通窍活血汤含药脑脊液抑制星形胶质细胞机械性损伤后炎症反应的机制研究

目的探讨通窍活血汤含药脑脊液(TQHXD-CSF)对星形胶质细胞机械性损伤后炎症反应的影响以及其调控IL-33/肿瘤发生抑制蛋白(ST)2信号通路相关机制。方法将体外培养的星形胶质细胞按随机数字表法分为正常组(含20%正常脑脊液)、模型组(含20%正常脑脊液)、TQHXD-CSF组(含20%TQHXD-CSF)和跨膜型ST2(ST2L)中和抗体+TQHXD-CSF组(含20%TQHXD-CSF+5、10、20μg/mL ST2L中和抗体);除正常组外,其余各组均按星形胶质细胞机械性损伤模型构建方法处理细胞。在倒置显微镜下观察细胞形态,四甲基偶氮唑盐法检测细胞活性,ELISA法检测细胞上清液IL-33、ST2L、IL-1β及转化生长因子β1(TGF-β1)水平,Western blot、qRT-PCR法分别检测细胞IL-33、ST2L蛋白及mRNA表达水平。结果与正常组比较,模型组星形胶质细胞出现反应性增生改变,细胞活性及TGF-β1水平均明显降低(均P<0.05),IL-33、ST2L、IL-1β水平以及IL-33、ST2L蛋白及mRNA表达水平均明显升高(均P<0.05);与模型组比较,TQHXD-CSF组细胞形态明显改善,细胞活性及TGF-β1水平均明显升高(均P<0.05),IL-33、ST2L、IL-1β水平以及IL-33、ST2L蛋白及mRNA表达水平均明显降低(均P<0.05)。与TQHXD-CSF组比较,ST2L中和抗体(5、10、20μg/mL)+TQHXD-CSF组IL-1β水平均明显降低(均P<0.05),ST2L中和抗体(10、20μg/mL)+TQHXD-CSF组TGF-β1水平均明显升高(均P<0.05)。结论TQHXD-CSF能够抑制星形胶质细胞机械性损伤后的炎症反应,其作用机制可能与下调IL-33/ST2信号通路有关。

抗血栓药物相关脑出血手术方式的选择分析

目的探讨不同手术方式治疗抗血栓药物相关脑出血的疗效。方法选择2017年1月至2022年1月抗血栓药物相关性脑出血患者52例,依据治疗方案的不同分为开颅手术组(33例)和立体定向组(19例)。比较两组患者手术时间,术后并发症,术后mRS评分等。结果开颅手术组:手术时间(197.91±56.17)min,术后发生颅内感染8例,癫痫10例,出现脑梗死灶5例,术后1个月mRS评分(4.67±0.96)分,术后死亡6例。立体定向组:手术时间(96.05±29.55)min,术后发生颅内感染2例,癫痫2例,出现脑梗死灶1例,术后1月mRS评分(3.52±1.39)分,术后死亡1例。两组手术时间,术后癫痫,术后1个月MRS差异统计学意义(P<0.05)。结论抗血栓药物相关脑出血的患者通常年龄较大,且大都合并有高血压,患者预后较差;选用立体定向手术的患者手术时间短,术后并发颅内感染等并发症少,术后短期预后优于开颅手术患者。

