橘皮素缓解APP/PS1小鼠小胶质细胞过度激活及认知功能障碍

目的观察橘皮素(tangeretin,TAN)对APP/PS1小鼠认知功能,以及脑内小胶质细胞过度激活和炎症因子分泌的影响。方法2.5月龄雄性APP/PS1小鼠,通过口服给予TAN,连续干预16周,观察TAN对缓解APP/PS1认知功能障碍,以及脑内小胶质细胞过度激活和炎症因子分泌的作用。结果通过行为学检测发现TAN明显改善APP/PS1小鼠认知障碍;通过免疫荧光染色,发现TAN显著缓解APP/PS1小鼠脑内小胶质细胞的过度激活;多因子分析检测发现,TAN显著升高小鼠脑内抑炎因子IL-2和IL-5的水平。结论TAN显著减轻APP/PS1小鼠脑内小胶质细胞过度激活以及调节炎症因子分泌,缓解小鼠的认知障碍。

Epstein—Barr病毒基因组在鼻咽癌组织中转录的特征

对ＥＢ病毒基因在鼻咽癌活检组织细胞内的转录进行了较系统的探测。实验结果表明，ＥＢ病毒基因组在鼻咽癌活检组织中以附加体（Ｅｐｉｓｏｍｅ）形式存在，而其基因转录有如下特征：（１）ＥＢ病毒在所有鼻咽癌组织细胞中都表达ＥＢＮＡ－１，并且此基因转录产物由一个在ＢａｍＨＩ－Ｆ区的启动子（Ｆｐ）驱动；（２）；潜伏感染膜蛋白（Ｌａｔｅｎｔｍｅｍｂｒａｎｅｐｒｏｔｅｉｎ，ＬＭＰ和末端蛋白（Ｔｅｒｍｉｎａｌｐｒｏｔｅｉｎ，ＴＰ）的转录只在约５０％的活检组织中检测到，并且显示利用不同启动子的现象；（３）少部分的病例表达个别裂解基因；（４）在所有活检组织中，ＥＢ病毒基因组的ＢａｍＨＩ－Ａ区，表达一组功能未明的ｍＲＮＡ。通过对ＥＢ病毒基因在鼻咽癌细胞和其它受ＥＢ病毒感染的Ｂ淋巴细胞中表达情况的比较，本文对ＥＢ病毒基因在鼻咽癌组织细胞中的表达调控及其在癌变过程中的可能作用进行了讨论。

人呼吸道禽流感病毒受体的分布趋势(英文)

禽类流感病毒和人类流感病毒具有很强的受体识别特异性,分别与唾液酸α-2,3Gal和α-2,6Gal受体分子结合而感染各自的宿主细胞.这种受体结合特异性是流感病毒在禽类和人类之间跨种属传递的主要障碍.应用凝集素组织化学染色技术,探讨人呼吸道各解剖学部位流感病毒唾液酸受体的分布特征.结果显示,唾液酸α-2,3Gal受体,即禽类流感受体,主要分布在下呼吸道的呼吸部即呼吸细支气管和肺泡,而在主气管、支气管和细支气管仅少量分布.相反,人类流感病毒受体,唾液酸α-2,6Gal受体在气管、支气管呈高密度分布,随着支气管分级逐渐降低分布减少,至肺泡分布最少.但比较人呼吸道发育成熟过程中,唾液酸α-2,3Gal和α-2,6Gal受体的表达,未发现明显差别.禽流感H5N1病毒体外感染人呼吸道组织试验结果表明,肺泡上皮较支气管和气管上皮易感染,与唾液酸α-2,3Gal受体分布特点相符合.结果提示,人呼吸道可被禽流感病毒感染,目前H5N1病毒极少发生人传人的特点,可能与个体间上呼吸道唾液酸α-2,3Gal受体表达差异有关.

