Taqman探针实时荧光定量PCR检测肝脏疾病患者血清中miR-122的表达水平及其临床意义

目的:运用Taqman探针实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测肝脏疾病患者血清中miR-122的表达水平并探讨其临床意义。方法:设计miR-122及U6 snRNA的茎环引物和Taqman探针,运用Taqman探针实时荧光定量PCR检测27例肝癌术前(HCC)患者、15例乙型肝炎(hepatitis B)患者、15例丙型肝炎(hepatitis C)患者、15例正常对照者(HC)、11例肝癌术后(PHCC)患者及10例肝癌术后复发(recurrence)患者血清中miR-122的表达水平,并分析miR-122与肝脏疾病相关标志物的关系。结果:Taqman探针实时荧光定量PCR方法能检测血清中miR-122的表达。HCC、hepatitis B、hepatitis C及recurrence患者血清中miR-122的表达水平均高于HC和PH-CC患者(P<0.05),hepatitis C患者血清miR-122表达水平高于HCC、hepatitis B和recurrence患者(P<0.05),但HCC、hepatitis B和recurrence患者血清miR-122的表达水平无明显差异(P>0.05),PHCC患者血清miR-122的表达水平比HCC和recurrence患者低(P<0.05)。血清乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性和(或)乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)阳性患者血清miR-122的表达水平高于阴性者(P<0.05)。血清丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)阳性患者血清miR-122的表达水平高于阴性者(P<0.05)。血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)与miR-122的表达水平有正相关性(r=0.34,P<0.05)。血清甲胎蛋白(AFP)≥400μg/L组血清miR-122的表达高于AFP<400μg/L组(P<0.05)。结论:Taqman探针实时荧光定量PCR适用于检测血清miR-122的表达水平。在HCC、hepatitis B、hepatitisC及recurrence患者血清中miR-22均有不同程度的增高,尤其是hepatitis C患者,且PHCC患者血清miR-122表达下降,复发后升高。血清miR-122的表达与肝脏疾病的某些指标有关,提示血清miR-122可作为肝脏疾病,特别是肝癌早期诊断、手术疗效及预后判断的新指标。

血清miR-21在糖尿病肾病中的诊断价值

目的：评价血清miR-21对糖尿病肾病的诊断价值,探讨糖尿病肾病诊断的分子标志物.方法：对25例糖尿病肾病患者、25例Ⅱ型糖尿病患者A[尿微量白蛋白（UmAlb）＜14.29 mg/L]、25例Ⅱ型糖尿病患者B（UmAlb＞14.29 mg/L）、25例糖尿病肾病引发的尿毒症患者及25例正常对照组的血清标本进行总RNA提取,并进行miR-21的实时荧光定量PCR检测,分析血清miR-21相对表达量与相关临床指标的关系,评估血清miR-21对糖尿病肾病的诊断效能.结果：miR-21在糖尿病肾病患者血清中的相对表达量显著低于正常对照组、糖尿病A组及B组,同时显著高于尿毒症组（均P＜0.01）,糖尿病肾病患者血清miR-21水平与胱抑素C、UmAlb、UmAlb/尿肌酐呈显著负相关（P〈0.01,P〈0.05,P〈0.05）.经logistic回归及ROC曲线分析,血清miR-21在糖尿病肾病患者与正常对照组、糖尿病A组、糖尿病B组、糖尿病A组＋正常对照组、糖尿病B组＋正常对照组和糖尿病A组＋糖尿病B组中诊断糖尿病肾病的曲线下面积（AUC）为0.848（95%CI：0.737～0.959）、0.896（95%CI：0.812～0.980）、0.782（95%CI：0.641～0.922）、0.838（95%CI：0.743～0.933）、0.796（95%CI：0.675～0.917）和0.808（95%CI：0.704～0.911）,敏感性和特异性分别为80.0%和72.0%、72.0%和88.0%、72.0%和84.0%、76.0%和77.0%、76.0%和82.0%、70.0%和86.0%;在4组人群中诊断糖尿病肾病的AUC为0.845（95%CI：0.752～0.939）,敏感性和特异性分别为76.0%和77.3%.结论：血清miR-21可作为糖尿病肾病的分子诊断标志物.

