敲除PAMM基因对小鼠白色和棕色脂肪组织基因表达的影响

目的:巨噬细胞集落刺激因子诱导单核细胞活化的类过氧化物酶2(peroxiredoxin-like 2 activated in M-CSF stimulated monocytes,PAMM)是一种具有抗炎、抗氧化功能的蛋白,在脂肪组织中高表达,本文拟利用基因敲除小鼠,探究PAMM对白色和棕色脂肪组织形态及基因表达等的影响,以期为其功能研究提供新思路。方法:利用CRISPR-Cas9等技术构建PAMM基因敲除(knockout,KO)小鼠,用野生型(wild-type,WT)小鼠作为对照。收集腹股沟皮下白色脂肪组织(inguinal adipose tissue,IAT)和背部棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT),通过HE染色观察组织形态,利用RNA-seq和RT-qPCR检测相关基因的表达。结果:通过基因组PCR及测序,证明基因敲除小鼠构建正确。敲除PAMM后IAT和BAT形态无明显变化,但E2F靶点、未折叠蛋白反应等基因集在IAT或BAT中富集。比较WT和KO小鼠组织,发现33个基因的变化趋势在IAT和BAT中保持一致;而仅在IAT中出现变化的基因,分布在胞外、胞膜等部位,参与免疫和趋化反应等,与钙信号通路等相关;仅在BAT中出现变化的基因,分布在胞外基质、胞核等部位,参与葡萄糖稳态、生物节律等过程。RT-qPCR检测钙通路及生物节律相关基因,变化趋势与测序结果类似。本文还观察了敲除PAMM对IAT和BAT之间差异表达基因的影响,发现WT和KO小鼠BAT/IAT的差异基因和通路大多相同,但也有部分基因和通路发生了变化。结论:PAMM敲除对IAT和BAT的形态结构无明显影响,但显著影响了二者的基因表达及相关信号通路,还可能影响IAT和BAT之间的相互作用。

普鲁兰多糖/羧甲基壳聚糖复合膜的制备及其对罗氏沼虾的保鲜效果

为了开发具备安全优质保鲜效果的复合膜,以普鲁兰多糖和羧甲基壳聚糖(carboxymethyl chitosan,CMC)为原料,研究不同普鲁兰多糖添加量对普鲁兰多糖/CMC保鲜复合膜的理化性质的影响,并采用性能最优的复合膜对罗氏沼虾进行保鲜。结果显示,普鲁兰多糖的加入可以改变CMC膜的抗拉伸强度和断裂伸长率,减小其水蒸气透过系数并增大其透光率。根据复合膜的红外光谱推测,复合膜中普鲁兰多糖和CMC发生了相互作用。通过扫描电镜图可以看出,复合膜表面光滑,无气孔,表现出较好的生物相容性。综合考虑,普鲁兰多糖和CMC 1∶1(质量比)复合膜的性能最优。通过比较罗氏沼虾在贮藏过程中的感官评分、挥发性盐基氮、pH值、硫代巴比妥酸值和菌落总数等指标,发现复合膜可将罗氏沼虾货架期延长4 d。研究表明,普鲁兰多糖与CMC可制备出性能优良的复合膜,该复合膜可控制罗氏沼虾劣变,对延长其货架期具有良好效果。

阿托伐他汀改善急性心肌梗死小鼠炎症诱导性脂肪因子代谢紊乱

目的:明确急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)期间炎症激活与脂肪因子代谢紊乱的关系,探讨阿托伐他汀的潜在治疗作用及其机制。方法:32只C57BL/6小鼠随机分为4组:假手术组、AMI组、小剂量阿托伐他汀组[2 mg/(kg.d)]和大剂量阿托伐他汀组[20 mg/(kg.d)]。干预3周后,后3组采用冠状动脉结扎术构建AMI模型,测定小鼠血浆高敏C反应蛋白(high sensitive C reaction protein,hs-CRP)浓度,以及血浆和组织中脂联素和抵抗素的表达。体外诱导小鼠3T3L1前脂肪细胞分化成熟后,观察氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)对细胞脂联素和抵抗素表达的影响,并研究不同剂量阿托伐他汀干预对ox-LDL所致脂肪因子代谢紊乱的作用。结果:动物实验显示AMI小鼠血浆hs-CRP和抵抗素浓度均明显升高,而脂联素明显降低。阿托伐他汀预处理呈剂量依赖性抑制AMI小鼠血浆上述因子浓度变化。hs-CRP和抵抗素在小鼠脂肪组织中表达也观察到类似的结果。相关性分析显示血浆hsCRP浓度与抵抗素呈正相关,而与脂联素呈负相关。体外试验显示ox-LDL刺激可上调脂肪细胞抵抗素表达,同时降低脂联素表达,而阿托伐他汀呈剂量依赖性逆转上述ox-LDL效应。结论:AMI小鼠体内炎症激活导致脂肪因子代谢紊乱,而阿托伐他汀通过抗炎作用可改善此类脂肪因子代谢紊乱。