高致病性H5亚型禽流行性感冒病毒血凝素单克隆抗体的制备与初步应用

以禽流感病毒株Ck/HK/Yu22/02(H5N1)作为免疫原,利用常规杂交瘤技术和血凝抑制试验法成功地筛选出6株稳定分泌抗高致病性H5亚型禽流感病毒血凝素的单克隆抗体(单抗),分别命名为2F2、3C8、3FC1、7C6、10HD4和13G4。经血凝抑制试验法分析,结果发现这6株单抗具有特异性高、反应性强、识别谱宽且互补等特点。基于单抗2F2,初步建立了三种H5N1病毒诊断方法,经评估证实均具有很好的特异性。由此说明,研究制备的抗H5亚型禽流感病毒血凝素单抗可适用于H5N1病毒的诊断。

一种新型H5N1禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂的建立

利用5株广谱特异性抗H5亚型血凝素单克隆抗体和酶联免疫渗滤技术成功地建立了一种适于现场检测H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白的抗原快速检测试剂H5-HA(Ag)Dot-ELISA。该试剂对41株代表当前亚洲地区流行的各种遗传变异亚系H5N1禽流感病毒检测均为阳性,对多数毒株的分析灵敏度优于0.1个血凝滴度(HA titer),其中部分优于0.01个血凝滴度;比较该试剂与早期开发的同类ELISA试剂,发现前者对后者未能检出的H5N1新变异株检测均为阳性;利用该试剂和商品化Directigen Flu A(BD)试剂检测两株H5N1病毒株,提示前者灵敏度高于后者;该试剂对一株H5N1病毒的检测灵敏度与标准RT-PCR相当;该试剂对24株非H5亚型病毒检测均为阴性,显示出良好特异性。以上结果提示,此研究建立的H5N1病毒抗原快速检测试剂在H5禽流感现场检测上具有较好的应用前景。

龙须菜多糖硫酸基含量对抗流感病毒活性的影响

本实验利用MTT法研究不同硫酸基含量的龙须菜精多糖(RPGL)、纯多糖、脱硫多糖和硫酸化多糖抗流感病毒H1-364的作用,探讨龙须菜多糖硫酸基含量对其抗病毒活性的影响。结果表明,不同龙须菜多糖均具有抗H1-364作用,其中RPGL的作用最强,对H1-364抑制率高达88.82%;龙须菜多糖抗H1-364病毒的能力在一定范围内随硫酸基含量的增加而增大,当硫酸基含量在13%附近时,其抗病毒的能力最强,而硫酸根含量过高或过低对H1-364病毒的抑制作用均有所下降。

亮叶杨桐黄酮提取物抗瘤活性及其对小鼠p53基因表达活性的影响

本文从亮叶杨桐中分离提取出黄酮类生物活性物质,对进行小鼠体内抗肿瘤试验和小鼠S-180肿瘤细胞中p53基因表达抑制实验。研究结果表明,亮叶杨桐中总黄酮含量达28.4％,黄酮提取物在剂量50mg·kg^(-1)时对小鼠肉瘤S-180的抑瘤率为64.0％,对艾氏腹水癌(EAC)Ⅰ小鼠的生命延长率为51.2％,有显著的抗肿瘤作用,并且药效与用药量有关。同时发现,黄酮类提取物的抗肿瘤活性优于化疗药物呋喃氟尿嘧啶(Ftorafur)。RT-PCR实验结果表明,在剂量500mg·kg^(-1)时,黄酮类提取物可以明显抑制小鼠S-180肿瘤细胞中突变型p53基因的转录活性,其抑制程度和呋喃氟尿嘧啶相同。

