二仙汤及其组方中药对幼年大鼠肾上腺雌激素受体表达的影响

目的通过观察二仙汤及其组方中药对幼年大鼠肾上腺雌激素受体(ER)表达的影响,探讨其对肾上腺功能的影响机制。方法幼年SD大鼠54只,分为正常对照、阳性对照、二仙汤、淫羊藿、仙茅、巴戟天、当归、黄柏和知母9组,各组给药6d后麻醉大鼠,取血清测量睾酮的含量,分离摘取双侧肾上腺,称重后常规石蜡包埋切片,行免疫组织化学染色。结果阳性对照组、二仙汤组肾上腺系数增加,二仙汤组、淫羊藿组、仙茅组和知母组血清睾酮水平降低,以二仙汤组最明显(P<0.01)。ERα主要分布于肾上腺皮质球状带和束状带细胞的细胞质中,二仙汤组平均光密度值升高,而阳性对照组下降;ERβ主要分布于肾上腺皮质球状带和束状带细胞的细胞核中,二仙汤组、淫羊藿组、仙茅组和知母组平均光密度值与阳性对照组比较下降。结论二仙汤及其方中温肾药(淫羊藿、仙茅)和滋阴药(知母)通过影响不同类型ER在肾上腺皮质中的分布发挥植物雌激素样作用。

β-谷甾醇对T47D细胞雌激素受体表达及其下游基因PS2的影响

目的:观察β-谷甾醇对T47D细胞雌激素受体(estrogen receptor,ER)及下游基因PS2的影响,探讨其植物雌激素样作用机制。方法:以ER拮抗剂ICI182 780为工具药,应用实时荧光定量PCR技术检测ERα、ERβ及PS2mRNA表达变化,western-blot技术检测ERα、ERβ蛋白表达变化。结果:β-谷甾醇可诱导ERα、ERβ及PS2 mRNA表达,且上调ERβ更显著,对PS2 mRNA的诱导作用可以被ICI182 780抑制,能够上调ERα和ERβ蛋白表达,且可以被ICI182 780抑制。结论:β-谷甾醇可以通过ER途径调节下游靶基因的表达而发挥植物雌激素样作用。

β-谷甾醇对T47D细胞增殖和细胞周期的影响及作用机制探讨

目的:观察β-谷甾醇(BSS)对雌激素受体(ER)阳性人乳腺癌T47D细胞的作用,并进一步探讨其可能的作用机制。方法:以ER拮抗剂ICI182 780为工具药,采用MTT细胞增殖实验观察不同浓度BSS对T47D细胞增殖的影响;利用流式细胞术检测其对T47D细胞周期的影响;利用Western-blot和Real-time PCR技术检测其对细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白及m RNA表达的影响。结果:高浓度BSS抑制T47D细胞增殖,使细胞分裂增殖指数降低,且ICI182 780不能完全拮抗其对T47D细胞的增殖抑制作用;低浓度BSS可促进T47D细胞增殖,提高细胞分裂增殖指数,且ICI182 780可完全拮抗其促增殖作用。Western-blot及Real-time PCR结果显示:低浓度BSS可诱导T47D细胞Cyclin D1蛋白和m RNA表达,并且ICI182 780能够抑制此诱导作用。结论:BSS通过ER介导调节Cyclin D1蛋白与m RNA水平的表达,从而影响ER阳性人乳腺癌T47D细胞增殖活性和细胞周期,发挥植物雌激素样作用。

金属蛋白酶-9在糖尿病肾病发病机制中的作用

目的:探讨大鼠糖尿病肾病发展过程中肾局部金属蛋白酶-9(MMP-9)与糖尿病肾病发生的相关性。方法:健康SD大鼠,随机分成糖尿病组和正常对照组,糖尿病组大鼠采用一次性腹腔内注射链脲佐菌素诱导制造糖尿病大鼠模型。分别于造模后第4、8周通过免疫组织化学方法观察肾局部MMP-9的表达,测其肾小球阳性细胞表达率;应用免疫印迹法对MMP-9在肾组织不同时间点的含量进行定量检测。结果:MMP-9在正常肾小球呈强阳性表达,造模后4、8周末,糖尿病组大鼠MMP-9在肾小球表达均下降。正常对照组MMP-9含量最高,糖尿病4、8周组大鼠肾脏MMP-9含量明显下降。结论:糖尿病肾病时肾组织中MMP-9表达水平降低,可能是糖尿病早期病理改变的重要原因之一。

