弧菌疫苗对斑节对虾和日本对虾免疫预防的作用

尝试使用免疫学的方法来防治对虾弧菌病。将病原副溶血弧菌制成福尔马林灭活疫苗，在实验条件下分别以浸泡、口服和注射等方式接种于斑节对虾和日本对虾，结果发现，在一定的范围内，对虾的免疫保护率随疫苗浓度的增加而升高。在注射接种的方式中，斑节对虾在 １０９、１０８、１０７ｃｅｌｌｓ·ｍＬ－１的疫苗剂量下的保护力分别为４０％、５０％和４０％，浸泡组（疫苗浓度分别为１０８ｃｅｌｌｓ·ｍＬ－１、１０７ｃｅｌｌｓ·ｍＬ－１和１０６ｃｅｌｌｓ·ｍＬ－１）的免疫保护率分别为３０％、３０％和２０％，投喂组的免疫保护率为１１．１％。日本对虾注射免疫组（疫苗剂量为１０８ｃｅｌｌｓ·ｍＬ－１、１０７ｃｅｌｌｓ· ｍＬ－１和 １０６ｃｅｌｌｓ· ｍＬ－１）的免疫保护率分别为 ６０％、４０％和 ３０％，浸泡组（疫苗浓度分别为１０８ｃｅｌｌｓ·ｍＬ－１、１０ｃｅｌｌｓ·ｍＬ－１和１０６ｃｅｌｌｓ·ｍＬ－１）的分别为２２．２％、２２．２％和１１．１％，投喂组的免疫保护率为０。表明疫苗能提高对虾的成活率和抗感染能力，初步证实了对虾弧菌灭活疫苗的有效性，为日后大规模的生产实践打下了基础。

海水鱼类病原弧菌对对虾的致病力及其疫苗的免疫预防

鱼类致病弧菌(溶藻弧菌Vibrio alginolyticus,创伤弧菌V. vulnificus,河弧菌生物Ⅰ型V. fluvialis Ⅰ,鳗弧菌V. anguillarum和副溶血弧菌V. parahaemolyticus )同样可使斑节对虾Penaeus monodon患病,现对斑节对虾的致病性和免疫保护力作了研究?通过肌肉注射感染实验,发现5种弧菌对斑节对虾均有不同的致病作用?从5种弧菌中筛选出强毒株,以其制成福尔马林灭活疫苗?通过注射?浸浴和投喂等3种方式接种的斑节对虾,除投喂效果不明显外,注射和浸浴接种均有一定的免疫保护力?在注射接种组中,随着疫苗浓度的提高,其免疫力有升高的趋势?说明在鱼虾的弧菌病中,疫苗能起到共同的防御效果,为商用鱼虾疫苗的生产提供了可能?

斑节对虾弧菌病的病理学研究

对患有典型弧菌病症状的养殖斑节对虾进行了病理学研究。取病虾血淋巴制作血涂片，并取鳃、肝胰腺、肌肉等组织作组织病理和超微病理观察，同时取肌注感染后的患病对虾测定血淋巴中超氧化物歧化酶（SOD）的活力，结果显示，患病对虾的血细胞数目急剧减少，胞质浓染，透明细胞很难找到，血细胞形态多样，有的伸出伪足或形成异样突起。患病对虾鳃、肝胰腺、心脏、肌肉以及胃肠等组织内均出现程度不同的炎症反应，以肝胰腺最为严重。组织中充满大量的浓染血细胞，细胞肿胀，细胞核核质边聚，线粒体肿胀、变性，严重时整个细胞呈溶解状态。此外，在鳃和肝胰腺组织中还发现溶酶体增多的现象。肌注感染2h后，感染对虾的 SOD活力即开始显著下降，之后缓慢回升，至 48h恢复大部分活力。

斑节对虾弧菌病的病原生物学研究

对患弧菌病的养殖斑节对虾作了细菌学分析。取典型症状的濒死对虾的血淋巴和肝胰腺组织进行细菌分离、纯化、保种，并将分离菌进行回接感染，发现有很强的致病作用，且产生与自然发病相似的症状。从感染弧菌病的病虾体内进行细菌的分离、纯化和保种，经检验发现，分离菌和回接感染后的再分离菌均为革兰氏阴性短杆菌，极生单鞭毛，有动力，对O／l 29弧菌抑制剂敏感，发酵葡萄糖产酸不产气，氧化酶和过氧化氢酶反应呈阳性，不利用乳糖、蔗糖、蜜二糖，能利用柠檬酸盐、甘露醇、果糖和半乳糖；在无盐的蛋白胨水和10％NaCl的蛋白胨水中不生长，在3％，6％，8％NaCl的蛋白胨水中生长良好，吲哚反应呈阳性，V－P反应呈阴性，赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、明胶酶和淀粉酶试验呈阳性，β－半乳糖苷酶、色氨酸脱氨酶、苯丙氨酸脱氨酶和精氨酸双水解酶反应呈阴性，可还原硝酸盐。经鉴定，该病原菌为副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus 。