用巢氏PCR检测防止香港型地中海贫血漏诊

目的探讨经α-地中海贫血基因诊断试剂盒检测为-α3.7/αα(右向缺失,静止型)的样本中是否携带anti4.2片段,以判断是否存在漏诊的香港型地中海贫血(HKαα)。方法设计HKαα和anti4.2片段的引物,用巢式PCR检测50例-α3.7/αα样本中是否存在anti4.2片段,并结合平均红细胞体积(MCV)及血红蛋白A2(HbA2)比较分析。结果巢式PCR结果表明,50例-α3.7/αα样本中存在8例为HKαα型,漏诊率为16%;且HKαα携带者的MCV明显高于-α3.7/αα携带者,差异有统计学意义(t=7.04,P<0.05)。结论巢式PCR可鉴别HKαα与-α3.7/αα携带者,提高其检出率。

400例地中海贫血基因检测分析

目的:应用基因诊断技术对400例病人进行地中海贫血(简称地贫)基因检测,了解其基因突变的类型,旨在为临床预防地贫重症患儿的出生提供指导。方法:400个样本分别检测α-地贫及β-地贫基因型,α-地贫采用gap-PCR技术检测东南亚型缺失(--SEA)、右侧缺失(-a3.7)和左侧缺失(-a4.2),β-地贫采用聚合酶链反应(PCR)-膜反向点杂交技术(RDB)检测β-珠蛋白基因上的17个位点突变。结果:在进行地贫基因检查的400例病人中,检出α-珠蛋白基因缺失的有118例,检出β-珠蛋白基因突变者共78例,均为杂合子,检出αβ复合型地贫者6例,检出Barts水肿胎儿1例。结论:基因诊断技术能确诊地贫缺失或突变,检测绒毛、羊水或脐带血时须避免母体血污染。

SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测宫颈癌血清中miR-21的表达

目的建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR法检测宫颈疾病患者血清中miR-21的表达水平,探讨miR-21在宫颈癌临床监测中的意义。方法设计miR-21、U6茎环逆转录引物和PCR扩增引物,以U6为内参,用实时荧光定量PCR检测32例不同宫颈疾病患者血清中miR-21表达水平。结果建立的实时荧光定量PCR法能特异地检测血清中的miR-21扩增信号,熔解曲线单一,产物特异。宫颈癌患者血清中miR-21水平明显高于子宫肌瘤、宫颈炎等其他良性宫颈疾病(P<0.05),而宫颈癌患者手术切除后血清中miR-21水平明显下降(P<0.05)。结论 SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR是一种快速简便、敏感性高、特异性好的检测方法,对宫颈癌早期诊断、分子分期和预后判断有很好的应用前景。

母婴血循环中Ang(1-7)水平对早产的影响

目的：探讨孕晚期母婴血浆血管紧张素（1-7）[Ang（1-7）]和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）浓度对胎儿早产以及宫内发育的影响。方法：前瞻性研究孕产妇309例，以妊娠至37孕周为界，将其分为早产组17例和足月产组292例。采用酶联免疫法检测分娩前母血及产后脐血血浆Ang（1-7）与AngⅡ浓度。分析早产与足月产两组孕妇一般临床资料、妊娠期并发症、新生儿发育指标等。通过校正混杂因素，应用单因素及多因素Logistic回归分析早产危险因素。结果：与足月产组比较，早产组孕妇血浆Ang（1-7）、AngⅡ及Ang（1-7）/AngⅡ质量浓度显著低于足月产组，分别为（399.86±218.93）、（710.34±598.22）ng/L，P＜0.001；（49.87±29.32）、（72.51±60.79）ng/L，P＝0.028；Ang（1-7）/AngⅡ（8.34±1.65）、（9.79±2.83），P＝0.012。与足月产组比较，早产组新生儿脐带血浆Ang （1-7）、AngⅡ质量浓度显著低于足月产组，分别为（486.15±337.34）、（833.34±698.12）ng/L，P＝0.001，（54.75±38.03）、（84.41±69.01）ng/L，P＝0.025，而两组间Ang（1-7）/AngⅡ无显著差异，分别为（9.54±2.55）、（9.85±3.11），P＝0.733。经多重Logistic回归分析，剔除子痫前期等混杂因素影响后，胎膜早破、新生儿Ang（1-7）低浓度是早产的危险因素是早产的危险因素，OR值分别为8.54（95％可信区间：2.73～26.76，P＜0.001）、0.31（95％可信区间：0.14～0.69，P＝0.010）。结论：孕晚期胎儿脐血Ang（1-7）浓度降低有增加早产的风险。

