基于甲型流感病毒H1N1亚型血凝素的mRNA疫苗制备和加强免疫策略研究

目的制备甲型流感病毒H1N1亚型血凝素(hemagglutinin,HA)mRNA疫苗,并探讨不同加强免疫策略的免疫保护作用。方法以荧光素酶(firefly luciferase,Fluc)为报告基因,构建Fluc mRNA-脂质纳米颗粒(lipid nanoparticle,LNP)疫苗,通过小鼠活体成像实验鉴定Fluc mRNA-LNP疫苗肌内注射后在体内的表达情况。进一步构建H1N1亚型(A/Michigan/45/2015)HA(M15-HA)的mRNA-LNP疫苗,将20、10、5和1μg M15-HA mRNA-LNP疫苗通过肌内注射分别免疫不同剂量组小鼠2次(间隔3周),酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定小鼠第2次免疫2周和4周后血清抗体滴度,血凝抑制试验检测功能性抗体水平。第2次免疫后40 d,采用1μg mRNA疫苗或10μg HA蛋白亚单位疫苗对1μg剂量免疫组小鼠进行加强免疫,接种2周和4周后用ELISA和血凝抑制试验分别检测特异性抗体及功能性抗体水平。结果活体成像实验结果显示,小鼠接种Fluc mRNA-LNP疫苗1 d后即能在小鼠体内检测到荧光素酶活性。制备获得的M15-HA mRNA-LNP疫苗2次免疫小鼠2周和4周后,所有剂量组小鼠的特异性抗体水平均较免疫前显著上升(均P=0.000);血凝抑制试验结果显示,20μg和10μg剂量组的功能性抗体水平均较PBS对照组显著升高(均P<0.05)。对1μg低剂量组小鼠进行HA蛋白或M15-HA mRNA-LNP的加强免疫后,均诱导产生了更高水平的特异性抗体和功能性抗体,并能维持较长时间;2种不同加强免疫策略之间差异无统计学意义。结论成功制备M15-HA mRNA-LNP疫苗,显示出良好的免疫原性和抗体中和活性;低剂量mRNA疫苗免疫2次后,同源mRNA疫苗和异源蛋白疫苗加强免疫均可以诱导更强的免疫反应。

二甲双胍与精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液治疗2型糖尿病临床观察

目的探析在2型糖尿病患者临床治疗中应用精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液与二甲双胍的效果。方法选取2019年5月至2022年2月我院接治的100例2型糖尿病患者进行探析,采用随机数字表法进行分组处理,对照组50例采用精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液治疗方法,研究组50例实施精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液与二甲双胍联合治疗方法。比较2组治疗前后血糖指标变化、胰岛β细胞功能、生活质量评分指标、不良反应发生情况以及临床治疗效果。结果治疗前,研究组患者血糖指标、胰岛β细胞功能及生活质量水平与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。经不同方式治疗后,研究组血清糖化血红蛋白、空腹血糖以及餐后2 h血糖指标均低于对照组(P<0.05);研究组空腹胰岛素及胰岛β细胞功能指数低于对照组,胰岛素抵抗指数高于对照组(P<0.05);研究组生活质量和临床治疗效果高于对照组,不良反应总发生率低于对照组。结论在2型糖尿病患者中联合运用精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液与二甲双胍治疗方法,可以有效降低患者血糖指标以及不良反应发生概率,改善患者胰岛β细胞功能,促使患者生活质量和临床治疗效果显著提升,值得临床运用推广。

盘基网柄菌——研究致病机制的宿主模型

盘基网柄菌作为致病菌宿主模型的研究主要有:筛选致病菌株及相应突变菌株毒性;鉴别对致病菌易感性和抗性的突变细胞宿主;宿主细胞的有效标记、已完成的基因组计划以及宿主细胞与致病菌间信号转导通路的相互作用;这些都表明盘基网柄菌是致病机制研究的理想宿主模型。

血培养分离碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌临床分布和耐药基因分析

目的分析血培养分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的临床分布和耐药基因特征,为临床合理用药提供参考。方法收集2010—2019年上海交通大学医学院附属新华医院血培养分离的非重复CRKP临床分离株153株。对153株CRKP进行多位点序列分型(MLST)和耐药基因检测。收集感染患者临床资料,分析CRKP临床分布特征。结果2010—2019年,上海交通大学医学院附属新华医院血培养CRKP检出率呈上升趋势。有71.24%(109/153)的CRKP分离自重症监护病房(ICU);成人患者占52.29%,主要为>60岁老年患者(72.50%);儿童患者主要为≤1岁婴幼儿(64.38%)。有64.71%的感染患者治疗后痊愈出院。153株CRKP主要为ST11型(86.92%),患者集中在儿童ICU(29.32%)和外科ICU(18.80%)。碳青霉烯耐药基因筛查结果显示,153株CRKP中,有131株携带bla_(KPC-2),11株携带bla_(NDM-1),4株携带bla_(NDM-5),7株未检测到碳青霉烯类耐药基因;131株携带bla_(KPC-2)的CRKP中,有129株(98.47%)为ST11型,检出率达84.31%(129/153)。同时携带bla_(NDM-1)和bla_(NDM-5)的CRKP均为非ST11型,感染对象主要为≤1岁的婴幼儿。结论上海交通大学医学院附属新华医院血培养CRKP检出率呈现上升趋势,主要集中在ICU,ST11型bla_(KPC-2)为主要的耐药基因型,临床应根据这一特征及时干预,合理用药。