荷丹片干预非酒精性脂肪性肝炎大鼠的疗效观察

目的:观察荷丹片对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠的干预作用。方法:雄性SD大鼠40只,随机分为4组:正常组、模型组、阳性对照组和荷丹片治疗组。除正常组外,其余各组大鼠给予高脂饲料喂养,造模8周后开始药物灌胃干预,治疗4周后处死全部动物,应用全自动生化分析仪、放免法等进行血清生化和肝组织生化指标检测,并在HE染色光镜下观察大鼠肝组织病理形态学改变。结果:与模型组相比,荷丹片治疗后可明显降减低大鼠血清及肝组织中胰岛素抵抗相关指标:血糖(Glu)、胰岛素(INS)及游离脂肪酸(NEFA)水平,增加肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量。光镜观察发现荷丹片能明显缓解NASH大鼠肝细胞脂肪变性,减轻肝小叶中炎性细胞浸润。结论:荷丹片能够通过缓解胰岛素抵抗、调节抗氧化功能等途径降低NASH大鼠肝细胞中的脂质蓄积,从而改善肝功能。

不同成分灌注液对超声乳化术中兔角膜内皮细胞形态结构的影响(英文)

背景:灌注液的成分与其保护角膜内皮功能之间的联系一直是眼科界和制药业研究的热点课题。目的:观察超声乳化术中使用不同灌注液对兔眼角膜内皮细胞结构及功能的影响。设计:随机分组对照动物实验。单位:锦州医学院实验动物中心室,一所市级医院实验动物手术中心实验室。材料:实验于2004-09/2005-03在锦州医学院实验动物中心实验室和锦州市亚东眼科医院实验动物手术中心实验室进行。清洁级3.5月龄纯种日本大耳白兔16只,随机分为4组:正常对照组、生理盐水组、世可组和平衡盐液组,每组4只。灌注液世可(沈阳齐兴制药有限责任公司生产);平衡盐液(美国Alcon公司生产)。方法:用100mL/L水合氯醛(3mL/kg)腹腔麻醉,眼部用4%盐酸奥布卡因滴眼液表面麻醉。行双眼手术。使用美国Alcon超声乳化仪,常规显微手术器械,于上方巩膜缘后2mm作长约3.5mm的巩膜隧道切口,穿刺入前房,注入粘弹剂Viscoat(Alcon公司生产)0.25mL;环行撕囊,直径约5mm;超声乳化头置于中央区乳化吸出晶体核及皮质;术毕关闭切口。于术前和术后6h采用接触性角膜内皮显微镜进行角膜内皮细胞形态学定量测定:角膜内皮细胞密度、细胞面积、六边形细胞百分率和变异系数。术后6h应用锥蓝-茜素红活性染色,光镜下观察各组角膜内皮细胞微细结构的变化。主要观察指标:①角膜内皮细胞形态学定量分析(角膜内皮细胞密度、细胞平均面积、变异系数和六边形细胞百分率)。②角膜内皮细胞形态结构特征。结果:16只大耳白兔均进入结果分析。①术前各组间各项指标比较差异均无显著性。②细胞密度、细胞面积、六边形细胞百分率、变异系数:术后6h生理盐水组、世可组和平衡盐液组均低于正常对照组(P<0.05),世可组和平衡盐液组对比差异无显著性(P>0.05)。③光镜显示生理盐水组角膜内皮细胞形态改变明显,世可组和平衡盐液组角膜内皮细胞改变轻微,无细胞坏死。结论:在超声乳化术中,灌注液对角膜内皮的损伤为化学性损伤,在相同手术条件下,国产灌注液世可对角膜内皮细胞具有良好的保护作用。

超声乳化术中3种黏弹剂对角膜内皮保护作用的比较

目的:观察超声乳化过程中,3种黏弹剂对角膜内皮细胞的保护作用。方法:实验于2003-06/2004-01在锦州医学院实验动物中心实验室和锦州市亚东眼科医院实验动物手术中心实验室进行。取纯种日本大耳白兔16只。随机抽出4只兔8只眼用于正常角膜内皮活性染色,其余按术中应用不同的黏弹剂分为3组:Viscoat组、AmviscPlus组和海诺特组。每组4只兔,每只兔双眼行超声乳化术,用接触性角膜内皮显微镜分别观察术前和术后6h角膜内皮细胞密度,并在术后6h经锥蓝-茜素红活性染色后,光镜下观察角膜内皮细胞形态结构的变化,同时计算内皮细胞存活率。结果:①角膜内皮细胞损失率:术后6h3组内皮细胞密度均低于术前(P<0.01),Viscoat组内皮细胞损失率低于AmviscPlus组和海诺特组(4.99±2.70)%,(8.22±1.52)%,(10.14±4.05)%,P<0.05),AmviscPlus组与海诺特组对比差异无显著性(P>0.05)。②内皮细胞存活率:术后6h,Viscoat组平均内皮细胞存活率高于AmviscPlus组和海诺特组[(93.78±3.14)%,(80.77±3.91)%,(84.91±6.71)%,P<0.01],AmviscPlus组与海诺特组比较差异无显著性(P>0.05)。③角膜内皮细胞形态结构特征:光镜显示Viscoat组角膜内皮细胞损害最小。结论:弥散性黏弹剂Viscoat对比其他粘弹性物质保护效果要好。