二甲双胍抑制ob/ob肥胖小鼠肝ApoA5表达降低血浆三酰甘油水平

目的:探讨肥胖相关性高三酰甘油(triglyceride,TG)血症和二甲双胍治疗效应是否与载脂蛋白A5(apolipoprotein A5,ApoA5)相关。方法:对ob/ob小鼠于常规饲料和二甲双胍干预4周,测定血浆和肝TG和ApoA5的水平。IAR20肝细胞接受二甲双胍和/或ApoA5敲除干预,测定TG含量和ApoA5表达。结果:Ob/ob小鼠血浆和肝ApoA5和TG的水平明显增高,二者血浆浓度呈明显正相关,而二甲双胍呈剂量依赖性降低二者血浆和肝水平。二甲双胍呈剂量依赖性降低IAR20肝细胞TG含量和ApoA5表达,但ApoA5敲除组可消除二甲双胍上述效应。结论:Ob/ob小鼠肝ApoA5表达上调导致血浆TG升高,而二甲双胍抑制其肝ApoA5表达、降低血浆TG。

南极磷虾羧甲基壳聚糖对罗氏沼虾的保鲜效果

以自制的南极磷虾羧甲基壳聚糖(CMC)为保鲜剂,将形体接近的罗氏沼虾浸泡于不同质量分数(0.5%、1.0%、1.5%)的CMC中,取出沥干后形成保鲜薄膜,以不浸泡CMC的罗氏沼虾为对照,在(4±1)℃条件下贮藏7d,通过挥发性盐基氮(TVB-N)值、pH、硫代巴比妥(TBA)值、菌落总数、K值和感官评分等指标来评价罗氏沼虾在贮藏期间的品质变化,探究南极磷虾CMC对罗氏沼虾的保鲜效果。结果表明:从贮藏1d开始,同一贮藏时间的CMC处理组的TVB-N值、TBA值、菌落总数和K值均小于对照组的,而感官评分高于对照组的;在贮藏后期(5~7 d)的同一贮藏时间,CMC处理组的pH低于对照组的;在整个贮藏期间,除少数几个时间点外,1.0%CMC处理组的TVB-N值、pH、TBA值、菌落总数、K值均小于0.5%、1.5%CMC处理组的,而感官评分则高于0.5%、1.5%CMC处理组的。综合可得,1.0%CMC对罗氏沼虾的保鲜效果更好,能有效降低罗氏沼虾体内微生物数量和酶活性,抑制虾体内蛋白质分解和脂肪氧化程度,延长罗氏沼虾贮藏期。

艾滋病误诊为Sweet综合征1例

患者男,52岁。口腔疼痛性溃疡2个月,全身散发水肿性红斑、斑块伴疼痛和瘙痒1周。皮肤科情况:颜面、躯干及四肢可见散在分布浸润性水肿性红斑及斑块,界清,部分融合,呈环状或类圆形,部分表面可见绿豆大丘疹,似水疱,部分皮疹破溃并结痂。鼻端、舌尖及舌背可见多个浅溃疡,基底潮红,上覆厚层黄白色伪膜样物。入院后按Sweet综合征对症治疗,皮损无改善,继续有新发皮损,发热加重。刮取患者舌部溃疡伪膜样分泌物镜检发现真菌菌丝,培养鉴定为白念珠菌。采用流式细胞术分析外周血发现淋巴细胞亚群Th/Ts(CD4^+/CD8^+)为0.00,HIV抗体初筛实验与确证实验均呈阳性。修正诊断:获得性免疫缺陷综合征。