gp150蛋白对盘基网柄菌发育阶段膜蛋白的影响

用生化抽提细胞质膜蛋白和SDS-梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法比较gp150突变AK127细胞和野生型KAx-3细胞质膜蛋白的结果显示,各发育时期的AK127细胞和KAx-3细胞在含量方面比较恒定的质膜蛋白组分是68kD,60kD,54kD,50kD,37kD,34kD和31kD条带,它们并不因为AK127细胞缺失gp150分子而有所改变.发育12h后,蛋白含量变化最为明显的是45kD,25kD,20kD和17kD蛋白,由于同时期突变细胞的这些蛋白条带含量没什么变化,推测这些条带的变化与gp150分子有密切关系;同时野生型细胞还增加了两条10～12kD蛋白条带,这些蛋白可能与gp150分子一样在发育中有表达的时间性和空间性,且与细胞信号传递有密切关系.

上海市浦东新区社区中医全科医生家庭医生签约服务现状调查

目的:了解上海市浦东新区社区中医全科医生家庭医生签约服务现状,为促进中医药融入家庭医生签约服务提供参考。方法:2020年11—12月,采用分层随机抽样方法抽取上海市浦东新区29家社区卫生服务中心中医类全科医生282人,通过问卷星调查方式对其进行家庭医生签约服务状况调查。结果:实际完成签约数量>2000人的仅有6人,占2.2%。有49.7%的调查者认为参与家庭医生签约服务有必要,有59.3%的调查者认为中医全科医生与西医全科医生同等重要,有88.3%的调查者认为可以提供更专业的中医服务。结论:上海市浦东新区社区中医全科医生家庭医生签约指标达标率较低。建议加强中医全科医生家庭医生签约服务的宣传力度,提高各方面的支持力度,发挥中医药服务优势,探索中西医组合签约方式,使中医药服务更好地融入家庭医生签约服务。

卡介苗的免疫保护机制及其改造策略进展

结核病是目前全球死亡率最高的单一感染性疾病。卡介苗(bacille Calmette-Guérin,BCG)作为唯一的预防性疫苗,在包括中国在内的结核病高危地区的新生儿出生时即被接种,在结核病防控中发挥了重要作用。然而,近年来的研究结果显示,BCG的保护力具有一定的时效性,尤其在成年人中保护力明显减弱。因此,如何改造BCG以增强其抗结核免疫保护作用将成为结核病疫苗研发和结核病防控的重点研究方向之一。作者复习相关文献,从BCG的改造和接种两方面论述BCG的研究现状和未来应用策略。

磁疗保健带治疗狭窄性腱鞘炎120例疗效观察

狭窄性腱鞘炎是骨伤科临床常见与多发病，常发生的部位是桡骨茎突、屈指肌腱和桡侧伸腕肌腱等处，多是由于长期劳损或外力损伤致局部无菌性炎症，主要表现为局部疼痛和功能障碍，或伴有弹响，女性患者居多。

抗结核治疗中患者外周结核分枝杆菌抗原水平与特异性免疫应答相关性分析

目的:活动期结核病患者外周呈现相当水平的结核特异性细胞免疫应答,在治疗过程中也呈现一定的动态变化特征,这种结核特异性细胞免疫应答的抗原驱动因素则还未知。本研究通过同步分析肺结核患者在抗结核治疗过程中外周特异性抗原和抗原特异性T细胞应答水平的动态变化,探讨外周抗结核特异性细胞免疫应答的理论依据。方法:利用外周血抗原富集-质谱鉴定技术动态检测外周血浆中结核特异性抗原CFP-10在患者抗结核治疗过程中含量的动态变化,并采用流式细胞术同步分析CFP-10刺激后的T细胞应答水平,分析CFP-10含量变化与不同细胞因子分泌T细胞数量的相关性。结果:CFP-10抗原水平在患者治疗过程中呈现个体化差异,同时在TB治疗中CFP-10含量与CFP-10特异性IFN-γ^+CD4^+T细胞比例具有显著相关性(P=0.029),但是CFP-10的含量与TNF-α^+CD4^+T细胞比例之间则无相关性(P=0.98)。结论:本研究获得了结核病患者治疗过程中外周结核病原菌抗原的动态变化特征,据此可推断目前所采用的IFN-γ释放实验某种程度上可以反映患者外周结核分枝杆菌抗原的载量,上述基于结核病原学和机体免疫应答水平的同步检测,有利于进一步解析抗结核免疫应答的抗原驱动因素,并为建立新型抗结核治疗疗效评价的生物标志物提供前期理论依据。