综述:对虾弧菌病及其免疫预防的研究进展

弧菌病是影响对虾养殖业最为常见、危害较重的一类疾病。其症状一般为红腿、黄鳃、烂尾、烂眼、甲壳溃疡、肌肉白浊等 ,常伴有败血症。副溶血弧菌Vibriopara haemolyticus是人们发现最早的对虾病原弧菌 ,随后溶藻弧菌V .alginolyticus,鳗弧菌V .anguillarum ,哈维氏弧菌V .harveyi,创伤弧菌V .vulnificus等十多种致病弧菌陆续被发现 ,但其致病机理仍未查清。多年来弧菌病主要采用抗生素治疗 ,但抗生素治疗带来一系列严重后果 ,主要是产生耐药菌株 ,造成水体污染 ,破坏虾体免疫力 ,因此探索新的治疗途径势在必行。以提高虾体自身免疫力的免疫预防研究是当前研究的热点之一 ,它以无毒无副作用 ,不会造成环境污染等优点而显示出广阔的前景。弧菌疫苗的研制已获初步成功 ,疫苗有灭活疫苗和减毒疫苗两种。免疫方式有浸泡、口服、注射和喷雾等 ,注射方式效果最佳但费时费力且易损伤虾体 ,浸泡疫苗需要量大 ,故探索一条好的免疫方式是当前工作的重点。要进行对虾的免疫预防研究 ,必须了解对虾的免疫机制 ,一般认为虾类的免疫主要以非特异性免疫为主 ,血细胞和酚氧化酶系统在其中起着重要作用。对弧菌病的病原、病理、诊断。

医院推行1SO14001及OHSASl8001体系认证的理论与实践

目的 贯彻落实国家保护环境和节约能源资源的各项法律法规与部门规章以及管理医院环境内有毒、有害危险因素 ,减少和降低职业损害 ,保护医院环境内的所有人群的身体健康。方法 按照ISO14 0 0 1环境管理体系———规范与使用指南 ,及OHSASl80 0 1职业健康安全管理体系—规范建立环境、职业健康安全管理体系。结果 通过体系运行使医院的环境管理、能源资源的合理应用与职业健康安全管理符合国家相关标准要求 ,并通过认证公司的认证审核并推荐注册。结论 通过贯标认证提高了员工保护环境、节约能源与资源的意识 ,加强了职业防护能力。

巴氏合金轴瓦焊接方法论述

针对轧机三联箱轴瓦巴氏合金传统焊接工艺存在的缺陷进行研究论证,最终制定合理的焊接工艺。

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定人乳中的胆碱、L-肉碱、乙酰基-L-肉碱和牛磺酸

目的建立一种简单、快速、灵敏的可以同时测定人乳中胆碱、L-肉碱、乙酰基-L-肉碱和牛磺酸的超高效液相色谱-串联质谱法。方法样品经甲醇沉淀蛋白、乙醚去除非极性杂质,UPLC BEH Amide色谱柱分离后采用保留时间和多反应离子检测(MRM)定性、定量,同位素内标校正。结果牛磺酸的定量下限(LOQ)为0.02 mg/100 g,胆碱、L-肉碱和乙酰基-L-肉碱的LOQ均为0.003 mg/100 g。标准加入法测定所有被测物的高、中、低三个浓度加标水平的回收率在84.8%~90.3%之间,相对标准偏差(RSD)在1.7%~5.3%之间。4种被测物在各自浓度范围内线性良好,R2均大于0.999。结论本文建立了同时测定人乳中胆碱、L-肉碱、乙酰基-L-肉碱和牛磺酸的超高效液相色谱-串联质谱法。方法前处理简单、快速,样品需要量少;采用质谱检测器同位素内标一对一校正定量,检测结果准确、灵敏。方法可以为人乳中相关营养素含量的调查、研究和为配方奶粉人乳化提供技术支持。