形成性评价体系在中医组织学与胚胎学教学中的应用研究

目的构建科学合理的组织学与胚胎学形成性评价体系,并探索其对中医学生自主学习能力和学习效果的影响。方法选取该校中医学专业2015级、2017级和2018级五年制学生作为研究对象,其中2015级76名,2017级66名,2018级68名。对体现学生理解与应用能力的论述题成绩进行分析,采用调查问卷评价形成性评价对学生自主学习能力的影响。结果2017级、2018级80~100分数段比例明显提高,而<60分比例明显降低。2017级、2018级学生论述题得分均高于2015级学生,差异有统计学意义(P<0.05)。在学习意识方面,95.38%(124/130)的学生认为形成性评价有助于激发学习兴趣,自觉获取学习资源和专业前沿信息,其中2017级中31.82%(21/66)的学生在科研项目方面参与度不足。在学习规划方面,85.38%(111/130)的学生认为形成性评价有助于制定学习目标和学习计划,合理安排学习时间。在学习实施方面,80.00%(104/130)的学生认为形成性评价有助于自我调节学习态度,将理论与临床相结合。在学习反馈方面,91.54%(119/130)的学生认为形成性评价有助于每学期结束后的思考与反思,并及时调整学习计划。结论在组织学与胚胎学教学中,应用形成性评价体系可明显提高学生自主学习能力。

超声乳化术不同粘弹剂对角膜内皮影响的形态学观察

目的比较两种不同粘弹剂V iscoat和透明质酸钠在超声乳化术中对角膜内皮细胞的影响。方法12只纯种日本大耳白兔均分为对照组;实验组分为V iscoat组和透明质酸钠(海诺特)组,每只兔双眼行超声乳化术,术后6h在光镜和透射电镜下观察角膜内皮细胞的形态学变化。结果术后6h光镜显示V iscoat组角膜内皮细胞损害小。透射电镜下V iscoat组可见线粒体肿胀、嵴断裂或消失;透明质酸钠组可见细胞内多呈空泡样结构,有的内皮出现裸区。结论在相同的手术条件下,超声乳化手术粘弹剂V iscoat对角膜内皮细胞的损伤低于透明质酸钠。

超声乳化术中粘弹剂对角膜内皮保护作用的定量分析

目的观察两种粘弹剂V iscoat和Amvisc Plus在超声乳化术中对角膜内皮细胞的保护作用,并作定量分析。方法10只纯种日本大耳白兔随机分为两组:V iscoat组和Amvisc Plus组。每组5只兔,每只兔双眼行超声乳化术,术后6小时应用裂隙灯显微镜检查角膜,并用接触性角膜内皮显微镜观察角膜内皮细胞密度,同时在透射电镜下观察角膜内皮细胞的形态学变化。结果V is-coat组角膜大多透明,内皮细胞损失率最小(4.99±2.70)%,而Amvisc Plus组角膜水肿明显,内皮细胞损失率(8.22±1.52)%,与V iscoat组对比差异显著(P<0.05),透射电镜显示V iscoat组内皮细胞损害小。结论在相同的手术条件下,弥散性粘弹剂V iscoat对比其他粘弹性物质保护效果要好。

超声乳化术中不同灌注液对角膜内皮细胞的影响

目的:观察超声乳化术中使用不同灌注液(世可和平衡盐液)对兔眼角膜内皮细胞结构及功能的影响。方法:3.5月龄纯种日本大耳白兔,随机分为正常对照组、空白对照组、世可组和平衡盐液组,采用接触性角膜内皮显微镜进行角膜内皮细胞形态学定量测定。锥兰-茜素红活性染色,观察各组角膜内皮细胞微细结构的变化。结果:术后6h,各组较正常对照组细胞密度和六边形细胞百分率降低;细胞面积和六边形细胞百分率均高于正常对照组;光镜显示空白对照组角膜内皮细胞形态改变明显,而世可组和平衡盐液组角膜内皮细胞改变轻微,无细胞坏死。结论:在超声乳化术中,灌注液对角膜内皮的损伤为化学性损伤,在相同手术条件下,世可对角膜内皮细胞具有良好的保护作用。