南极磷虾羧甲基壳聚糖(CMC)的微波辅助法制备及其性能

为研究一种快速高效制备羧甲基壳聚糖(CMC)的方法,以南极磷虾Euphausia superba虾壳为原料,采用微波辅助法制备CMC,通过微波功率、微波时间、质量分数40%的NaOH溶液用量、体积分数50%的氯乙酸-异丙醇溶液用量等4个因素的单因素试验和正交试验,以CMC取代度作为评价指标确定最佳工艺参数,对所得产物进行结构表征,并测定CMC的水溶性和抗氧化性能。结果表明:优化得出的最佳制备工艺为微波功率540 W、微波时间30 min、40%NaOH溶液总用量100 mL、50%氯乙酸-异丙醇溶液用量为40 mL,在此条件下,CMC取代度为0.95;结构表征分析显示,所制备产物为N,O-CMC;CMC在pH为4~12时均具有良好的水溶性,且羟基清除能力和总抗氧化能力均优于壳聚糖(CS)。研究表明,采用微波辅助法能够显著提高南极磷虾CMC的制备效率,所得CMC具备良好的水溶性和抗氧化性,该研究结果为CMC作为水溶性抗氧化剂的应用提供了理论基础。

乡村小学生课后教育问题及其对策研究——基于广东省汕头市3个乡村的调研

当前乡村振兴战略背景下,对乡村小学生课后教育问题的关注依然较少,缺乏相关研究与有效的解决对策。运用问卷调查法和访谈法,深入广东省汕头市的3个乡村进行实地调研,发现乡村小学生课后时间充裕但未得到合理利用,课后活动“空虚化”问题严峻,对课后教育的期待高且需求大;乡村地区公共教育资源匮乏,文化资源丰富但未得到有效利用。基于乡村课后教育现状,应明确乡村课后教育定位,健全课后服务配套政策,确保优先向农村倾斜;多元主体协同育人作用,群策群力共促乡村教育发展;有效利用乡村文化资源,构建乡村课后教育模式。

甲壳素/壳聚糖的分离提取方法及在食品工业中的应用研究现状

甲壳素是自然界中仅次于纤维素的天然高分子化合物,具有无毒性和生物相容性,脱乙酰基后可产生生物活性更强的壳聚糖,在食品工业具有较好的发展前景。该文首先介绍了甲壳素/壳聚糖的分离提取方法,包括传统的化学法、生物法以及几种新兴的处理提取方如乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)法、离子液体法及资源化利用法等;进而综述了甲壳素/壳聚糖在食品工业的应用研究进展,如功能性食品、食品保鲜剂、可食用包装膜、食品絮凝剂、水处理吸附剂等;最后对甲壳素/壳聚糖的工艺改进方法和未来的发展方向进行了展望。旨在为甲壳素/壳聚糖的绿色生产及其在食品工业的应用提供一定的参考。

先天性厚甲症一家系的KRT基因突变分析

目的检测一先天性厚甲症(PC)家系的致病基因KRT6a、KRT6b、KRT16、KRT17,以期找到其可能的致病突变。方法常规收集该家系成员外周静脉血,同时采集同地区100名健康自愿者外周血作为正常对照。分别提取DNA,运用聚合酶链反应(PCR)扩增基因KRT6a、KRT6b、KRT16、KRT17的全部外显子及其侧翼内含子序列,产物纯化后直接行DNA测序,比对分析其基因突变位点和类型。结果 PC患者KRT6a基因第1号外显子存在错义突变c.521T>C(p.Phe174Ser),而正常家系成员和正常对照组均无此突变,KRT6b、KRT16和KRT17基因也未发现致病突变。结论该PC家系的患者存在一个错义突变——KRT6a基因第1号外显子c.521T>C(p.Phe174Ser)。该突变是导致PC发病的分子基础。

虾青素-羧甲基壳聚糖复合涂膜对罗氏沼虾保鲜效果的影响

为研究虾青素-羧甲基壳聚糖复合涂膜液对罗氏沼虾的保鲜效果,该文以羧甲基壳聚糖和实验室自制虾青素为主要原料,分别制得不同质量浓度(30、60、90 mg/L)的虾青素-羧甲基壳聚糖复合涂膜液,对罗氏沼虾进行涂膜处理,以未添加虾青素的羧甲基壳聚糖组为对照,未经涂膜处理组为空白,在(4±1)℃条件下贮藏并测量罗氏沼虾的感官评分、菌落总数、pH、总挥发性盐基氮(total volatile basic nitrogen,TVB-N)、硫代巴比妥酸反应物(thiobarbituric acid reactive substance,TBARS)值及K值等指标的变化。结果表明,与空白组相比,不同质量浓度的虾青素-羧甲基壳聚糖复合涂膜保鲜组在贮藏期间均可有效延缓罗氏沼虾的腐败变质。其中60 mg/L和90 mg/L的复合保鲜液组的保鲜效果较明显,在冷藏7 d后罗氏沼虾的TVB-N值、K值、菌落总数、pH、TBARS值及感官评分均显著优于对照组。因此,虾青素-羧甲基壳聚糖复合涂膜保鲜罗氏沼虾是一种安全、有效、可行的方法,能够抑制罗氏沼虾在冷藏期间感官品质下降,延缓脂质氧化,可延长罗氏沼虾货架期3~4 d。