外周血单核细胞在抗PD-L1单抗治疗非小细胞肺癌疗效评价中的作用

目的:分析晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者接受抗PD-L1单抗治疗前后外周血单核细胞表面PD-L1及PD-1表达高低与疗效的相关性,探讨其在疗效预测中的潜在价值。方法:本研究纳入了在上海交通大学附属胸科医院接受一线(15例)和二线(22例)PD-L1单药治疗的晚期NSCLC患者,流式细胞术分析了37例患者的治疗前(基线)和治疗后外周血CD14^(+)单核细胞表面PD-L1及PD-1动态表达水平,回顾性分析其与疗效和外周主要炎症因子水平的相关性。结果:一线治疗患者基线CD14^(+)PD-L1^(+)及CD14^(+)PD-1^(+)在CD14^(+)单核细胞中的百分比在有效组中均明显高于无效组,其中基线CD14^(+)PD-L1^(+)和CD14^(+)PD-1^(+)高百分比的患者疾病无进展生存期(progression free survival,PFS)显著延长;而在二线治疗组中,基线CD14^(+)PD-L1^(+)及CD14^(+)PD-1^(+)在CD14^(+)单核细胞中的百分比在有效组和无效组患者中均无显著差异;但第一次治疗后,以及治疗前与第一次治疗后的比值在不同疗效之间具有统计学差异;外周IL-6、IL-8、IL-13的水平仅在二线PD-L1治疗中与单核细胞表面PD-L1+表达水平呈正相关性。结论:一线治疗患者组基线CD14^(+)单核细胞表达PD-L1水平在有效组显著高于无效组,并在PFS中获益;二线治疗患者组在治疗后PD-1+单核细胞的百分比与疗效相关,有效组患者的PD-1表达低于无效组患者的结果提示抗PD-L1二线治疗后单核细胞的活性有所增强。本研究结果表明一线和二线抗PD-L1治疗NSCLC患者存在免疫应答的时相差异。

基于社区中成药规范化使用的思考与对策

目的对社区卫生服务中心中成药规范化使用情况进行排摸与分析,提出思考意见和相应对策。方法从3个单位收集中成药处方共计37 544张,对用药规范化进行分析并提出整改意见。结果不规范用药处方数8 560张,占调查中成药处方的22.80%,涵盖了诊治不符、药物重复、用量用法错误、辩证配伍不当、服药告知不全以及疗程随意不科学等诸多方面。结论社区中成药规范化使用,应从诊治相符、辨证论治、异病同治、同病异治、以及如何用量用法、用药配伍合理、疗程科学和不良反应监测等方面加强管理。

电针结合药熏治疗腰椎间盘突出症112例临床疗效观察

目的：进一步探讨如何运用中医保守治疗方法,提高腰椎间盘突出症的临床疗效.方法：纳入符合诊断标准的腰椎间盘突出症患者,共112例后随机分为2组,治疗组采用药熏加电针治疗,对照组采用单纯电针治疗.采用视觉模拟评分法分别于每次电针治疗前20min,药熏治疗后20min 内患者的腰腿痛程度进行连续测量,观察治疗的即时与后续镇痛效应,从而评价电针结合药熏镇痛作用的起效时间与维持时间.结论：电针加药熏治疗腰椎间盘突出症在改善疼痛和腰椎活动度方面效果显著,疼痛改善度及总有效率高于单纯电针治疗组.

社区卫生服务中心中成药合理使用系统管理效果评价

目的:针对社区卫生服务中心中成药使用存在问题进行系统管理,对管理效果进行评价。方法:随机提取2012年1-6月每月5个工作日的门诊中成药处方,对用药合理性进行分析,实施管理干预。6个月后再次提取(2013年1-6月)每月5个工作日的门诊中成药处方,对中成药合理使用指标进行前后对照。结果:系统管理前不合理中成药处方比例为26.95%,管理后不合理中成药处方比例为12.55%,差异有统计学意义(P<0.01)。管理后,用药与诊断不符、开具同类功效中成药、用量用法不规范、疗程不合理现象较管理前有明显改善,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:中成药系统管理方案效果较好。