两种不同超声乳化术对兔角膜内皮细胞的影响

目的:探讨冷超声乳化术和热超声乳化术后角膜内皮形态结构的变化。方法:将12只纯种日本大耳白兔随机分为3组,对照组为正常的兔角膜内皮细胞,实验组分为冷超声乳化组和热超声乳化组。每组4只兔,每只兔左眼均行冷超声乳化术,右眼行热超声乳化术。于术前和术后6小时采用接触性角膜内皮显微镜进行角膜内皮细胞形态学定量测定,并在透射电镜下观察角膜内皮细胞超微结构的变化。结果:热超声乳化组细胞密度和六边形细胞百分率明显降低(P<0.01),细胞面积和变异系数明显增加(P<0.01)。角膜中央1mm区域取材的透射电镜切片示冷超声乳化组的内皮损害小于热超声乳化组。结论:在相同的手术条件下,冷超声乳化术后角膜内皮的损伤小于热超声乳化术。

丹参酮ⅡA抗乳腺癌细胞增殖作用研究

目的利用雌激素受体(estrogenic receptor,ER)阳性乳腺癌T47D细胞和ER阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞观察丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA)对细胞增殖活性的影响及其对雌激素受体亚型的调节功能。方法以ER拮抗剂ICI182,780为工具药,采用MTT细胞增殖实验观察1×10-6mol.L-1和1×10-7mol.L-1丹参酮ⅡA对T47D和MDA-MB-231细胞增殖的影响。利用实时荧光定量PCR法及流式细胞术检测其对T47D细胞ERα和ERβmRNA及蛋白表达情况的影响。结果丹参酮ⅡA能够抑制T47D细胞增殖,且该作用可被ICI182,780部分拮抗;对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用较其对T47D细胞的作用更为明显。丹参酮ⅡA可使T47D细胞ERα和ERβmRNA和蛋白表达明显增加,并使ERα/ERβ比值有所上升。结论丹参酮ⅡA具有抑制乳腺癌细胞增殖的作用,抑制强度与对其ER亚型的调节作用相关。

不同粘弹剂对角膜内皮细胞影响的对比研究

目的 研究超声乳化过程中 ,应用不同粘弹剂对角膜内皮细胞的影响 ,并作对比分析。方法 7只纯种日本大耳白兔 ,随机抽出 1只兔 2只眼制成正常角膜内皮电镜切片 ,其余分为两组 :AmviscPlus组和海诺特组 ,双眼行超声乳化术 ,用接触性角膜内皮显微镜分别观察术前和术后即时角膜内皮细胞密度 ,并在透射电镜下观察正常和术后即时角膜内皮细胞超微结构的变化。结果 术后即时内皮细胞损失率 ,AmviscPlus组 8 85 % ,海诺特组 9 2 3% ,两组内皮细胞密度分别与术前相比有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,而两组间内皮细胞损失率无显著性差异 (P >0 0 5 )。术后即时角膜中央 1mm区域内取材的透射电镜切片示两者的内皮变化无明显差异。结论 两种不同的粘弹剂在超声乳化术中对角膜内皮细胞均具有明显的保护作用。

丹参酮ⅡA抗乳腺癌T47D细胞增殖的GPER途径研究

目的利用经典雌激素受体（estrogenic receptor,ER）和G蛋白偶联雌激素受体（G protein-coupled estrogen recep-tor,GPER）阳性乳腺癌T47D细胞,探索丹参酮IIA（TanshinoneIIA）对细胞增殖活性的影响及其GPER介导与调节功能.方法以GPER激动剂G1和GPER拮抗剂G15为工具药干预,并应用GPERSiRNA转染构建GPER基因沉默的T47D细胞,利用MTT细胞增殖实验观察丹参酮IIA对T47D细胞增殖速率的影响及GPER的介导作用.利用Westernblot方法检测丹参酮IIA对T47D细胞GPER表达情况的影响.结果1×10^-5 mol·L^-1 ～1×10^-7 mol·L^-1丹参酮IIA能够明显抑制T47D细胞增殖,且该抑制作用可被G1拮抗,可被G15增强.丹参酮IIA作用于GPER基因沉默的T47D细胞,该细胞表现出更为明显的生长抑制效应.West-ernblot测定结果表明,1×10^-5 mol·L^-1和1×10^-6 mol·L^-1丹参酮IIA可使T47D细胞GPER蛋白表达明显降低.结论丹参酮IIA具有抑制乳腺癌T47D细胞增殖的作用,该抑制作用可经GPER途径介导;且丹参酮IIA具有对靶细胞GPER表达的调节功能.