H5N1禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂对不同现场标本的检测比较

利用H5亚型禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂“H5-HA（Ag）Dot-ELISA（H5-Dot）”对来自陆禽、水禽的484份气管拭子、泄殖腔拭子和粪便拭子标本进行检测，结果：①不同采集方式的H5N1阳性标本的检出率高低有别，气管拭子的检出率最高，泄殖腔拭子次之，粪便拭子最低（P〈0．05），因此建议现场采样时应尽可能采集气管拭子标本；②陆禽标本检出率显著高于水禽标本（P〈0．05），对病毒培养阳性的陆禽气管拭子检出率达80％（95％CI：70．6％～87．8％），对水禽气管拭子标本的检出率为38％（95％CI：26．9％～49．4％），可能与标本中病毒滴度高低有关；③有症状与无症状陆禽标本的检出率无显著差异。另外，H5-Dot试剂对333份非H5病毒气管拭子标本的特异性为99．4％（95％CI：97．9％～99．9％）。这些结果表明，H5-Dot是一种较为可靠的H5亚型禽流感病毒早期快速检测方法，在缺乏仪器设施和高素质专业技术人员的H5N1禽流感病毒防控第一线具有重要推广价值。

高致病性禽流感病毒H5N1中和抗体的单链抗体构建与活性鉴定

在本实验室研制出的多株针对H5N1血凝素的鼠单抗中,10F7对34株H5N1病毒株都有血凝抑制和中和活性,具有特异性高、反应性强、识别谱广的特点。通过基因工程构建10F7单链抗体(scFv)表达重组质粒,在大肠杆菌中表达并纯化scFv,经血凝抑制实验及中和实验检测其活性。结果在针对3株病毒的血凝抑制实验中,10F7scFv蛋白对其中2株H5N1病毒均显示出结合活性,而对H9毒株没有反应。在针对7株H5N1病毒的中和实验中,10F7scFv对5株病毒具有较好的中和能力。H5N1广谱中和抗体10F7的单链抗体构建,为进一步研制针对H5N1禽流感病毒的治疗性抗体奠定了基础。

海洋细菌Agarivorans sp.HZ105的琼胶降解酶系

通过克隆得到菌株Agarivorans sp.HZ105中3个琼胶酶基因,长度分别为2 988 bp、1 437 bp和1 362 bp,分别编码琼胶酶HZ1、HZ3和HZ4,分别属于糖苷水解酶GH50、GH118和GH16家族。将这些琼胶酶基因与质粒p ET-32(a)构建重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),实现了琼胶酶基因的重组原核表达,制备了重组酶,研究了琼胶酶的酶解产物。琼胶酶HZ1降解琼脂糖以及高聚合度新琼寡糖(聚合度为8、10、12和14)得到新琼二糖和新琼四糖;琼胶酶HZ3降解琼脂糖的终产物是高聚合度新琼寡糖;琼胶酶HZ4降解琼脂糖和高聚合度新琼寡糖为新琼四糖和新琼六糖。因此推测菌株HZ105主要先用琼胶酶HZ3和HZ4降解琼脂糖为较高聚合度的新琼寡糖,随后这些寡糖被琼胶酶HZ1和HZ2(课题组先前报道的另一个琼胶酶)降解为低聚合度新琼寡糖。首次研究报道了Agarivorans属中能产生4个琼胶酶的细菌菌株及其琼胶降解酶系,丰富了有关细菌降解琼胶酶体系及其中各琼胶酶作用的研究和认识,也有利于菌株HZ105琼胶酶的有效开发应用。

一株抗H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体的广谱中和活性

以H5N1禽流感病毒株Ck／HK／Yu22／02作为抗原，应用常规杂交瘤技术和血凝抑制实验筛选出抗H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白的单抗8H5，单抗8H5经免疫荧光鉴定具有很好的H5特异性。选择33株2002～2006年不同地域，不同宿主中分离的不同遗传变异亚系的H5N1病毒代表株，对单抗8H5分别进行血凝抑制实验及中和试验分析，结果显示单抗8H5对所有H5亚型病毒均有较强反应，而对非H5亚型标准病毒株均不反应，说明8H5是一株广谱性抗H5特异性中和单抗，并提示单抗8H5的HA识别表位可能是一个相当保守的中和表位。并且单抗8H5双抗夹心系统的初步评价显示了其在诊断应用上的前景。