高中英语微课设计

在高中英语教学中,如果教师能够优化微课设计,应用微课引导学生学习,则能提高英语教学效果。教师在设计微课时,要了解微课设计的目的、方法、把握设计的要点。只有这样,才能设计出学生喜欢,又能帮助学生学习的优秀微课视频。

谈高中英语教学中的情感教育

在教学中对学生进行情感教育是教学的要求,也是教育发展的趋势。高中英语教学中,因为其学科的特点,情感教学是一种必须的选择。而且青少年正处在成长发育的阶段,情感教育可以改善学生的学习情绪,和教师产生良好的关系可以让教学过程更加高效。高中英语教学过程中,教师不仅仅要培养学生综合使用英语知识能力和基础语言知识掌握,

信息时代下我国教师教育模式存在的问题及创新对策研究

信息时代的到来冲击着传统的教育理念和教学手段,现有的教师教育模式也随之不断调整变化。目前,我国不少师范院校已形成初具特色的教师教育模式,如“4+2”模式、“3+3”模式、U-G-S模式等。文章通过分析我国教师教育模式现状及问题,揭示其存在的原因,提出了相应的建议对策,以期对各个师范院校教师教育模式的完善以及整个高等教育的发展提供参考对策。

塑料袋惭愧地低下头

“咚咚咚”，一阵敲门声，我打开门一看，原来是社区里的阿姨来送环保袋了。我高兴地接过袋子说了声：“谢谢！!”我早就听爸爸妈妈说过“限塑（su）令”了，政府规定有偿（chang）使用塑料袋，并提倡自带环保袋。我把袋子放在厨房就去看书了。看着看着，忽然听到厨房里有谈话声。

芬兰师范生教育实习经验对我国师范生实习的启示

芬兰基础教育取得巨大成功的原因之一就是在其教师来源中实行专业化的师范生实习机制。芬兰通过实行贯穿式的分段教育实习,建立有保障的实习基地,为打造高质量教师队伍甚至高质量基础教育做好铺垫。通过分析借鉴芬兰师范教育实习经验,对我国师范教育实习模式改革启示如下:1.师范生实习应该尽量早地开始并贯穿师范生学习始终。2.各师范院校与附属中小学之间的合作与联系应该更为紧密。3.教师教育理论课程应该尽早开设并且增大占据师范生学习课程的比重,注重与理论学习和实践的结合以及实践与研究的结合。4.注重结合师范院校、实习中小学校、实习同事以及实习生本人建立师范生实习的评价机制。

麦肯基法结合电针对腰椎间盘突出症患者生活质量的改善作用

目的探讨麦肯基法结合电针对腰椎间盘突出症患者的临床疗效及对生活质量的改善作用。方法选取2018年7月—2019年6月上海市金杨社区卫生服务中心针灸科门诊中腰椎间盘突出症患者180例,随机分为对照组(n=90)和实验组(n=90),对照组采用单纯电针治疗,实验组采用电针加麦肯基法治疗,连续治疗10次后对比临床疗效。结果(1)连续治疗5次后和连续治疗10次后实验组VAS评分总有效率显著高于对照组(P<0.05);实验组连续治疗5次后和连续治疗10次后患者手指指地距离较对照组显著降低(P<0.05)。(2)连续治疗5次后和连续治疗10次后,实验组JOA评分总有效率显著高于对照组(P<0.05);实验组连续治疗5次后和连续治疗10次后两组DOI评分总分较对照组显著降低(P<0.05)。(3)实验组连续治疗5次后和连续治疗10次后两组患者生理机能、生理职能、躯体疼痛、一般健康状况、精力、社会功能、情感职能以及精神健康评分较对照组显著提高(P<0.05)。结论麦肯基疗法结合电针对腰椎间盘突出症患者的临床疗效显著,可有效改善患者的生活质量。

加拿大家庭医学教育强化技能培训对我国家庭医生培养和职业发展的启示

加拿大家庭医学教育目前已形成较完善的规范化教育和培养体系,强化技能训练是加拿大家庭医生规范化培训体系中作为通科培训后继续教育的一部分,家庭医生完成两年的通科培训后,可申请就重点关注的特殊领域进行额外专科培训,至少为期一年。通过强化技能训练的家庭医生在获得资质认证后可拥有重点执业领域执业资格,更好地完成家庭医生工作,同时保持专业的业务能力。目前,我国家庭医生专科培训尚未形成规范的培训体系,基层家庭医生与医院专科医生直接有效对接的机制尚未完善。介绍加拿大家庭医学强化技能培训方向、培训对象、考核方式及职业发展等内容,结合目前我国家庭医生培养模式和全专结合培养的现状,以期为家庭医生持续培养和发展提供参考和借鉴,增强家庭医生的专业服务能力,提高患者在基层就医满意度,促进分级诊疗制度的进一步实行。