草木樨药材中香豆素类化合物提取分离纯化研究

目的:建立草木樨药材中主要活性成分香豆素类化合物工业化提取分离纯化方法与条件。方法:通过比较不同的提取条件;有机溶剂萃取法与大孔树脂分离纯化,采用HPLC法测定香豆素。结果:药材最佳提取工艺:取草木樨药材粗粉,加50%乙醇回流提取3次,每次提取1.0h,溶媒用量依次为20,15,12倍。纯化最佳工艺:选用YWD07D1型大孔吸附树脂,为200g药材/L溶液,上样树脂柱径高比为1∶7,药材和树脂用量比为7∶1。上样后先用3倍柱体积去离子水洗脱,再用3倍柱体积80%乙醇洗脱。收集80%乙醇洗脱液,50℃减压浓缩。结论:总有效部位以香豆素计含量达到50%以上。

木瓜中等极性部位高效液相色谱指纹图谱研究

目的研究不同采收时间和不同炮制方法的木瓜药材中等极性部位指纹图谱,为木瓜的规范化种植与合理应用提供依据。方法以咖啡酸、绿原酸为参照物,采用高效液相色谱(HPLC)法测定分析各指纹图谱,色谱条件:C18(Kromasil C18,10nm^5μm,4.6mm×250mm)色谱柱;流动相:(A)乙腈-甲醇(6:4),(B)0.05%磷酸梯度洗脱,0~12min(10%~30%A,90%~70%B),~30min(30%~50%A,70%~50%B),~35min(50%~70%A,50%~30%B),~45min(70%~90%A,30%~10%B),~50min(90%~60%A,10%~40%B),~60min(60%~10%A,40%~90%B),~70min(10%A,90%B);流速:0.8mL·min-1;检测波长:283nm。结果木瓜中等极性部位指纹图谱有较好的相关性,木瓜不同采收时间的样品分为3大类,其中1~4批为一类,具有2个共有峰,5~7批为一类,具有3个共有峰,第8,9为一类,有3个共有峰;其中又以第5批采收时间最好,其次是第6,7批;不同炮制方法以晒制方法特征峰峰面积大;存放时间对于成分含量也有一定影响。结论该研究有助于木瓜的质量控制、采收和应用。

固体分散技术提高黄芩提取物溶出度的研究

目的:通过制备固体分散体,提高黄芩提取物的溶出度。方法:采用熔融法和溶剂法,制备聚乙二醇4000(PEG4000),聚乙二醇6000(PEG6000),聚乙烯吡咯烷酮K30(PVPK30)3种载体材料及不同比例条件下的固体分散体。通过比较原药材、固体分散体、机械混合物的溶出性能,从而确定制备的最佳方法和最佳比例。结果:不同载体不同比例的固体分散体均能提高药物的溶出度,且载体比例越大,药物的溶出越快,3种载体的增溶效果依次为PVPK30>PEG4000>PEG6000。结论:以PVP为载体,采用溶剂法所制备的药物/载体比例为1∶6的固体分散体能显著提高黄芩提取物的溶出速率。

草木樨药材香豆素的含量测定

目的:探讨草木樨药材中香豆素提取与含量测定方法,从而为草木樨的质量控制奠定相应基础。方法:采用HPLC测定方法,以香豆素含量为评价指标从提取溶剂、药材粒径、提取时间、提取次数、提取方法等多个方面进行超声、索式、回流3种方法进行了提取方法研究。结果:采用超声提取方法较好,提取条件是60～80目药材0.25g,加入50mL50%甲醇超声提取30min,其提取效果均好于其他几种方法,其平均加样回收为99.49%,RSD%为0.53%。结论:该提取方法比较简单,对香豆素的提取效果较好,基本上反映出草木樨药材中香豆素的含量,可以作为草木樨香豆素含量测定的评价方法。

鸡眼草乙醇提取物抗炎作用研究

目的采用体外炎症模型研究鸡眼草乙醇提取物抗炎作用。方法建立脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞系RAW264.7细胞体外炎症模型,使用1,5和10μg/ml三种浓度的鸡眼草乙醇提取物对其进行干预;ELISA法检测药物干预前后上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌量,Griess反应测定NO水平;实时荧光定量RT-PCR检测TNF-α、iNOS和COX-2的mRNA表达;Western blot法检测COX-2和HO-1的蛋白表达水平。结果鸡眼草乙醇提取物干预后,上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6和NO含量与模型组相比均显著降低(P<0.01),并存在剂量依赖关系;干预后细胞TNF-α,iN-OS和COX-2的mRNA表达水平显著降低(P<0.01),也存在剂量依赖关系;鸡眼草乙醇提取物及地塞米松DM干预后COX-2蛋白水平明显降低(P<0.01),HO-1蛋白表达水平明显升高(P<0.01),亦存在剂量依赖关系。结论鸡眼草乙醇提取物可以下调TNF-α、IL-1β、IL-6、NO和COX-2等炎症介质的表达,同时促进HO-1的释放而发挥一定的抗炎作用。

