLP+TP-M)组、TP高浓度干预(CLP+TP-H)组和多黏菌素B(CLP+PMX-B)组。通过盲肠结扎穿孔术(CLP)复制脓毒血症大鼠模型,造模后每12 h观察大鼠存活情况,记录生存率;术后48 h行右颈总动脉插管检测各组大鼠心功能;HE染色法测定各组大鼠心肌病理改变;检测各组大鼠血清中肌酸激酶同I酶(CK-MB)和心肌肌钙蛋白(cTn-I)的含量,血浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的含量;检测大鼠心肌组织中TLR4、TAK1和NF-κB p65蛋白的表达量。结果:与shame组相比,CLP组大鼠生存率低下,心功能各项指标均显著下降,形态学上心肌血管扩张充血、细胞灶状变性坏死、炎症细胞浸润,生化指标显示:血清中CK-MB、cTn-I、血浆中TNF-α和IL-6的含量均显著增高(P<0.05),心肌TLR4、TAK1和NF-κB p65的蛋白表达显著增加。与CLP组相比较,CLP+TP-M、CLP+TP-H组和CLP+PMX-B组大鼠生存率提高,心肌结构和功能改善,血清中CK-MB和cTn-I、血浆中TNF-α和IL-6的含量显著降低,心肌TLR4、TAK1和NF-κB p65的蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:雷公藤甲素对脓毒血症大鼠心肌损伤有明显的保护作用,通过调节NF-κB炎症信号通路,减少大鼠体内炎症因子释放,从而提高其生存率。

芝麻素对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖和胶原分泌的影响

目的:观察芝麻素对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(CF)增殖及胶原分泌的影响,并探讨其可能机制。方法:应用双酶消化和差速贴壁法获得纯化的心肌成纤维细胞,采用MTT法测定芝麻素对AngⅡ诱导的成纤维细胞增殖的影响,羟脯氨酸法测定胶原含量,ELISA法测定转化生长因子β1(TGF-β1)水平,比色法测定细胞总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)含量。结果:芝麻素可显著抑制AngⅡ诱导的成纤维细胞增殖和胶原分泌,抑制TGF-β1表达(P<0.05或P<0.01),同时可提高细胞抗氧化能力,减少脂质过氧化产物MDA含量(P<0.05或P<0.01)。结论:芝麻素可明显抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖和胶原合成,其机制可能与提高成纤维细胞的抗氧化能力、减少氧化损伤、下调TGF-β1蛋白表达有关。

血清游离脂肪酸、骨钙素与初诊2型糖尿病患者胰腺脂肪浸润程度的相关性研究

目的研究血清游离脂肪酸(FFA)、骨钙素(BGP)与初诊2型糖尿病(T2DM)患者胰腺脂肪浸润(PFI)程度的关系。方法将2019年1月至2020年12月西安市第三医院就诊的110例初诊T2DM患者纳入本次回顾性研究,T2DM患者根据有无PFI分为单纯T2DM组(n=25)和T2DM+PFI组(n=85),T2DM+PFI组患者根据PFI程度分为轻度组(n=28)、中度组(n=35)、重度组(n=22)。另选同时间段的50名健康受试者纳入对照组。收集并比较各组的血糖指标[空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(Hb A1c)]、血脂指标[总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)以及血清FFA、BGP;用MRI技术定量检查T2DM患者的胰腺脂肪分数(PFF);比较T2DM+PFI患者不同严重程度血清FFA、BGP、PFF水平;用Pearson法分析血清FFA、BGP与PEF的相关性。结果T2DM+PFI组及单纯T2DM组的TC、TG、LDL-C、FPG、Hb A1c、HOMA-IR均显著高于对照组,且T2DM+PFI组高于单纯T2DM组,而HDL-C则完全相反,差异均有统计学意义(P<0.05)。T2DM+PFI组的血清FFA较单纯T2DM组及对照组高,而血清BGP低于单纯T2DM组及对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。轻度组、中度组和重度组患者血清FFA依次升高,而BGP依次降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。初诊T2DM+PFI患者血清FFA与BGP呈负相关(r=-0.866,P<0.05),与PFF呈正相关(r=0.651,P<0.05);血清BGP与PFF呈负相关(r=-0.712,P<0.05)。结论初诊T2DM+PFI患者血清FFA显著升高,而BGP完全相反,两种指标均与PFI严重程度有关,可能在诊断T2DM患者合并PFI有一定临床价值。

