透明质酸修饰纳米粒在超声-微泡介导下的体外靶向性与安全性评价

目的制备一种由透明质酸修饰的纳米粒核酸递送载体(HDP@siRNA NPs),评价其生物安全性以及在超声-微泡介导下的体外转染靶向性。方法采用超声乳化溶剂挥发联合两步静电吸附法制备得到HDP@siRNA NPs,在透射电镜下观察其外观形态,测定其粒径、Zeta表面电位及体外稳定性,并检测siRNA的包封率及体外释放能力。荧光显微镜观察超声-微泡介导下纳米粒对肿瘤细胞的转染效果。通过CCK-8实验以及小鼠定期给药后的血清生化指标[肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、肝脏的丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转移酶(AST)、肾脏的血清肌酐(CREA)、尿素氮(BUN)]检测及主要器官(心、肝、脾、肺、肾)病理切片分析验证纳米粒体内外生物安全性。结果成功制备出HDP@siRNA NPs,其在透射电镜下为形态均一的三层球形结构,粒径为(154.71±2.91)nm,Zeta表面电位为(-14.12±1.67)mV,并可长期稳定保存。该纳米粒载体对siRNA的包封率为(77.05±2.28)%,体外释放实验显示其具有缓释效果。靶向纳米粒联合超声-微泡组转染细胞后,Cy3荧光强度量化值为单独siRNA组的3.98倍(P<0.001),为非靶向NPs组的1.71倍(P<0.001),为靶向NPs组的1.39倍(P<0.001)。CCK-8结果显示,共孵育siRNA浓度为100 nmol·L^(-1)及150 nmol·L^(-1)时,HDP@siRNA NPs组细胞存活率依然维持在较高水平,并高于DP@siRNA NPs组(P<0.001),同时加入SonoVue共孵育对细胞存活率未产生明显影响(P>0.05)。对健康小鼠定期注射纳米粒及SonoVue微泡期间,给药结束后的血清生化检测结果显示,三组小鼠心、肾、肝功能基本指标水平差异均无统计学意义(P均>0.05),心、肾、肝未见异常损害情况。结论成功制备的由透明质酸修饰的HDP@siRNA NPs具有较高的生物安全性,在超声-微泡介导下其转染细胞效率得到进一步提升,具备作为新型核酸递送载体的潜力。

剪切波弹性成像评估颈动脉斑块与冠状动脉病变程度的相关性

目的采用二维超声联合剪切波弹性成像(SWE)评价颈动脉斑块回声及弹性模量(E)值,进一步探讨颈动脉斑块E值与冠状动脉病变程度的相关性。资料与方法回顾性选取2021年1月—2022年3月在宁夏医科大学总医院心脑血管病医院拟行冠状动脉造影(CAG)的患者92例,术前行颈动脉超声,根据回声及形态将斑块分为均质(低、等、强)、不均质及溃疡斑块,再对目标斑块行SWE检测E值;通过CAG观察患者冠状动脉病变累计支数、狭窄程度及冠状动脉病变严重程度Gensini评分,分析斑块E值与冠状动脉病变程度的关系。结果二维超声下,冠状动脉重度狭窄时均质低回声斑块与均质强回声斑块比较差异有统计学意义(χ2=13.78,P=0.01),均质低回声斑块Gensini评分高于均质强回声斑块,不均质回声斑块Gensini评分高于均质等、强回声斑块,差异有统计学意义(P均<0.05)。SWE模式下,冠状动脉重度狭窄与轻度、中度狭窄时颈动脉斑块E值比较差异有统计学意义(P均<0.05)。冠状动脉狭窄程度与颈动脉斑块Emax、Emin、Emean值呈负相关(r=−0.43、−0.47、−0.47,P均<0.01)。以CAG结果绘制受试者工作特征曲线,颈动脉斑块Emax、Emin、Emean值辅助诊断冠状动脉重度狭窄的最佳界值为57.25、31.70、45.65 kPa。结论颈动脉斑块E值可反映冠状动脉病变程度,与冠状动脉狭窄程度呈负相关,为预测冠状动脉病变提供参考价值。

四川省卫生防疫人才队伍现状及培养开发

江泽民同志在党的十五大政治报告中指出：“培养与现代化要求相适应的数以亿计高素质的劳动者和数以千万计的专门人才，发挥我国巨大的人力资源优势，关系到２１世纪社会主义事业的全局”。因此，培养开发一支高素质的、适应新时代卫生事业需要的卫生防疫人才队伍，无论对...