基于网络药理学的白藜芦醇治疗创伤性颅脑损伤的作用机制研究

目的基于网络药理学探讨白藜芦醇治疗创伤性颅脑损伤(TBI)的作用机制。方法检索TCMSP、BATMAN-TCM、SuperPred、PharmMapper、SwissTargetPrediction和Drugbank数据库筛选获得白藜芦醇作用靶点577个,检索TTD、Drugbank、CTD、GeneCards、OMIM和Malacards数据库获得TBI相关靶点1100个,利用UniProt数据库获得交集靶点(即白藜芦醇治疗TBI的作用靶点)165个,构建药物-靶点-疾病网络。采用STRING数据库构建蛋白互作网络(PPI)。采用Metascape数据库进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。采用AutoDockTools 1.5.6、Pymol 2.4.0、DiscoveryStudio 2020软件进行白藜芦醇与核心靶点的分子对接分析。结果165个交集靶点中,PPI排名前10的节点(即核心靶点)包括胰岛素(INS)、胰岛素样生长因子1、肿瘤坏死因子、TP53、白蛋白、白细胞介素(IL)-6、SRC、信号转导和转录活化因子3、血管内皮生长因子A、基质金属蛋白酶(MMP)-9。交集靶点的GO富集分析显示,生物过程主要涉及转移酶活性的正调控、细胞迁移的积极调控、活性氧代谢过程、对受伤的反应、内皮细胞增殖等;分子功能主要涉及激酶结合、蛋白激酶活性、蛋白磷酸酶结合、细胞因子受体结合、蛋白酶结合、转录因子结合等;细胞组分主要涉及膜筏、囊泡腔、突触后膜、树突、内质网腔、细胞间连接等。交集靶点的KEGG富集分析显示,信号通路主要涉及癌症途径、AGEs-RAGE信号通路、FoxO信号通路、补体与凝血级联等。分子对接显示白藜芦醇与IL-6、MMP-9、INS、SRC均有较好的结合活性。分子对接结果显示,白藜芦醇与10个核心靶点成功对接,其中白藜芦醇与IL-6、MMP-9、INS、SRC的对接结合能<-5 kJ/mol。结论白藜芦醇可能通过多靶点、多通路发挥减轻TBI和促进神经功能恢复的治疗作用。

正常成年兔膝关节软骨ADC值和FA值的定量分析

目的分析其表观弥散系数(average diffusion coefficient,ADC值)和部分各向异性指数(fractional anisotropy,FA值)在不同区域的变化。方法选用正常成年新西兰大白兔20只,进行矢状位三维扰相脂肪抑制梯度回波(3D-WATS)序列和矢状位弥散张量成像(DTI)扫描,扫描后图像在工作站测量关节软骨的ADC值和FA值。将胫骨表面软骨参照Tukey HSDa均一子集由前到后分为A、B、C、D、E 5组,分析各组间ADC值和FA值有无差异。结果正常成年新西兰大白兔膝关节胫骨由前到后各组ADC值分别是(0.581±0.373)、(0.863±0.616)、(1.791±0.732)、(1.395±0.654)、(1.463±0.787)×10^(-3) mm^2/s,FA值分别为(0.587±0.212)、(0.462±0.195)、(0.333±0.169)、(0.270±0.169)、(0.347±0.191)。各组间ADC值和FA值的差异有统计学意义(P<0.05)。5组间两两比较,除C组与E组ADC值和FA值的差异均无统计学意义外(P=0.563),其余两组间差异有统计学意义。结论正常成年新西兰大白兔胫骨软骨不同区其ADC值和FA值不同,由前至后ADC值先升高后降低,FA值则先降低后升高。

磁共振技术在关节软骨退行性改变过程中的研究进展

关节软骨是维持正常关节功能的结构之一. 一些列毗邻关节软骨的骨科疾病,如骨关节炎、涉及关节软骨的骨折、 毗邻关节软骨的骨肿瘤刮除术后、股骨头坏死等,常常导致关节软骨的退行性改变,需要观察治疗前后关节软骨的变化及关节软骨成分和结构的变化. 关节软骨退行性改变的早期形态学并无明显的改变,组织病理学上可见关节软骨的退行性变以及骨质增生;关节软骨退行性改变时其内生物化学成分的变化要明显早于其形态学上的变化;关节软骨内无循环和淋巴系统,损伤后修复愈合困难,因此早期诊断干预关节软骨退行性病变,对患者生活质量的提高具有重要意义[1].

新疆地区不同民族骨巨细胞瘤患者中p53、p63和S-100的表达及意义

目的分析新疆地区不同民族间骨巨细胞瘤患者一般资料分布及p53、p63、S-100的表达情况和意义。方法选择骨巨细胞瘤患者病历资料及组织学标本70例,按不同民族进行分组,采用免疫组化方法检测不同分组中p53、p63和S-100表达,对患者一般资料及免疫组化结果分析。结果一般资料中各不同民族间除病理学类型有统计学意义(χ~2=6.115,P=0.047)外,性别、年龄、左右侧、部位均无统计学意义(P>0.05);p53、p63和S-100在骨巨细胞瘤中表达率分别为38.6%、85.7%和10.0%,p53、p63表达在不同民族间比较无统计学意义(P>0.05),S-100汉族表达率25.0%(6/24)明显高于少数民族,维吾尔族患者表达率占2.9%(1/24),其他少数民族患者未见表达,不同民族间存在统计学差异(χ~2=9.703,P=0.008)。结论新疆地区不同民族间骨巨细胞瘤发病性别、年龄、左右侧、部位以及p63、p53表达未见统计学差别,S-100的异常表达在不同民族间存在统计学意义,并且与少数民族多发侵袭性骨巨细胞瘤相关。