丁苯酞对脓毒症大鼠肠系膜动脉内皮的保护作用

目的:探讨丁苯酞(NBP)对脓毒症大鼠肠系膜动脉内皮的作用及其可能机制。方法:将40只SD大鼠均分为假手术(SHAM)组、脓毒症(CLP)组、丁苯酞低剂量干预(CLP+NBP-L)组、丁苯酞高剂量干预(CLP+NBP-H)组。观察大鼠术后24 h在体心功能及肠腔变化;HE染色观察肠系膜动脉的形态改变;酶联免疫吸附法和硝酸还原法检测大鼠血清中IL-6、TNF-α水平和肠系膜动脉匀浆中eNOS活性及NO含量;微血管张力测定系统检测各组肠系膜动脉张力变化。结果:与CLP组相比,CLP+NBP-L组和CLP+NBP-H组大鼠心功能改善(P<0.05),肠系膜动脉损伤减轻(P<0.05);血清中IL-6、TNF-α水平降低(P<0.05),肠系膜动脉eNOS活性及NO含量升高(P<0.05);微血管对ACh介导的舒张效应改善(P<0.05);经L-NAME、NS-2028分别孵育30 min后,肠系膜动脉对ACh介导的舒张功能减弱(P<0.001)。结论:NBP可改善脓毒症大鼠肠系膜动脉的舒张效应,其机制可能是通过调节NO-sGC-cGMP通路实现对内皮的保护作用。

长链非编码RNAZEB1-AS1通过HMGB1/TLR-4信号轴加剧大鼠脑缺血/再灌注损伤

目的探讨长链非编码RNA ZEB1-AS1在脑缺血/再灌注损伤(CI/RI)中的作用及其机制。方法通过脑中动脉闭塞构建雄性SD大鼠局灶性CI/RI模型,实时定量PCR和Western blot分别检测ZEB1-AS1和HMGB1的时序表达并确定了CI/RI最佳时间(2 h/24 h)。将大鼠分为Sham组、CI/RI组、CI/RI+si-NC组、CI/RI+si-ZEB1-AS1组、CI/RI+OE-NC组、CI/RI+OE-ZEB1-AS1组。向CI/RI大鼠侧脑室注射ZEB1-AS1沉默/过表达载体及对照载体后,通过神经功能缺损评分和转盘实验分析认知功能;干湿重法分析脑水含量;Western blot检测白蛋白水平以评价血脑屏障完整性;ELISA法分析脑脊液和血清IL-1β和TNF-α水平。分别用FJC和TUNEL法检测CI/RI大鼠皮层中神经元丢失和细胞凋亡情况,Western blot分析HMGB1和TLR-4水平。此外,体外建立SH-SY5Y细胞氧-糖剥夺/复氧模型来模拟缺血/再灌注微环境,TUNEL法、Hoechst 33258染色、流式细胞术检测ZEB1-AS1沉默对神经元凋亡的影响;Western blot分析HMGB1和TLR-4水平。结果qPCR和Western blot结果显示,ZEB1-AS1和HMGB1在CI/RI大鼠脑组织中的表达随着再灌注时间的延长升高(24 h达到峰值),而后逐渐降低。神经功能缺损评分和转盘试验结果显示,与OE-NC组相比,ZEB1-AS1过表达加重了CI/RI大鼠认知功能受损(P<0.05);而si-ZEB1-AS1组大鼠的认知功能则好于si-NC组(P<0.01)。OE-ZEB1-AS1组大鼠的脑水含量高于OE-NC组(P<0.05);而与si-NC组相比,si-ZEB1-AS1组大鼠的脑水含量减少(P<0.01)。血脑屏障渗漏检测数据提示,si-ZEB1-AS1组大鼠脑脊液中白蛋白的含量低于si-NC组(P<0.01);OE-ZEB1-AS1组大鼠脑脊液中的白蛋白含量则高于OE-NC组(P<0.05)。ELISA结果显示,si-ZEB1-AS1组大鼠脑脊液和血清IL-1β和TNF-α水平低于si-NC组(P<0.01);而OE-ZEB1-AS1组大鼠脑脊液和血清IL-1β和TNF-α含量高于OE-NC组(P<0.01)。OE-ZEB1-AS1组大鼠皮层FJC阳性神经元数量高于OE-NC组(P<0.01);与此相反,si-NC组相比,ZEB1-AS1敲减则降低了FJC阳性神经元数量(P<0.01)。Western blot结果显示,与OE-NC组相比,ZEB1-AS1过表达促进了HMGB1和TLR-4水平(P均<0.01);而ZEB1-AS1敲减则产生相反的结果(P<0.01)。细胞水平上,与si-NC组相比,ZEB1-AS1敲减降低了TUNEL阳性细胞数(P<0.01);流式细胞术检测结果进一步证实该现象。此外,Western blot结果进一步证实,ZEB1-AS1敲减下调了HMGB1和TLR-4水平(P均<0.01)。结论长链非编码RNA ZEB1-AS1通过HMGB1/TLR-4信号轴加剧脑缺血/再灌注损伤。