野生型和突变型ABCB6红色荧光融合蛋白表达载体的构建

目的 ABCB6基因突变与多种疾病相关,尤其是遗传性泛发型色素异常症。为进一步研究ABCB6在色素代谢中的作用,构建野生型和突变型ABCB6红色荧光蛋白融合蛋白表达载体p DsRed-wt-ABCB6和p DsRed-L356P-ABCB6,并观察ABCB6在人黑素细胞瘤细胞系A375中细胞定位情况。方法以前期构建的p IRES2-Zs Green1-ABCB6表达载体为基础构建野生型和突变型ABCB6蛋白与红色荧光蛋白融合表达载体p DsRed-wt/L356P-ABCB6,将构建的质粒转染A375细胞,Western blot检测细胞中ABCB6的表达水平,激光共聚焦显微镜观察ABCB6在细胞中的定位。结果 p DsRed-wt/L356P-ABCB6质粒经菌落PCR、双酶切和测序鉴定正确,转染A375细胞后,Western blot检测细胞中ABCB6表达量显著增高,激光共聚焦显微镜观察到野生型和突变型ABCB6均定位于细胞质中。结论 p DsRed-wt/L356P-ABCB6融合蛋白表达载体成功构建,观察了ABCB6在细胞中的定位,为进一步研究ABCB6的功能及其在相关疾病中致病机制奠定了良好的基础。

微波-超声协同强化NaCl改性沸石对罗氏沼虾模拟保活中水质氨氮去除的研究

为提高罗氏沼虾(Macrobyachium rosenberqii)保活的存活时间和存活率,通过正交试验确定微波与超声波协同强化NaCl溶液改性沸石工艺的最佳条件,测试水质氨氮质量浓度与pH、沸石投放量与吸附时间对其吸附性能的影响,研究罗氏沼虾保活过程中存活率与水质指标的变化并对改性沸石进行表征分析。结果显示:以粒径为1~2 mm的沸石进行先微波(230 W、10 min)后超声(560 W、28 kHz、50 min)强化氯化钠(NaCl)溶液(摩尔浓度0.8 mol/L)改性,在氨氮质量浓度为20 mg/L、pH为7.0的水体中投放30 g/L的改性沸石,吸附1 h的水质氨氮去除率相比未改性沸石提高20.88%;表征发现,沸石改性后比表面积增大,晶格未造成破坏,Na+交换率显著提高,沸石硅铝比升高,能较好维持其电荷平衡;应用于罗氏沼虾模拟保活,使其存活率显著提高,其水质指标均得到有效控制。微波-超声波协同强化氯化钠溶液改性沸石可有效去除氨氮,可延长罗氏沼虾保活时间、提高存活率。

响应面法优化罗氏沼虾复合保鲜工艺的研究

为提高罗氏沼虾在冷藏中的货架期,探究复合保鲜剂保鲜罗氏沼虾的最优配方及其保鲜效果。在单因素试验的基础上,选用ε-聚赖氨酸、茶多酚、壳聚糖复配保鲜剂,利用Box-Behnken中心组合试验设计及响应面(RSM)分析,确定复合保鲜工艺的最佳配方,并通过挥发性盐基氮(TVB-N)、硫代巴比妥酸(TBA)值、菌落总数、感官评价的测定,揭示罗氏沼虾保鲜剂保鲜规律。结果表明:复合保鲜剂的最佳配方为ε-聚赖氨酸0.3%、茶多酚0.3%、壳聚糖2.3%。经检验证实:响应面模型与实际情况拟合较好,在此条件下保鲜罗氏沼虾,在一定程度上可抑制虾肉菌落生长,减缓脂肪氧化,冷藏(4±1)℃下可使其货架期由4 d延长至9 d。研究显示:响应面法优化罗氏沼虾冷藏辅助复合保鲜剂保鲜可有效抑制其腐败变质,以延长其货架期。