亮叶杨桐提取物抗肿瘤活性的研究

从亮叶杨桐中分离提取出生物活性物质，并进行小鼠体内抗肿瘤试验，研究结果表明，亮叶杨桐提取物在剂量为５００ｍｇ／ｋｇ时对小鼠肉瘤Ｓ－１８０抑瘤率为６４％。对艾氏腹水癌小鼠的生命延长率为５１．２％。

基于交际能力培养的英语专业语法教学模式建构

语法教学一直是英语专业教学的一个重要组成部分,但目前这一阶段的语法教学依然普遍存在重讲授轻实践、学生会考试不会运用等问题。建构基于交际能力培养的英语专业语法教学模式,为交际而学习语法,在交际中练习语法,学以致用,是提高语法教学质量的有效途径。

戈壁城楼

这一期的《中国国家地理》上，古城楼再一次成为了其主打文章所描述的对象。每当看到此类文章，我的眼里便会有一片戈壁、一座城楼恍然浮现。在那段旅途中，我的足迹沿着河西走廊一路西行，茫茫沙漠中，对于生命的思考又多了一分成熟、一层厚重。

基于无人机的输电线路雷击跳闸故障快速查找

针对传统输电线路雷击跳闸故障查找工作模式的局限性,提出“历史跳闸线路区段+查障航线规划+RTK无人机自动驾驶+AI智能分析+人工确认”的新型雷击跳闸故障快速查找工作模式,通过两种工作模式的比较,快速查找工作模式在作业时长、查找效率、投入工作量等方面均具有较大优势,作业的数字化、智能化以及安全水平得到提升。

高致病性禽流感病毒广谱嵌合抗体的构建表达及活性研究

高致病性禽流感病毒高度变异且缺乏有效的治疗药物.在前期研究工作中,本课题组发现一株鼠源广谱中和单抗13D4,在动物实验中显示出对H5N1禽流感病毒具有广谱治疗效果.在本研究中,从分泌13D4单克隆抗体的杂交瘤细胞株中抽提总RNA,经RT-PCR扩增出轻重链可变区DNA序列,并分别与人IgG1的轻重链恒定区基因序列拼接,构建人-鼠嵌合抗体.筛选出稳定表达嵌合抗体的CHO细胞株,从培养上清中纯化出嵌合抗体.竞争Elisa结果表明,嵌合抗体与鼠源单抗能够识别同一个抗原表位并具有相似的亲和力.血凝抑制反应和中和活性测定结果证明,13D4嵌合抗体保留了对不同亚型H5N1病毒的广谱反应性,并且对两株H5N1病毒具有中和活性.本研究获得的13D4嵌合抗体将具有潜在的治疗价值.

甲型H1N1流感病毒在季流病毒、禽流感病毒共感染时变异可能性的验证

目的甲型H1N1流感病毒A/California/7/2009分别与A/Brisbane/10/07和A/ShenZhen/406H/06共感染小型香猪,预测甲流病毒在与季流H3N2病毒/甲流病毒与禽流感病毒共感染时是否会发生变异。方法分别将A/California/7/2009(CA7)与A/Brisbane/10/07(H3N2),A/California/7/2009与A/Shenzhen/406H/06(H5N1)对5～6月龄小型猪共感染,小型猪经复方氯胺酮0.1 mL/kg麻醉后进行滴鼻感染,感染后第5天安乐死动物,取动物肺组织作病毒测序分析。结果 A/California/7/2009(CA7)与A/Brisbane/10/07(H3N2)共感染后,A/California/7/2009病毒PB1基因993位G→A突变,PA基因1659位G→A突变,没有氨基酸的变异。A/California/7/2009与A/Shenzhen/406H/06(H5N1)共感染后A/California/7/2009病毒PB2基因1711位T→C突变。碱基的突变未引起氨基酸的变异。结论 A/California/7/2009(CA7)与A/Brisbane/10/07(H3N2),A/California/7/2009与A/Shenzhen/406H/06(H5N1)共感染后在猪的体内没有发生病毒重组、变异。