椎痛安胶囊抗炎镇痛作用的实验研究

目的:研究椎痛安胶囊的抗炎、镇痛、消肿等药理作用,为该药的临床研究提供基础。方法:采用小鼠耳廓肿胀法、大鼠甲醛致足跖肿胀法、大鼠棉球肉芽肿法、小鼠热板法、小鼠扭体法等多种模型和方法。结果:椎痛安胶囊能较好地抑制二甲苯引起的小鼠耳廓炎性肿胀和大鼠甲醛致足跖肿胀,并减轻大鼠棉球肉芽肿质量,说明椎痛安胶囊有明显的抗炎作用。镇痛实验表明,椎痛安胶囊能显著提高热板试验小鼠的痛阈,有效抑制冰醋酸引起的小鼠扭体反应次数。结论:椎痛安胶囊具有良好的抗炎、镇痛、消肿等作用。

RP-HPLC法测定消炎止痛片中大黄素、大黄酚的含量

目的:建立RP-HPLC测定消炎止痛片中大黄素、大黄酚含量的方法.方法:色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶;柱流动相为甲醇∶ 0.02 mol/L磷酸二氢钾(82∶ 18);检测波长为290 nm;柱温为室温;流速1.0 ml/min;进样量6 μl;理论塔板数按大黄素、大黄酚峰计算,均应不低于3000.结果:大黄素进样量在0.04～0.4 μg范围内线性关系良好,r＝0.99996;平均回收率为99.12%,RSD＝1.27%(n＝5).大黄酚进样量在0.08～0.8 μg范围内线性关系良好,r＝0.99984;平均回收率为98.53%,RSD＝1.15%(n＝5).结论:本法简便、准确、灵敏度高,重现性好,可用于本制剂中大黄素、大黄酚的含量测定.

正交试验法优选藤茶参口含片的提取工艺

目的优选藤茶参口含片的最佳提取工艺。方法采用正交试验设计,以提取液中蛇葡萄素含量及浸膏得率为指标,用高效液相色谱法进行测定,优选藤茶参口含片的提取工艺。结果最佳提取工艺为8倍量的水浸泡1.5h,提取2次,每次1h。结论该提取工艺稳定,安全,简便易行。

对于中医药现代化研究的若干思考

传统中医药在近50多年来,不论是在普及规模上还是在学术研究方面,都得到了极大的提高,但是研究质量上却没有明显的革新与进步,这是一个值得广大中医药和生物科学研究者思考的科学问题。

儿泻停胶囊的薄层色谱研究

儿泻停胶囊由党参、白术、葛根、广藿香、木香等药组成,用于治疗小儿泄泻、呕吐发热、消化不良、消瘦倦怠等症.笔者对儿泻停的薄层色谱部分进行研究,现报道如下. 1材料与方法 1.1仪器与试剂 CQ-250超声波仪(上海超声波仪器厂制造);939薄层制板器(重庆贝可得公司制作);硅胶G(青岛海洋化工厂提供);白术、木香、广藿香对照药材,葛根素对照品(中国药品生物制品检定所提供);所用试剂均分为分析纯;儿泻停胶囊(0.5g/粒,自制).

正交试验法优选四君子胶囊的提取工艺研究

目的:优选四君子胶囊的最佳提取工艺。方法:采用正交试验设计,以高效液相色谱法测定提取液中人参皂苷Rg1的含量,及浸膏得率为指标,优选四君子胶囊的提取工艺。结果:最佳提取工艺为8倍量的水浸泡30min,提取2次,每次3h。结论:该提取工艺稳定,安全,简便易行。