巴氏法联合高渗盐水对骨与软组织恶性肿瘤体外灭活研究

目的探讨20%高渗盐水对体外肿瘤细胞的灭活作用及温度、时间效应关系,为临床骨与软组织恶性肿瘤进行自体骨灭活再植保肢手术提供指导。方法选取四肢及骨盆术前活检确诊为骨与软组织恶性肿瘤患者24例,去除4例不符合条件病例,分三组分别在0.9%盐水、20%高渗盐水、巴氏法联合高渗盐水处理(15 min、30 min、45min),采用光镜、透射电镜观察并计算肿瘤细胞灭活率。结果 20%高渗盐水及巴氏法联合法各时间点肿瘤细胞灭活较0.9%等渗盐水存在明显差异,差异有统计学意义(P<0.01);巴氏联合法15min优于20%高渗盐水组(P<0.01)。结论 20%高渗盐水灭瘤作用确切,联合巴氏法或增加灭瘤时间能明显增加肿瘤细胞坏死率,增加灭瘤时间至30min以上灭瘤效果达到最佳。

涤痰汤加味配合穴位埋线治疗颅脑外伤的价值

目的评价涤痰汤加味配合穴位埋线在颅脑外伤患者术后神经、认知、运动功能恢复和改善日常生活能力中的应用效果。方法选择2018年1月—2021年4月杭州市丁桥医院收治的颅脑外伤患者60例,采用随机数表法分为对照组(29例)和观察组(31例)。对照组采用常规药物治疗和康复训练配合穴位埋线。观察组在对照组治疗的基础上予以涤痰汤加味配合治疗,治疗2个月后,使用蒙特利尔认知评估量表(MoCA量表)评估患者的认知功能,采用简易精神状态量表(MMSE)和神经功能缺损程度量表(NIHSS)评价患者的神经功能的恢复程度,使用Fugl-Meyer评定量表(FMA)和Barthel指数(BI)评价患者的肢体运动水平和日常生活能力水平,比较两组中医证候疗效。结果(1)认知功能:治疗后,观察组患者MoCA评分较对照组提高,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)神经功能:治疗后观察组患者MMSE和NIHSS评分较对照组提高,差异具有统计学的意义(P<0.05)。(3)运动功能和日常生活能力:治疗后,观察组患者的FMA和Barthel指数得分均较对照组提高,差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)中医证候疗效:治疗后,两组中医证候治疗有效率分别为93.55%(29/31)和72.41%(21/29),观察组的治疗有效率较对照组明显升高,差异有统计学的意义(P<0.05)。结论涤痰汤加味配合穴位埋线可以改善颅脑损伤患者术后认知功能、神经功能和运动功能,提高患者的中医证候疗效和患者日常生活能力。

骨膜下动脉瘤样骨囊肿的临床特点及外科治疗

目的 探讨骨膜下动脉瘤样骨囊肿的影像学、病理学特点及相关外科治疗。方法 回顾分析笔者医院于2013~2017年期间收住治疗6例经骨科、影像科及病理科共同诊断治疗的骨膜下动脉瘤样骨囊肿患者。男性5例,女性1例,患者年龄18~35岁,平均年龄23.3岁;左侧股骨远端4例,右侧股骨远端2例。1例患者因病变瘤体巨大采用双切口,余患者均采用病变部位正中切口,均采用延病变瘤体基底部完整切除肿瘤、瘤腔灭活术。6例患者均未值骨或用钢板固定。结果 患者X线及CT检查均可见囊状溶骨性改变,病变位于皮质或骨膜下未侵及髓腔,病变部位呈"蜂窝状"改变。MRI可见混杂信号的囊性改变,可见液液平面。本组病例中5例患者术中出血约100ml,1例患者肿瘤巨大术中出血约2000ml,术中无死亡病例,手术时间60~120min,平均90min。患者术后回访均未见复发。结论 骨膜下动脉瘤样骨囊肿是ABC的一种少见类型,临床上罕见。因其未侵及髓腔,故手术时可充分暴露病变部位后,沿瘤体基底部完整剥除病变组织,且术中出血较少,术后复发率较低。