锤式破碎机的安装及调整方法改进

针对我公司90万吨/年焦化工程新上两台PCFK式反击锤式粉碎机工作时振动大、安装精度高的特点进行探讨、研究,制定合理可行的安装、调整方案。

假单胞菌引起罗氏沼虾黄鳃、黑鳃病的研究

对高密度养殖条件下患细菌病的罗氏沼虾 (Macrobrachiumrosenbergii)作了初步研究 ,病虾症状为 :食欲下降 ,黄鳃或黑鳃、断须、断腿 ,有的甲壳上有黄色或黑色的斑块 ,取上述典型症状的病虾鳃部和肝胰腺组织进行细菌分离、纯化和保种 ,经鉴定 ,该病原菌为恶臭假单胞菌和铜绿假单胞菌 .将分离菌进行回接感染 ,发现有很强的致病作用 ,且产生与自然发病相似的症状 ,从再感染的病虾体内分离的细菌经鉴定也为恶臭假单胞菌 (P putida)和铜绿假单胞菌(P aeruginosa) ,由此可认为它们是此次发病的病原菌 .药敏实验发现 ,铜绿假单胞菌对环丙沙星、氟哌酸氯和庆大霉素的敏感性较强 :恶臭假单胞菌对庆大霉素 ,环丙沙星、卡那霉素、强力霉素和新生霉素较为敏感 .

婴幼儿配方粉中香兰素和乙基香兰素的检测方法比较

目的建立婴幼儿配方粉中香兰素、乙基香兰素的液相色谱法和同位素稀释液相色谱质谱联用两种测定方法。方法液相色谱法:样品经乙酸锌沉淀蛋白、Oasis MAX SPE柱净化,HSST3色谱柱分离后,在279nm波长处进行检测,外标法定量。同位素稀释液质联用法:样品采用乙腈沉淀蛋白稀释净化后,采用WatersBEHC18柱分离,在质谱检测器多反应监测(UPLC-MS/MS)模式下,用同位素稀释液质联用法进行检测。结果液相色谱法:香兰素、乙基香兰素的定量下限(LOQ)均为0.1mg/kg。香兰素的方法回收率为88%～90.8%,相对标准偏差(RSD)小于5.2%;乙基香兰素的方法回收率为84%～93.3%,RSD小于6.2%。同位素稀释液质联用法香兰素、乙基香兰素的LOQ分别为香兰素1、0.5mg/kg。香兰素、乙基香兰素的方法回收率分别为82.1%～91.2%、90.2%～97.6%,RSD分别小于6.1%、5.8%。结论本文建立的两种方法对同一样品的检测结果一致,为婴幼儿配方粉中香兰素、乙基香兰素的定量检测提供了较为理想的方法。

应用SPE柱净化HPLC/UV法测定乳制品及其原料中的硫氰酸盐

采用SPE柱净化、高效液相反相离子对色谱分离、紫外检测器(HPLC/UV)测定乳制品及其原料中的硫氰酸盐。试样经乙酸沉淀蛋白、Oasis WAX SPE柱净化和浓缩,以甲醇和磷酸盐缓冲液加离子对试剂为流动相,经Symmetry C18色谱柱分离,在231 nm波长处进行检测,外标法定量。结果表明,硫氰酸盐浓度在0.2～50 mg/L范围内线性良好,相关系数大于0.999,方法检出限为0.05 mg/kg,定量下限为0.15 mg/kg,在加标量为1、5、25 mg/kg时的回收率为77%～104%。该方法重现性好、检测时间短,灵敏度高,为乳制品及其原料中硫氰酸盐的定量检测提供了较为理想的方法。

超高压液相色谱-串联质谱法同时测定人乳中的硫胺素、核黄素、烟酰胺、泛酸和吡哆醛

目的建立一种快速、灵敏的同时测定人乳中多种B族维生素的超高压液相色谱-串联质谱法。方法样品经甲醇沉淀蛋白、乙醚去除非极性杂质,UPLC HSS T3色谱柱分离后采用保留时间和多反应离子检测(MRM)定性、定量,同位素内标校正。结果维生素B1(硫胺素)、维生素B2(核黄素)和维生素B6(吡哆醛)的定量下限(LOQ)均为0.2μg/100 g,维生素B3(烟酰胺)和维生素B5(泛酸)的LOQ均为0.3μg/100 g。标准加入法测定所有被测物的高、中、低三个浓度加标水平的回收率在93.1%~101.1%之间,相对标准偏差(RSD)在2.8%~6.2%之间。5种水溶性维生素在各自浓度范围内线性良好,R2均大于0.998。结论本文建立了同时测定人乳中5种B族水溶性维生素的超高压液相色谱-串联质谱法。方法前处理简单、快速,样品需要量少;采用质谱检测器同位素内标一对一校正定量,检测结果准确、灵敏。方法可以为人乳中维生素含量的检测、调查、研究提供技术支持。