小儿NK/T细胞淋巴瘤(鼻型)误诊1例

患儿男，11岁，因反复发热伴鼻塞、流涕1个月入院。患儿于1个月前无明显诱因出现发热，体温高达39．20℃，伴有鼻塞、流涕，无咳嗽、咳痰，无寒战、抽搐，无腹痛及腹泻。病后食欲欠佳，身体较前消瘦。在当地医院做胸片检查提示心肺及隔未见明显异常；做鼻部CT检查，意见为：右侧额窦炎，双侧鼻息肉。曾用抗生素、中药及对症治疗，病情无好转，体温波动于37．0～38．5℃之间。近3年来，常有鼻塞及流涕，多次诊断为“鼻窦炎”。否认家族中有肿瘤病史。

MicroRNA在感染性疾病相关肿瘤中作用的进展

MicroRNA(miRNA)是一类近年来新发现的非编码小RNA分子,广泛存在于动物、植物和病毒中。通过与靶mRNA3'端非翻译区完全或不完全互补配对,调控靶基因的表达或翻译,从而参与调控个体发育、细胞凋亡、增殖及分化等生命活动,其表达失调会导致疾病的发生。本文就miRNA在感染性疾病相关肿瘤中的作用研究进行简要综述。

漓江烟雨迷津渡,棹歌深处潜鱼龙——论蓝凡武的绘画

绘画论之以气韵、技法,乃至于师承者,比比皆是,其中千差万别,良莠不齐,所言所论大多不免于老生常谈.尤其甚者,是那些以文人墨客自诩,真实境界实则不足以了悟人生百千变幻的学者,动辄以貌取人,以势论画,或曰大师,或曰巨匠,实则皆非艺术品评之正道,久不悔悟,必然悔之晚矣.

艺术与人生

"艺术人生"也好,"人生艺术"也好,都是同一种生活态度的衍生,两者的归宿必然是艺术和人生融洽合一,都必然对艺术的发展、社会的进步、人类的幸福有着很重要的影响。而使其融洽合一的,就是一个世界观、价值观是否具有道德主导的问题。更切实际地说,是分清楚仁义和利益之间的区别吧!

津秦客专跨机场专用线40m现浇梁施工技术

津秦客专某桥梁上跨既有机场专用线,给新桥的建设加大了难度。虽列车通过频率低,必须搭设门式支架保证车辆限界,及安全防护确保既有线安全。且客运专线桥梁结构高度大,钢筋混凝土量大,支架承载力、稳定性要求高。通过比较分析,施工中应用型钢梁搭设门式支架,并采用型钢梁与碗扣式支架综合应用施工技术,并采用简易卸落、平移拆架等方法,安全、顺利完成施工。本文着重介绍了大跨度桥梁跨越既有线的支架安全施工技术。

机制砂掺量对混凝土抗硫酸盐侵蚀的影响分析

采用抗折劣化系数、抗压劣化系数和质量变化率,研究不同机制砂掺量混凝土的抗硫酸盐侵蚀性能,并运用孔结构分析仪,从微观上探讨混凝土的孔结构与其抗硫酸盐侵蚀性能之间的关系。结果表明:随着机制砂掺量的增加,混凝土的平均孔径先减小后增大,混凝土的抗硫酸盐侵蚀性能先上升后下降,平均孔径与强度劣化系数之间基本上呈线性关系;机制砂和天然砂一定比例的互掺,可细化混凝土的孔径,改善孔结构。当机制砂掺量为50%时,平均孔径达到最小,此时混凝土的抗硫酸盐侵蚀性能也最佳。评价机制砂混凝土抗硫酸盐侵蚀性能的3个指标中,抗折劣化系数要比抗压劣化系数和质量变化率敏感。

浅析艺术市场的混乱

当今中国艺术市场的混乱可以反映在市场个体的心态变化之上,这应该是一个共识。但个体心态同时又是一个众人心态的集合表现,它显示的是一种共识造成的大势,并不是某个人的努力就可以随便改变的。在鸦片战争之后,认识到国力的衰落不足以保证中华民族的延续,亡国亡种在当时不是危言耸听的谣言,而是一种切实的存在。于是,国人奋发图强,试图＂师夷长技以制夷＂,一如赵武灵王的胡服骑射,这是可以理解的。