rb-bFGF联合激光治疗痤疮凹陷性瘢痕的效果观察

目的:探讨重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶(rb-bFGF)联合点阵超脉冲二氧化碳(CO_(3))激光治疗痤疮凹陷性瘢痕患者的效果。方法:将入组的86例痤疮凹陷性瘢痕患者随机分为2组,即对照组和观察组各43例,对照组给予点阵超脉冲CO_(3)激光治疗,观察组基于以上加予rb-bFGF治疗,对比两组痤疮瘢痕权重评分(ECCA)、主诉症状视觉模拟评分(VAS)、水肿持续时间、脱痂时间及炎症性色素沉着(PIH)持续时间、治疗前后的皮肤生理指标[经皮水份丢失(TEWL)、pH值、角质层含水量、皮肤红斑情况(a值)]、治疗前后的血清p38MAPK通路蛋白相关指标[重组人丝裂原活化激酶1(MEK1)、重组人丝裂原活化激酶2(MEK2)、细胞外信号调节激酶1(ERK1)及细胞外信号调节激酶2(ERK2)]和治疗期间的不良反应。结果对比两组治疗后ECCA评分、VAS评分,观察组显著低于对照组(P<0.05);对比两组水肿持续时间、脱痂时间及PIH持续时间,观察组显著短于对照组(P<0.05);对比两组治疗前后TEWL值、pH值及a值,观察组显著低于治疗前及对照组(P<0.05),对比两组治疗前后角质层含水量,观察组显著高于治疗前及对照组(P<0.05),以上指标对照组治疗前后差异无统计学意义(P>0.05)。对比两组治疗前后血清MEK1、MEK2、ERK1及MEK2水平,两组显著低于治疗前(P<0.05),且观察组显著低于对照组(P<0.05);观察组的不良反应总发生率显著低于对照组(9.30%vs 25.58%,P<0.05)。结论:rb-bFGF辅助点阵超脉冲CO_(3)激光治疗痤疮凹陷性瘢痕,能明显促进术后创伤愈合,改善皮肤生理状态,减轻皮肤炎性损伤,减少不良反应。

新型降胆固醇药物研究进展

动脉粥样硬化性心血管疾病（ASCVD）是一组以动脉粥样硬化为共同病理基础,主要累及心、脑、肾及其他外周动脉,进而造成以动脉缺血为主要临床表现的疾病症候群[1],其已成为全球发病率最高、死亡率最大的一组疾病,且在我国呈逐年加重趋势.ASCVD的病理基础是动脉粥样硬化,而低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）是唯一能独立致ASCVD的脂蛋白,它的升高是ASCVD的重要致病因素之一,故降低LDL-C是防治ASCVD的基石.现有降胆固醇药物主要分为两大类,即他汀类和非他汀类.他汀由于卓越的降胆固醇疗效、良好的安全性以及丰富的证据支持,在临床上应用最为广泛.尽管如此,该药仍存在诸多限制,例如：（1）部分人群难以耐受他汀;（2）部分疾病人群（尤其是家族性高胆固醇血症）,单用他汀难以达标,这些问题均将限制该药应用.于是,新型降胆固醇药物的研发提上日程且方兴未艾,本文将对目前在研的几类降胆固醇药物的最新进展进行综述.

3种虾壳中虾青素提取工艺优化及其抗氧化活性比较

为有效提高虾壳废弃物中虾青素的提取率,以罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)、南极磷虾(Euphausia superba)及凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)为原料,利用有机溶剂浸提法,通过单因素试验比较3种虾壳中虾青素的提取效果,并对南极磷虾虾壳中虾青素提取工艺参数进行正交优化;利用红外光谱比较虾青素标准品与3种虾壳制得的样品,对样品中虾青素进行定性分析;以VC作为对照,探索3种虾壳中虾青素的抗氧化能力。结果表明:罗氏沼虾、南极磷虾及凡纳滨对虾在以二氯甲烷为提取液,提取温度为30℃,提取时间为2 h条件下可得到最大提取率,南极磷虾虾壳中的虾青素的提取率显著高于凡纳滨对虾及罗氏沼虾虾壳中的虾青素。而料液比对三者中虾青素的提取率的影响效果不同,南极磷虾和凡纳滨对虾在1∶30 g/mL料液比条件下的提取率达到最大值分别为234.72μg/g和172.21μg/g,而罗氏沼虾在料液比为1∶20 g/mL条件下最大提取率为88.69μg/g。南极磷虾虾壳中提取虾青素的最佳条件为料液比1∶30 (g∶mL),提取温度30℃,提取时间2.5 h,此条件下虾青素的提取率明显提高,达到245.01μg/g。红外光谱证明实验所得虾青素与虾青素标准品具有极为相似的官能团振动吸收峰。通过抗氧化实验研究发现,3种虾壳中的虾青素均具有较好的抗氧化活性,其中以罗氏沼虾虾壳中虾青素抗氧化活性为最佳。