G蛋白偶联雌激素受体在雌激素相关肿瘤发生中的作用

在经典的雌激素核受体α和β之外,雌激素或雌激素样物质也可以经过膜受体,即G蛋白偶联雌激素受体(GPER)发挥功能。G蛋白偶联雌激素受体是雌激素非基因通路信号转导过程的重要介导因子,在雌激素相关肿瘤细胞的发生和治疗中具有重要的意义。现针对G蛋白偶联雌激素受体在雌激素相关肿瘤细胞中介导的效应及有关机制的研究进展进行综述。

雌激素、雌激素受体与心血管疾病

雌激素是一种参与机体多个器官系统功能调节的重要的固醇类激素。其水平的下降与女性绝经后心血管疾病发病率的增高存在着密切的关系。雌激素或雌激素样物质可以通过经典的雌激素受体(ER)α、ERβ或膜G蛋白偶联受体(GPR)30等介导的基因和非基因传导通路发挥心血管系统的调节功能;靶细胞受体亚型的特异性分布和状况是影响雌激素或雌激素样物质最终效应的主要因素。同时,雌激素对心血管系统作用机制的阐明对激素替代治疗(HRT)或植物雌激素的临床应用将具有重要指导意义。

二仙汤对顺铂所致大鼠卵巢早衰模型中卵巢颗粒细胞增殖及周期的影响

目的观察二仙汤对顺铂损伤大鼠卵巢颗粒细胞增殖及细胞周期的影响。方法以不同剂量的二仙汤药理血清作用于体外培养的顺铂损伤卵巢颗粒细胞,并以正常药理血清为空白对照,戊酸雌二醇药理血清为阳性对照,同时对比加入PI3K/AKT通路的抑制剂LY294002后各组的变化。MTT法检测各组药理血清作用于卵巢颗粒细胞24小时、48小时和72小时的增殖情况。流式细胞术检测各组中细胞周期各时相的变化。结果 (1)二仙汤对顺铂损伤后的卵巢颗粒细胞具有增殖促进作用(P<0.05);且对于顺铂损伤后并给予LY294002抑制剂的颗粒细胞也具有增殖改善作用(P<0.05)。(2)二仙汤各剂量组及戊酸雌二醇组均能使处于S期的顺铂损伤颗粒细胞比例显著增多,G_0/G_1期细胞相对比例减少(P<0.01),且增殖指数升高(P<0.01)。结论二仙汤对卵巢颗粒细胞增殖有显著促进作用,其作用机制可能是激活或增强AKT信号通路,抑制细胞凋亡,从而促进细胞增殖;另一方面,也可能是通过促进颗粒细胞从G_0期向S期转化,增加S期细胞比率来实现的。

二仙汤及其拆方治疗卵巢早衰的实验研究进展

近年来,卵巢早衰发病率呈逐年上升趋势。现代医学主要是以激素替代疗法加以治疗,临床效果一般且副作用大。传统医学认为此病主要是年未老,冲任已衰,天癸已竭,肾中精气的衰少,从而诱发卵巢早衰。二仙汤主要有温补肾阳、改善体内雌激素水平的作用。在临床治疗卵巢早衰中发挥着重要的作用。本文通过促性腺激素、下丘脑生殖调节激素、下丘脑—垂体—卵巢轴以及卵巢颗粒细胞水平综述了近几年来关于二仙汤及其拆方在治疗卵巢早衰方面的实验研究进展。

卵巢早衰颗粒细胞凋亡调控机制的研究进展

卵巢早衰是妇科疾病中常见病之一,近年来其发生率呈逐年增加的趋势,且低龄化趋向愈益明显。卵巢早衰发生的主要机制是卵泡细胞闭锁进程的加速,而其进程加速主要是由于颗粒细胞的凋亡,所以颗粒细胞在评判卵母细胞是否健康,胚胎生长状态是否良好这两方面起到了举足轻重的作用。因此对于总结研究近年来颗粒细胞凋亡调控机制相关文献十分必要。本文总结归纳了相关文献,根据具体机制的不同,分为3个角度,调控颗粒细胞凋亡的相关基因,介入颗粒细胞凋亡过程的细胞因子和调节颗粒细胞的相关激素,从这几方面进行了综述。