超声造影对小鼠乳腺癌淋巴结转移模型的诊断价值

目的探讨经静脉超声造影(contrast-enhanced ultrasound,CEUS)对诊断小鼠乳腺癌淋巴结转移模型的应用价值。方法采用小鼠4T1乳腺癌细胞足垫种植成瘤的方法构建50只Balb/c小鼠腘窝淋巴结肿瘤转移模型,接种肿瘤细胞悬液后2~6周,每周随机抽取10只小鼠进行常规超声及CEUS检查,然后立即处死小鼠并解剖肿大腘窝淋巴结进行病理诊断,分析不同时间点淋巴结声像图表现及转移发生率。结果超声共检出50枚小鼠肿大腘窝淋巴结,其中经病理诊断为转移性淋巴结共32枚(32/50),反应性增生淋巴结18枚(18/50)。在CEUS上转移性淋巴结多表现为向心性的整体不均匀增强,反应性增生淋巴结多表现为离心性的整体均匀增强。常规超声在淋巴结良恶性鉴别中准确度为56.0%,灵敏度为56.3%,特异度为55.6%,联合经静脉CEUS在淋巴结良恶性鉴别中准确度为76.0%,灵敏度为75.0%,特异度为77.8%,联合CEUS的诊断准确度要高于单独常规超声(P<0.05),而灵敏度与特异度差异无统计学意义(P均>0.05)。结论经静脉CEUS对小鼠乳腺癌淋巴结转移模型的诊断有一定的应用价值。

精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸环肽修饰的纳米粒在小鼠乳腺癌细胞中的靶向性及超声成像研究

目的制备精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸环肽(c RGD肽)修饰的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸(PEG-PLGA)高分子聚合物靶向纳米造影剂c RGD-PEG-PLGA@PFPNPs(c RGD-NPs),探究其表征、相变及对小鼠乳腺癌细胞(4T1)的靶向性及超声成像。材料与方法利用双乳化法制成c RGD-NPs,验证c RGD与PEG-PLGA连接情况,观察cRGD-NPs表征、热致相变稳定性等基本特征;检测其对4T1细胞活性的影响;使用激光共聚焦显微镜,将BALB/c小鼠分为靶向组3只及非靶向组3只,通过活体成像观察小鼠体内外乳腺癌细胞摄取c RGD-NPs情况;观察c RGD-NPs声致相变及造影效果。结果成功制备c RGD-NPs,光镜与透射电镜下均表现为形态规则、大小均一的球形,平均粒径为(93.19±31.41)nm;不同浓度c RGD-NPs同4T1细胞共孵育不同时间后,细胞活力均>85%。激光共聚焦显微镜及活体组织荧光成像观察显示,与非靶向纳米粒组相比,c RGD-NPs组更多聚集于肿瘤细胞周围。随着低强度聚焦超声辐照时间推移增加,体外超声造影成像效果越好,在相同条件下也实现了体内乳腺肿瘤显影。结论cRGD-NPs是一种可靶向聚集于4T1细胞区域,具有靶向定位释药潜能且可显影的纳米级载体,可为临床乳腺癌化疗及靶向治疗提供新思路。

中国特色反腐倡廉建设体系发展的新趋向

随着我国社会主义市场经济的不断完善与发展，人民生活水平的显著提高，我党在反腐倡廉方面取得了十分重大的进展。特别是在党的十八大召开以来，以习近平总书记为领导的党中央在关于党风廉政建设和反腐败斗争方面提出了很多新思想、新举措，并取得了新的突破。

载替莫唑胺纳米粒联合低强度聚焦超声对人胶质瘤细胞的促凋亡作用

目的制备由聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)包载全氟戊烷(PFP)与化疗药替莫唑胺(TMZ)的液气相变型纳米粒(TMZ/PFP/PLGA NPs),联合低强度聚焦超声(LIFU)辐照,探讨其体外超声显影能力及对人胶质瘤细胞的体外干预效果。方法采用复乳法制备TMZ/PFP/PLGA NPs,检测其基本理化性质及药物包载能力,观察纳米粒体外超声显影效果;CCK-8法检测纳米粒的体外细胞毒性及与LIFU协同干预对胶质瘤细胞存活率的影响;Western blot检测协同干预后细胞内凋亡相关蛋白Bcl-2、bax及caspase-3的表达水平变化。结果在透射电镜下,TMZ/PFP/PLGA NPs呈形态规则的类圆形核壳结构,粒径(137.9±63.31)nm,对TMZ的包封率为(83.01±5.57)%,载药量(3.19±0.22)%;纳米粒与U251细胞共孵育24 h后细胞存活率仍可保持在70%以上,在同时施加LIFU辐照的协同作用下,可使细胞凋亡加速,细胞存活率明显下降;Western blot检测结果显示,协同干预可明显下调细胞内凋亡相关蛋白Bcl-2的表达,同时明显上调bax蛋白与caspase-3蛋白的表达(均P<0.05)。结论TMZ/PFP/PLGA NPs本身具有良好的基本理化性质,在高效包载化疗药物替莫唑胺的同时,具有较低的体外细胞毒性,在LIFU辐照下的协同干预可明显加速U251胶质瘤细胞凋亡,具有良好的应用前景。