草木犀正丁醇提取物对NF-κB和血红素氧合酶1表达的影响

目的:探讨草木犀的正丁醇提取物在炎症中的作用。方法:通过LPS干预RAW264.7细胞系建立炎症细胞模型,免疫细胞化学法检验NF-κB的表达及分布变化,实时荧光定量RT-PCR法检测血红素氧合酶1(HO-1)的基因表达,Western blot法测定HO-1的蛋白表达量。结果:免疫细胞化学法结果显示药物干预时胞质被染为棕色,NF-κB多分布在胞质未被激活;仅有LPS干预时,胞核被染为棕色,NF-κB集中分布在细胞核表达增强。药物提取物干预后HO-1的mRNA表达水平明显升高,且呈剂量依赖型关系;Western blot结果显示药物干预后HO-1的蛋白表达水平也明显升高。结论:草木犀的正丁醇提取物通过抑制NF-κB的激活,同时促进HO-1的释放而发挥一定的抗炎作用。

反相高效液相色谱法测定霉茶及其原植物中杨梅素的含量

目的测定霉茶中杨梅素的含量。方法采用RP-HPLC法测定,色谱柱为Zorbax SB-C18不锈钢柱(250mm×4.6mm,5μm)。流动相为乙腈-水-磷酸(20∶80∶0.2),检测波长为254nm。结果杨梅素在0.118-0.59μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为101.10%(n=6)。结论该方法准确可靠,适合于霉茶中杨梅素的含量测定。

木瓜水溶性部位高效液相色谱法指纹图谱研究

目的研究不同采收时间和不同炮制方法的木瓜药材水溶性部位高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,为木瓜的规范化种植与合理应用提供依据。方法以绿原酸为参照物,采用HPLC法测定分析各指纹图谱,色谱条件:C18(Krom asil C1810 nm^5μm,4.6 mm×250 mm)色谱柱,流动相:(A)乙腈-甲醇(6:4)(B)0.05%磷酸梯度洗脱,0~12 m in(10%~30%A,90%~70%B),12~30 m in(30%~50%A,70%~50%B),30~35 m in(50%~70%A,50%~30%B),35~45m in(70%~90%A,30%~10%B),45~50 m in(90%~60%A,10%~40%B),50~60 m in(60%~10%A,40%~90%B),60~70 m in(10%A,90%B);流速0.8 m l.m in-1,检测波长283 nm。结果木瓜水溶性部位的指纹图谱有较好的相关性。分析表明,木瓜不同采收时间的样品分为3类—第2,3,6,9批归为一类,有13,17,19 m in3个,共有峰;第1,5,8批归为一类,出峰各有5个,有13,17,19 3个共有峰;第4,7归为一类,有17,19两个共有峰。其中又以第5批采收时间最好;不同炮制方法以晒的方法所含峰数目和含量要高;不同存放时间以存放时间短的较好。结论该研究有助于木瓜的质量控制、采集和应用。

椎痛安胶囊质量标准的研究

目的建立椎痛安胶囊的质量标准。方法采用薄层色谱(TLC)法对处方中的乳香、狗脊、葛根进行定性鉴别;采用高效液相色谱(HPLC)法测定椎痛安胶囊中芍药苷的含量,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6mm×150mm,5μm);以乙腈-0.1%磷酸水溶液(15:85)为流动相;柱温:25℃;流速为1.0mL.min-1;进样量:10μL。结果TLC色谱中斑点清晰,易于识别;HPLC法精密度、重现性良好。芍药苷在14.15～113.20μg.mL-1范围内有较好的线性关系(r=0.9997,n=5),平均回收率为98.21%(RSD=1.06%,n=9)。结论所建立的方法简便可靠,重复性好,可用于椎痛安胶囊的质量控制。

雷公藤根皮及地上部分的研究进展

雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook)系卫矛科植物,近二十年来被广泛用于治疗类风湿关节炎、肾小球炎及各种皮肤病,具有抗炎、抗生育、抗肿瘤、抗菌、提高机体免疫等作用.有关雷公藤化学成分的研究主要集中于根部.人们一般认为,本品根皮毒性较大,故常将根皮除去后入药.但近年来的研究表明,雷公藤的根皮及茎、叶、花、果具有同样的临床应用价值,有关雷公藤根皮及地上部分的研究,也取得了一定的进展.现报道如下.

实时荧光定量PCR筛选和评价清热解毒中药抗炎活性的研究

目的:对几种具有清热解毒的民间植物药进行抗炎活性评价研究。方法:以LPS刺激RAW 264.7细胞为炎症模型,TNF-α变化为评价指标,采用实时荧光定量PCR对几种具有清热解毒的民间植物药进行抗炎活性评价研究。结果:这些中药均有不同程度的抗炎活性,表明中药清热解毒功效与抗炎活性有一定相关性。结论:采用细胞实验筛选和评价中药的抗炎活性具有一定的科学可行性。