基于溶酶体介导巨噬细胞清除活力研究广藿香醇特异性抗幽门螺杆菌作用及其机制

探讨广藿香醇特异性增加巨噬细胞清除幽门螺杆菌Helicobater pylori作用及其机制,为进一步研究广藿香醇治疗H.pylori相关疾病奠定药理学基础。将巨噬细胞RAW264.7和H.pylori按照MOI=100的比例共孵育,同时分别予广藿香醇20,10,5 mg·L^-1干预24 h;应用琼脂稀释法测定巨噬细胞对H.pylori的吞噬率和清除率;荧光显色法观察细胞内溶酶体的稳定性;生化方法检测细胞上清液中NO和MPO的变化情况;RT-q PCR和ELISA法分别检测细胞内IL-6和TNF-α的基因和细胞上清液中蛋白表达变化。与正常组相比,模型组细胞内溶酶体完整性明显下降,细胞上清液中的NO含量、MPO活性、IL-6和TNF-α蛋白表达均显著上升,细胞内IL-6和TNF-α基因表达也明显增加（P〈0.01）。经过广藿香醇治疗之后,巨噬细胞清除细菌的能力明显增强,同时细胞内溶酶体完整性恢复,细胞分泌的NO含量、MPO活性、IL-6和TNF-α蛋白表达均显著下降,细胞内IL-6和TNF-α基因表达也被有效抑制（P〈0.01或P〈0.05）。广藿香醇可以增加巨噬细胞对H.pylori的清除率并且对被感染的细胞表现出抗炎和抗氧化应激的作用,可能与阻断H.pylori逃逸溶酶体结合步骤有关。

综合主成分分析法和皮肤电阻法对几种促透剂促透效果的比较

目的建立一种简单有效的快速评价促透剂透皮吸收促进效果的方法,并比较综合主成分分析法和皮肤电阻法的促透剂评价结果。方法以氨茶碱作为模型药物,氮酮、薄荷醇、冰片、油酸及其联用作为促透剂,SD大鼠背部离体皮肤作为渗透屏障,HPLC测定接收液中的药物浓度,计算累积渗透量、渗透系数、稳态流量、滞后时间和增渗倍数,运用综合主成分分析法对促透效果进行综合评价;测定在促透剂作用下的大鼠皮肤电阻随时间的变化,评价促透剂对皮肤的作用程度。结果用Franz扩散池方法结合综合主成分分析法,得到对氨茶碱有促透效果的促透剂有油酸加冰片以及薄荷醇,且油酸加冰片的促透效果大于薄荷醇;用皮肤电阻法测得有促透作用的是油酸加冰片、薄荷醇加氮酮、薄荷醇、氮酮、油酸、冰片加氮酮以及薄荷醇加冰片,且作用程度依次递减。采用皮肤电阻法评价的促透效果与采用体外透皮吸收试验评价的结果基本平行(r=0.8869)。结论综合主成分分析法和皮肤电阻法都可以客观评价促透剂的效果,且2种方法具有明显的相关性。