目的探讨脐带延迟结扎及脐带血挤入法对早产儿的影响。方法方便选择2016年11月—2017年11月于该院经阴道分娩的早产儿50例为研究对象。根据断脐方式不同分为两组,观察组25例行脐带延迟结扎或脐血挤入,对照组25例行常规早期结扎脐带法。...目的探讨脐带延迟结扎及脐带血挤入法对早产儿的影响。方法方便选择2016年11月—2017年11月于该院经阴道分娩的早产儿50例为研究对象。根据断脐方式不同分为两组,观察组25例行脐带延迟结扎或脐血挤入,对照组25例行常规早期结扎脐带法。比较两组新生儿出生后血红蛋白、红细胞压积、血糖、碱剩余、胆红素、肌酸激酶同工酶(CKMB)。结果观察组血红蛋白、红细胞压积、血糖水平、碱剩余均高于对照组[(184.44±12.37)g/L vs (152.60±12.87)g/L、(0.559±0.385)%vs (0.459±0.397)%、(3.45±0.66)mmol/L vs (2.99±0.78)mmol/L、(-3.56±2.68)mmol/L vs (-6.50±1.69)mmol/L],差异有统计学意义(t=8.917、9.041、2.237、4.631,P<0.05);对照组胆红素、CKMB水平与观察组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论脐带延迟结扎及脐带血挤入法可有效提高早产儿血红蛋白、红细胞压积、血糖水平,减少早产儿贫血、低血糖的发生,但对高胆红素血症及心肌细胞损伤无明显影响。展开更多
目的探讨miRNA-20a在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的A549细胞焦亡与炎症反应中的作用与调控机制。方法培养人肺泡上皮A549细胞,以LPS为刺激物建立细胞焦亡及炎症反应模型,给予LPS+三磷酸腺苷刺激为LPS组,未给予刺激为空白对照组...目的探讨miRNA-20a在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的A549细胞焦亡与炎症反应中的作用与调控机制。方法培养人肺泡上皮A549细胞,以LPS为刺激物建立细胞焦亡及炎症反应模型,给予LPS+三磷酸腺苷刺激为LPS组,未给予刺激为空白对照组,验证模型是否成功。将A549细胞根据转染物质分为miRNA-20a模拟物(mimics)组、mimics-阴性对照(negative control,NC)组、miRNA-20a抑制物(inhibitor)组和inhibitor-NC组,构建过表达及沉默miRNA-20a的A549细胞模型,各组细胞在转染24 h后给予LPS+三磷酸腺苷刺激。构建TLR4-3'UTR双荧光素酶报告基因载体质粒,包括野生型(WT)载体质粒TLR4-3'UTR-WT1、TLR4-3'UTR-WT2及相应的变异型(MUT)载体质粒TLR4-3'UTR-MUT1、TLR4-3'UTR-MUT2,用双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-20a的靶基因。采用实时荧光定量聚合酶链反应、免疫印迹试验及酶联免疫吸附试验检测各组焦亡标志因子消皮素D(gsdermin D,GSDMD),炎症因子凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β),以及信号分子Toll样受体4(Toll-like receptor-4,TLR4)、核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)mRNA及蛋白表达。免疫荧光检测各组细胞TLR4表达和NF-κB入核情况。结果LPS组A549细胞GSDMD、ASC、NLRP3、Caspase-1、IL-1βmRNA和蛋白表达量均高于空白对照组(P<0.05),模型建立成功。mimics组miRNA-20a表达量高于mimic-NC组(P<0.05),inhibitor组miRNA-20a表达量低于inhibitor-NC组(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验显示,TLR4-3'UTR-WT与miRNA-20a mimics共转染组的相对荧光值低于TLR4-3'UTR-WT与mimics-NC共转染组(P<0.05)。mimics组LPS介导的A549细胞GSDMD、ASC、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、TLR4、NF-κB mRNA和蛋白表达水平均低于mimics-NC组(P<0.05),inhibitor组GSDMD、ASC、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、TLR4、NF-κB mRNA和蛋白表达水平均高于inhibitor-NC组(P<0.05)。结论在LPS诱导的A549细胞焦亡及炎症反应中,miRNA-20a可能经TLR4/NF-κB信号通路对细胞焦亡及炎症反应产生抑制作用。展开更多