EB病毒基因组限制片段长度多态性(RFLP)在鼻咽组织中的分布

利用PCR和限制性内切酶分析,探讨了EB病毒基因组限制片段长度多态型(RFLP)在正常鼻咽组织,鼻咽癌组织和口腔上皮脱落细胞中的分布情况。结果表明在正常鼻咽组织的EB病毒感染是一种普遍现象并且感染可能发生在癌变前;EB病毒基因组BamHF区的RFLP在鼻咽癌组织和正常的鼻咽组织之间有不同的分布;不同EB病毒RFLP变型(variant)的混合感染在正常咽组织比在癌组织中普遍,这结果表明可能在癌变发展过程中,由于部分带有EB病毒的细胞的选择生长,结果使得癌组织中的细胞以一种EB病毒变型为主;本文探讨了EB病毒的RFLP变型在鼻咽组织和口腔上皮脱落细胞分布的关系,这种关系可能为鼻咽癌高发区的癌变检测提供一种简单可靠的方法。

一种可快速、持久且广谱保护新冠病毒感染的鼻喷减毒流感病毒载体新冠病毒疫苗

肌注式新冠病毒疫苗在呼吸道局部诱导的免疫应答较有限,不能高效阻止新冠病毒入侵呼吸道细胞.为此,该研究利用双重减毒的流感病毒载体(CA4-d NS1)开发出一种携带新冠病毒RBD基因的可经鼻腔喷雾方式接种的新冠病毒疫苗CA4-dNS1-nCoV-RBD(简称dNS1-RBD).该疫苗在重症新冠肺炎仓鼠模型中表现出良好的保护效果,鼻喷接种1天后即可快速起效,两剂次鼻喷接种后可提供9个月以上的长效保护,表现为疫苗组仓鼠的体重未见明显下降,肺组织病理无明显损伤.该疫苗对Omicron等各种新冠病毒关切突变株均有广谱作用.另外,小鼠实验显示该疫苗还可广谱保护H1N1和H5N1流感病毒感染.该疫苗的保护机制涉及呼吸道局部的先天免疫应答、特异性T细胞应答、粘膜Ig A抗体应答和体液Ig G抗体应答等.总之,该研究表明快速、持久且广谱的鼻喷流感载体新冠病毒疫苗可与现有肌注式新冠病毒疫苗形成互补,共同抗击新冠疫情.

以血清EB病毒抗体谱评估患鼻咽癌危险度的研究

目的 比较鼻咽癌患者与健康人群血清EB病毒抗体水平 ,评估患鼻咽癌的危险度。方法 收集珠江口地区 12 1例鼻咽癌患者和 332例健康人血清。采用酶联吸附试验 (ELISA)检测血清中EBNA 1 IgA、EBNA 1 IgG和zta IgG ,以免疫酶法或免疫荧光法检测VCA IgA。结果 EBNA 1 IgA、EBNA 1 IgG和zta IgG的敏感度分别为 85 %、83%和 79% ;三者组合的敏感度最高 ,为 92 %。EBNA 1 IgA、EBNA 1 IgG和zta IgG的特异度分别为 86 %、86 %和 80 % ;三者组合的特异度最高 ,为 93%。根据优势比水平 ,可将患鼻咽癌的危险度分为低危险、中危险和高危险 3个层次。 93%的健康人是低危险的 ,优势比为 0 .0～ 0 .3;0 .4 %的健康人是高危险的 ,优势比为 137.9。结论 ELISA在诊断鼻咽癌的结果判断上更具客观性 ,较传统免疫酶法好 ;EBNA 1 IgA、EBNA 1 IgG和zta IgG的联合应用可以评估人群患鼻咽癌的危险度。