兔关节软骨下骨缺损骨移植后移植骨组织学变化实验研究

目的观察兔关节软骨下骨缺损后行骨水泥+自体骨或骨水泥+同种异体骨修复术后不同时间点移植骨组织学变化情况。方法选取30只成年健康新西兰大白兔,随机分为自体骨和同种异体骨组,每组各15只。模拟临床骨巨细胞瘤病灶刮除术,建立关节软骨下骨缺损动物模型,分别填充不同材料修复骨缺损。自体骨组填充骨水泥+自体骨,同种异体骨组填充骨水泥+同种异体骨,分别于术后4、6、8周取出植入骨。先行大体观察,然后通过HE染色切片观察其组织学变化。两组术后4、6、8周植入骨内成骨细胞和破骨细胞数量比较采用两因素方差分析,组间两两比较采用LSD法。P<0.05为差异有统计学意义。结果术后4周自体骨组植入骨骨小梁开始吸收,植骨周围存在部分新生毛细血管和少量中性粒细胞,移植骨与宿主骨相邻的骨基质内可见少量骨细胞和破骨细胞,骨再生现象形成;同种异体骨组植入骨骨小梁未见明显吸收,植骨区可见肉芽组织,骨再生现象不明显。术后6周自体骨组植入骨骨小梁大部分被吸收,骨基质边缘新生毛细血管和新生成骨细胞增多,移植骨周边可见多核破骨细胞和排列不规则的编织骨,为成骨初期;同种异体骨组植入骨可见散在骨小梁及纤维结缔组织包绕死骨,存在溶骨现象,骨基质边缘可见少量新生毛细血管,破骨细胞及成骨细胞数量极少,无编织骨形成。术后第8周自体骨组植入骨骨小梁被吸收,可见大量新生骨、新生毛细血管和板层骨,骨基质边缘有排列较密集的成骨细胞,编织骨较术后6周时体积变小且排列逐步规整;同种异体骨组植入骨周围可见少量新生毛细血管,部分区域钙盐沉积较明显,少量新生骨小梁形成,其周围可见少量成骨细胞和破骨细胞,部分坏死钙化区内有板成骨形成。同种异体骨组术后第4、6、8周成骨细胞数量及术后第4、8周破骨细胞数量均低于自体骨组(P均<0.05)。自体骨组和同种异体骨组术后第6、8周成骨细胞数量均高于术后第4周(P均<0.05),自体骨组术后第8周成骨细胞数量高于术后第6周(P<0.05)。自体骨组术后第8周破骨细胞数量均高于术后第4、6周(P均<0.05),同种异体骨组术后第6周破骨细胞数量高于术后第4、8周(P均<0.05)。结论关节软骨下骨缺损填充骨水泥+自体骨较填充骨水泥+同种异体骨植入骨区骨融合率高,成骨效能较好,术后不同时间点自体骨成骨细胞和破骨细胞表达较同种异体骨活跃。

膝关节软骨下骨不同表面积缺损对关节软骨组织形态的影响

目的探讨膝关节软骨下骨不同表面积缺损对关节软骨早期组织形态的影响。方法 30只成年大白兔,随机分为A、B、C组各10只,右侧胫骨内侧髁胫骨平台下开骨窗,分别钻取10、15、20mm深度后行软骨下骨刮除术(缺损表面积分别占膝关节软骨面全表面积的50%、75%、近100%),残腔灭活后植入同种异体骨。术后4周,处死动物后取右侧膝关节标本,观察内侧胫骨平台大体形态,行HE染色观察组织学形态变化,行软骨退变病理学Mankin评分,Pearson相关分析各组Mankin评分的相关性。结果 A组关节软骨面接近正常,粉红色,表面平整、光滑;B组软骨表面粗糙,呈灰黄色,滑膜增生较为明显;C组关节面粗糙无光泽,滑膜增生明显,可见明显裂隙、部分软骨面塌陷;B、C组Mankin评分[(5.80±1.48)、(6.00±1.50)分]均高于A组[(1.40±1.07)分](P<0.05),B组与C组Mankin评分比较差异无统计学意义(P>0.05);Pearson相关分析结果显示,A组Mankin评分与B、C组Mankin均呈正相关(r=0.88,P<0.001;r=0.87,P<0.001)。结论软骨下骨缺损表面积≤软骨面全表面积的50%时,关节软骨仅发生轻微退变,超过软骨面全表面积的50%时,软骨在早期阶段就已发生严重退变。