泉州海湾大道下穿弯框架桥施工技术

随着道路交通的飞速发展,道路的形式也变得多样化,其中下穿框架桥的应用越来越受到欢迎。文章基于泉州海湾大道下穿框架桥,介绍了其结构形式及地质、水文条件。该框架桥底板直接与地基接触,对于地质水文条件的要求比较高,因此需要进行抗浮验算。同时地下水具有腐蚀性,底板的防水构造设计也十分重要。该框架桥为下穿式通道,底板具有一定的坡度,在底板施工时将会出现混凝土向下坡的累计现象,文章对此介绍了其解决办法。该框架桥横向宽度较大,其顶板的施工浇筑也是一大难题。文章阐述了框架桥的底板、腹板和顶板的分布施工过程,详细说明了其模板拼装以及混凝土浇筑,也为后续工程提供了参考根据。

对中国艺术市场中画廊业的反思

近十年以来,中国画廊业受到的最大冲击是来自艺术品拍卖会的泛滥：数量的泛滥和假拍的泛滥。因此,艺术品拍卖会事实上取代了画廊本该具有的艺术市场一线的地位,加上媒体的推波助澜,艺术品拍卖会逐渐成为中国艺术品收藏者关注最多的热点。不过,艺术品拍卖会的成功包括假拍的泛滥虽然有其自身的问题,但也少不了画廊的大量参与和操作。这一方面是因为艺术品拍卖会规避了画廊买卖假画的风险,同时,它也为一些画廊提供了一个投资少、风险小、收益大的商业平台。

涡阳“孝”治

亳州之行，我最有收获的其实是涡阳、蒙城之行。在这些地方，我不仅看到了祭祀老子的大庙，也看到了供奉有庄子的祠堂，以及蒙城的万佛塔等很有象征意义的建筑。始建于唐宋时期的万佛塔更是历经时代沧桑而巍峨自在，其塔顶的小枣树，被移植之后，而今都成了碗口粗的神树，被人膜拜。

扫描安庆有感

写实主义的出现与我们相信它可以为我们揭示生活真相、隐蔽的社会现实有关，并且我们想当然地认为人人都会从我们的作品中理解我们的意图，并因此对我们所描述的对象有所同情，或者是憎恶，以此来引导大众产生我们认为正确的情感认同。于是，我们的目的就不自觉地转换成“要让那些过着满足、休闲生活的人于心不安。”文化在这里就成了利器。

亳州掠影（四）

亳州的养生文化是我们亳州之行考察的又一个重点；谈及养生，一般人会把目光聚集在中药、中医上，以“医圣”华佗故里、中药材重要集散地著称的亳州自然受到很多人追捧。

驱山走海春复秋,日月西奔水东流——且说明代画家戴进

明太祖朱元璋担心文人大臣结党营私,设有＂铁榜＂,规定：＂文武大臣无故不得往来,给事中、御史及锦衣官,不得与文武大臣交通。＂他不相信文人,致以侮辱衣冠为事。普通人之间缺乏了基本的信任,仅以利益为纽带,尚且脆弱不堪,皇权与文人集团之间自然更是相互抵触,斗争跌宕,残酷无情。

女画家笔下的当代中国工笔画

"工·在当代——中国第九届工笔画大展"在中国美术馆举行,我特意关注了一下女性艺术家的工笔画。我想工笔画本来就有的装饰美,在女人的纤纤玉手中或许会更多一份柔媚,甚至在如此浮躁的社会文艺风气中,这种柔媚所以感受的现实之美还是那么感性,还是那么柔弱,还是那么自然。虽然新中国成立之后,中国妇女的地位有了明显的提高,但女性特有的感性和自我,还是能够在男人们浮躁的时候给他们一点冷静的思考,或许工笔画的未来并不在那些急于创新的人那里,反而在她们手中。毕竟她们对艺术的感情更细致、更体贴、更自如。因此,我不免有些感慨,很多人看不起女性画家,因为她们会面临更多的生活窘境,生孩子、带孩子。