猪衣原体病的研究进展

猪衣原体病是由衣原体引起的猪的一种接触性传染性病,在我国猪衣原体也叫鹦鹉热或称鸟疫,是由鹦鹉热衣原体所引起猪的一种接触性人畜共患性传染病。它引起猪肺炎、肠炎、心包炎、关节炎、睾丸炎、子宫感染和流产等多种病型。常因菌株毒理、猪性别、年龄、生理状况和环境因素的变化而出现不同症候群。本文从猪衣原体的病原学、分子生物学、发病机理、诊断方法等多方面探讨对猪衣原体病的研究。

固相萃取-二维液相色谱法测定婴幼儿配方食品中的维生素B_(12)

采用固相萃取(solid phase extraction,SPE)与二维液相色谱联用技术测定婴幼儿配方食品中的维生素B12;试样经淀粉酶酶解、HLB SPE净化,以双三元液相色谱仪用双柱切换法经ZORBAX GF-250柱进一步净化和浓缩样品,用ZORBAX Bonus-RP柱分析,在550nm波长处进行检测,外标法定量.结果表明,维生素B12在2～40ng/mL范围内线性良好,其线性决定系数大于0.999,方法检出限为1.0μg/kg,定量下限为2.5μg/kg,在加标量为5.0、10.0和50.0μg/kg时的回收率为88.0%～94.8%.本方法定量准确、重现性好、灵敏度高、实验成本小,为婴幼儿配方食品中维生素B12的定量测定提供了较为灵敏、实用的方法.

液相色谱-质谱联用测定乳及乳制品中29种性激素

建立了乳及乳制品中29种性激素的液相色谱串联质谱检测方法。试样经乙腈蛋白沉淀,乙酸乙酯再提取,HLB柱净化,Shield RP18和HSS T3色谱柱梯度分离,并以内标法计算结果,方法检出限为0.1～0.5μg/kg;回收率在70%～120%之间;相对标准偏差在1%～20%之间。本方法重现性好,准确度高,且检测成本较低,适用于日常样品的检测。

高压液相色谱法同时测定婴幼儿配方乳粉中的叶黄素和β-胡萝卜素

目的：建立同时测定婴幼儿配方乳粉中叶黄素和β-胡萝卜素的快速测定方法。方法奶粉样品加2 mL 50%氢氧化钾碱溶液,在70℃水浴下皂化15min,经石油醚：乙醚(1：1,v/v)提取,水洗、浓缩后, C30色谱柱分离,在450 nm波长处检测,外标法定量。结果叶黄素和β-胡萝卜素在0.2~4.0μg/mL范围内线性良好,相关系数： R2>0.9990；三浓度水平加标回收率均在80%~90%之间,样品及三个浓度水平加标6次重复试验RSD均<5%。结论该方法准确、简单、快速且能同时测定婴儿配方乳粉中的叶黄素和β-胡萝卜素含量。

高效液相色谱法同时测定人乳中视黄醇、α-生育酚和类胡萝卜素

目的应用高压液相色谱法同时测定人乳中视黄醇、α-生育酚、叶黄素和β-胡萝卜素。方法人乳样品经皂化后,石油醚乙醚提取,氮吹浓缩后,用C30柱分离,经紫外检测器和荧光检测器检测4种被测物。结果 4种脂溶性维生素在各自浓度范围内线性良好,相关系数均大于0.9990;三浓度水平加标回收率在70%~120%之间,相对标准偏差均小于20%。结论本文将校准后的标准品用液相色谱法进行纯度鉴定,提高了检测的准确度。通过方法学验证了本方法的准确性,灵敏性和稳定性,可同时测定人乳中视黄醇,α-生育酚,叶黄素和β-胡萝卜素的含量。通过对100个成熟乳样品的分析,初步建立了人乳中脂溶性维生素含量数据库。

冶金机械液压污染的原因与控制思考

冶金行业一直都是我国社会发展中极为重要的存在,关系到国民的日常生活,对于现代化建设也有着巨大的影响与作用。随着时代的不断发展,冶金机械液压系统在效率与质量层面上都已经无法满足社会需求,在进行系统应用的过程中,往往会出现污染的状况,不但会导致整个冶金工作在生产质量层面上无法得到有效保障,对于整个行业的发展也会带来较为不利的影响。正因如此,本文就导致冶金机械液压污染的因素进行分析,并以此为基础提出相应的处置措施,以此来确保冶金机械液压污染现象能够得到有效控制。