文摘目的探讨脐带延迟结扎及脐带血挤入法对早产儿的影响。方法方便选择2016年11月—2017年11月于该院经阴道分娩的早产儿50例为研究对象。根据断脐方式不同分为两组,观察组25例行脐带延迟结扎或脐血挤入,对照组25例行常规早期结扎脐带法。比较两组新生儿出生后血红蛋白、红细胞压积、血糖、碱剩余、胆红素、肌酸激酶同工酶(CKMB)。结果观察组血红蛋白、红细胞压积、血糖水平、碱剩余均高于对照组[(184.44±12.37)g/L vs (152.60±12.87)g/L、(0.559±0.385)%vs (0.459±0.397)%、(3.45±0.66)mmol/L vs (2.99±0.78)mmol/L、(-3.56±2.68)mmol/L vs (-6.50±1.69)mmol/L],差异有统计学意义(t=8.917、9.041、2.237、4.631,P<0.05);对照组胆红素、CKMB水平与观察组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论脐带延迟结扎及脐带血挤入法可有效提高早产儿血红蛋白、红细胞压积、血糖水平,减少早产儿贫血、低血糖的发生,但对高胆红素血症及心肌细胞损伤无明显影响。
文摘目的探讨miRNA-20a在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的A549细胞焦亡与炎症反应中的作用与调控机制。方法培养人肺泡上皮A549细胞,以LPS为刺激物建立细胞焦亡及炎症反应模型,给予LPS+三磷酸腺苷刺激为LPS组,未给予刺激为空白对照组,验证模型是否成功。将A549细胞根据转染物质分为miRNA-20a模拟物(mimics)组、mimics-阴性对照(negative control,NC)组、miRNA-20a抑制物(inhibitor)组和inhibitor-NC组,构建过表达及沉默miRNA-20a的A549细胞模型,各组细胞在转染24 h后给予LPS+三磷酸腺苷刺激。构建TLR4-3'UTR双荧光素酶报告基因载体质粒,包括野生型(WT)载体质粒TLR4-3'UTR-WT1、TLR4-3'UTR-WT2及相应的变异型(MUT)载体质粒TLR4-3'UTR-MUT1、TLR4-3'UTR-MUT2,用双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-20a的靶基因。采用实时荧光定量聚合酶链反应、免疫印迹试验及酶联免疫吸附试验检测各组焦亡标志因子消皮素D(gsdermin D,GSDMD),炎症因子凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β),以及信号分子Toll样受体4(Toll-like receptor-4,TLR4)、核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)mRNA及蛋白表达。免疫荧光检测各组细胞TLR4表达和NF-κB入核情况。结果LPS组A549细胞GSDMD、ASC、NLRP3、Caspase-1、IL-1βmRNA和蛋白表达量均高于空白对照组(P<0.05),模型建立成功。mimics组miRNA-20a表达量高于mimic-NC组(P<0.05),inhibitor组miRNA-20a表达量低于inhibitor-NC组(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验显示,TLR4-3'UTR-WT与miRNA-20a mimics共转染组的相对荧光值低于TLR4-3'UTR-WT与mimics-NC共转染组(P<0.05)。mimics组LPS介导的A549细胞GSDMD、ASC、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、TLR4、NF-κB mRNA和蛋白表达水平均低于mimics-NC组(P<0.05),inhibitor组GSDMD、ASC、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、TLR4、NF-κB mRNA和蛋白表达水平均高于inhibitor-NC组(P<0.05)。结论在LPS诱导的A549细胞焦亡及炎症反应中,miRNA-20a可能经TLR4/NF-κB信号通路对细胞焦亡及炎症反应产生抑制作用。
