柯里拉京调控PI3K/Akt信号通路改善缺血性脑卒中的机制研究

目的利用网络药理学、分子对接、整体和细胞实验探讨柯里拉京抗缺血性脑卒中的作用及其潜在分子机制。方法网络药理学筛选柯里拉京抗缺血性脑卒中的关键靶点,并对这些靶点进行富集分析和分子对接,预测柯里拉京可能的作用机制;采用旷场实验、TTC染色观察大鼠MCAO/R后神经功能缺损程度和脑梗死体积;HE染色、TUNEL及电镜评估脑组织的病理变化。运用Western印迹及免疫组化法检测细胞凋亡和PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达。结果网络药理学及分子对接结果显示,柯里拉京可能通过作用于92个靶点发挥抗缺血性脑卒中的作用,其中与凋亡相关蛋白和PI3K/Akt信号通路蛋白高度结合。动物实验结果表明,柯里拉京改善大鼠MCAO/R后的神经功能缺损,缩小脑梗死体积,减轻神经元损伤。细胞,柯里拉京提高OGD/R诱导的PC12细胞活力,激活PI3K/Akt通路以抑制细胞凋亡。给予PI3K抑制剂LY294002后,可逆转柯里拉京对PI3K/Akt通路的作用。结论柯里拉京具有抗缺血性脑卒中作用,其分子机制与激活PI3K/Akt通路、抑制细胞凋亡有关。

Corilagin对OX-LDL诱导的HUVECs细胞损伤的保护作用及对MyD88信号通路表达的影响

目的探讨不同浓度和时间的柯里拉京(Corilagin)处理对氧化性低密度脂蛋白(oxidative low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)损伤的保护作用,以及其对MyD88信号通路表达调控的影响。方法体外培养HUVECs复制ox-LDL诱导损伤模型,利用形态学及免疫学方法鉴定HUVECs细胞,MTT法确定复制ox-LDL损伤HUVECs模型的最佳条件,根据不同处理将细胞分为正常组(Normal)、模型组(Model)、Corilagin(3.125、6.25、12.5、25、50μmol/L)组、阳性对照(VE 10μmol/L、Simvastain 1μmol/L)组。观察Corilagin对ox-LDL诱导损伤的HUVECs保护作用;Western blot和RT-qPCR方法检测HUVECs细胞中MyD88、P65、TNF-α、MCP-1表达变化。结果经形态学及免疫学方法鉴定,所培养细胞为HUVECs;70 mg/L的ox-LDL刺激12 h是复制ox-LDL损伤HUVECs模型的最佳条件;MTT结果显示,与ox-LDL组比较,Corilagin组细胞活力明显升高(P<0.01);RT-qPCR和Western blot结果表明,与Normal组比,ox-LDL组MyD88、P65、TNF-α及MCP-1的mRNA和蛋白表达升高(P<0.01);与ox-LDL组比较,Corilagin组及阳性对照组的MyD88、P65、TNF-α及MCP-1的mRNA和蛋白表达降低(P<0.01),且Corilagin组呈现剂量依赖下调MyD88、P65、TNF-α及MCP-1的mRNA和蛋白表达。结论随着时间和浓度的增加,Corilagin能明显提高ox-LDL诱导损伤的HUVECs细胞活力,其保护作用与抑制MyD88信号通路有关。

外泌体在脑缺血再灌注损伤中的作用研究进展

脑缺血再灌注(I/R)损伤发病机制复杂,与炎症反应、神经元凋亡等因素相关。外泌体因可改善神经通讯发生、促进神经元以及髓鞘突触的发育、重构神经血管单元和保持神经系统的稳态,成为治疗脑I/R损伤的研究热点。不同来源的外泌体在脑I/R中发挥不同作用,急性脑梗死患者来源的外泌体可导致脑损伤加重,而正常干细胞或神经系统细胞来源的外泌体能在损伤发生后阻止相关神经细胞凋亡和改善炎症反应等。本文简述外泌体在脑I/R损伤中的作用,并以不同细胞来源(包括干细胞、神经系统细胞和其他组织细胞)的外泌体进行分类,对外泌体在脑I/R损伤中的神经生物学机制以及可能的治疗手段等的研究进展进行综述,以期为该类新药研发提供依据。