硫化氢参与急性心肌缺血大鼠的中枢调控时相性实验研究

目的:通过结扎大鼠心脏左侧冠脉前降支复制急性心肌缺血(AMI)模型,探究硫化氢在急性心肌缺血大鼠中枢调控的时相性变化。方法:32只雄性SD大鼠随机分为4组(n=8),正常对照组(NC)、缺血2 h组(R 2 h)、缺血3 h组(R 3 h)、缺血4 h组(R 4 h)。通过肢体Ⅱ导联记录各组大鼠心电图(ECG)变化,行颈总动脉插管测量各组大鼠血流动力学指标,检测各组大鼠血清中CK、LDH的活性,TTC染色和HE染色法分别观察各组大鼠心肌形态学变化,Western blot法检测各组大鼠延髓及三叉脊束核组织中胱硫醚β合成酶(CBS)表达,亚甲蓝分光光度法检测各组大鼠延髓孤束核和三叉脊束核中硫化氢(H 2 S)的含量。结果:①R 2 h、R 3 h、R 4 h组HR均低于NC组(P<0.05),R 4 h组HR均低于R 2 h和R 3 h组(P<0.05),其他各组HR差异无统计学意义(P>0.05);R 2 h、R 3 h、R 4 h组PR及Tp-Te/QT比值均高于NC组(P<0.05),R 4 h组PR及Tp-Te/QT比值均高于R 2 h和R 3 h组(P<0.05),其他各组PR及Tp-Te/QT比值差异无统计学意义(P>0.05);R 2 h、R 3 h、R 4 h组ST高度均高于NC组(P<0.05),R 3 h和R 4 h组ST高度均高于R 2 h组(P<0.05),其他各组ST高度差异无统计学意义(P>0.05);②R 2 h、R 3 h、R 4 h组MAP低于均NC组(P<0.05),R 4 h组MAP低于R 2 h组(P<0.05),其他各组MAP差异无统计学意义(P>0.05);R 2 h、R 3 h、R 4 h组(+dp/dtmax)/LVDP及-dp/dtmax均低于NC组(P<0.05),且随缺血时间延长(+dp/dtmax)/LVDP及-dp/dtmax降低(P<0.05);R 2 h、R 3 h、R 4 h组LVDP×HR均低于NC组(P<0.05),其他各组LVDP×HR差异无统计学意义(P>0.05);R 2 h、R 3 h、R 4 h组CK均高于NC组(P<0.05),且随缺血时间延长CK升高(P<0.05);R 2 h、R 3 h、R 4 h组LDH均高于NC组(P<0.05),R 4 h组LDH高于R 2 h组(P<0.05),其他各组LDH差异无统计学意义(P>0.05);③随着缺血时间的延长大鼠心肌梗死面积显著增加;④NC组心肌细胞排列整齐,结构完整;缺血组心肌细胞排列紊乱,纵切呈波浪状改变,部分肌纤维断裂;⑤R 2 h、R 3 h、R 4 h组H 2S含量均低于NC组(P<0.05),R 3 h和R 4 h组H 2S含量均低于R 2 h组(P<0.05),其他各组H 2S含量差异无统计学意义(P>0.05);R 2 h、R 3 h、R 4 h组CBS表达均低于NC组(P<0.05),且随缺血时间延长CBS表达减少(P<0.05)。结论:AMI过程中大鼠中枢H 2S含量与CBS的表达量随缺血时间的延长而减少,提示内源性H 2S可能参与AMI的中枢调控。

老年人慢性便秘相关因素的研究进展

慢性便秘是一种常见的消化道疾病,以排便次数减少、粪便量减少、粪便干结、排便费力为主要表现.慢性便秘发病率高并且呈现逐年上升趋势,老年人是慢性便秘的高发人群.慢性便秘不仅能引起痔、裂等肛门部疾病,还能诱发和加剧各种心脑血管疾病,严重的甚至诱发结肠癌,严重影响老年人的生活质量,并且其产生的医疗费用不菲,加重了患者和社会的经济负担.本文通过对近年来相关文献的梳理、分析、总结,对老年人慢性便秘的流行病学、相关因素研究进展等方面作一综述.