恙虫病东方体混合重组抗原应用于胶体金免疫层析试纸条的制备及效价检测

胶体金免疫层析试纸条具有携带方便、操作简单且敏感性、特异性高等特点,近年来开始广泛应用于疾病的诊断。为了实现对恙虫病的快速检测,笔者利用双抗原夹心法,以胶体金标记恙虫病东方体56 kDa混合重组蛋白,56 kDa混合重组蛋白和兔抗恙虫病东方体多克隆抗体分别喷在检测线及质控线上,制备了用于检测恙虫病东方体抗体的胶体金免疫层析试纸条。本研究制备的胶体金试纸条检测限为61 ng/mL,和疟疾、伤寒、血吸虫、出血热以及斑点热等阳性血清无交叉反应,特异性达90%(54/60),检测的敏感性为91.96%(103/112),在4℃下可稳定保存6个月。本试纸条能够应用于人体血清中恙虫病东方体总抗体的检测。

虚拟现实技术在医学实验教学课程中的应用

随着基础医学教学改革的不断深入以及计算机网络技术的不断普及,网络化教学的地位日益重要;其中,利用虚拟现实技术构建的虚拟实验室在医学实验教学课程中起着其他技术手段无法替代的作用,可以促进实验教学课程的教学改革与发展。

动物生物安全三级实验室硬件运行与维护初探

动物生物安全三级实验室(ABSL-3)是目前我国生物防护级别最高实验室。其建设规范要求高,对硬件系统要求极其严格,与之对应的安全文件体系也较为严格和复杂,管理人员不仅需要有微生物学的相关知识,还需要有自动控制、电力管理等多学科的交叉背景。如何为实验人员提供安全、稳定、舒适的实验环境不仅是实验室硬件运行与管理需要探讨的重要内容,同时也是确保安全实验的前提。

浅谈高校实验室生物安全管理

介绍了实验室生物安全的特点及其管理工作的重要性,并对实验室生物安全管理工作的落实与检查进行了分析,指出其可操作性直接关系到实验室安全管理的成效。针对目前高校实验室安全管理现状,有针对性地建立和完善实验室安全管理体系、规章制度和微生物安全操作规范,并在实际工作中严格执行,将实验室生物安全工作的落实和检查不断细化、量化、规范化,使其具有可操作性,可不断提高实验室生物安全管理工作的水平。只有实验室生物安全工作的落实和检查具有切实的可操作性,才能为教学、科研事业的可持续发展提供坚实的保障。

丙型肝炎病毒F蛋白缺失对病毒复制及感染性的影响

探索了F蛋白缺失及核心蛋白(Core)二级结构改变对丙型肝炎病毒(HCV)复制和感染性的影响.利用定点突变方法,将J6JFH1的核心基因引进5个终止密码子以中断F蛋白的表达,从而获得F蛋白缺失的病毒复制子J6JFH1/ΔF.体外制备RNA转录体,并电穿孔转染Huh7.5.1细胞,采用免疫荧光、实时荧光定量PCR方法以及病毒感染等方法,观察F蛋白缺失对病毒复制、蛋白质表达及转染细胞上清感染性病毒颗粒产生的影响.在此基础上,构建5个单一突变病毒体,对HCV核心蛋白进行二级结构分析,观察核心蛋白二级结构对HCV复制和翻译的影响.结果显示,转染48 h后,J6JFH1/ΔF与野生型J6JFH1相比,J6JFH1/ΔF转染阳性细胞数明显降低,细胞内HCV RNA水平降低约95%,J6JFH1/ΔF转染后不同时间点细胞上清中HCV RNA拷贝数和病毒颗粒也明显降低.5个单一突变体不影响核心基因二级结构,病毒在细胞内复制和感染性与野生型水平一致.J6JFH1/ΔF所产生的改变可能是由于5处突变导致核心基因二级结构改变而造成的.结果说明,HCV F蛋白缺失不影响病毒的复制翻译及病毒颗粒的包装释放,核心蛋白二级结构的改变对病毒复制和翻译则产生较大影响.

动物生物安全三级实验室的使用体会

根据生物安全实验室的分级,结合动物生物安全三级实验室的使用体会,阐述生物安全三级实验室的人员准入制度、工作人员行为准则以及突发状况下人员的撤离,对动物生物安全三级实验室的安全使用及管理提供借鉴作用。

含CpG免疫刺激序列的质粒增强HBsAg诱导的免疫应答

目的探讨以含有多拷贝CpG寡脱氧核苷酸(CpG ODN)的质粒作为治疗性乙肝疫苗佐剂的可行性。方法构建含有6个拷贝D型CpG ODN的质粒pKO-CG6,将该质粒以及载体pKO分别刺激健康人及HBV感染者的外周血单核细胞(PBMC),检测PBMC的增殖及分泌的细胞因子IFN-γ、IL-12,进一步将重组HBsAg分别联合这两种质粒免疫小鼠,检测小鼠的细胞和体液免疫应答。结果质粒pKO-CG6与载体pKO在体外均能有效激活健康人及HBV感染者PBMC增殖反应,并促进IFN-γ、IL-12的产生,其中pKO-CG6的免疫刺激活性强于载体pKO。小鼠体内试验表明,虽然载体pKO也具有免疫佐剂作用,但pKO-CG6更能显著增强HBsAg诱导的免疫应答,尤其是细胞免疫应答。结论含有多拷贝D型CpG ODN的质粒能有效激活HBV感染者的PBMC,并增强HBsAg在小鼠体内的免疫原性。

PTEN通过下调自噬活性抑制登革病毒2型感染

为探讨PTEN、细胞白噬与登革病毒2型(DENV-2)感染之间的关系及可能机制,本研究将DENV-2以不同感染复数(MOI)和不同持续时间感染人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),蛋白免疫印迹法检测PTEN表达及指示细胞自噬的LC3型别转换情况;进一步构建pLenti-PTEN和pLenti-shPTEN表达质粒,包装成慢病毒,感染HUVEC以建立稳定表达细胞系,并检测PTEN过表达及敲低对自噬标记尤其是LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、DENV-2 capsid蛋白和mRNA水平及子代病毒颗粒感染性的影响。结果显示,PTEN下调可抑制细胞自噬水平,继而降低DENV-2 capsid蛋白表达和子代病毒颗粒释放,提示DENV-2感染HUVEC发生的PTEN蛋白表达下调很可能是宿主细胞本身的一种针对DENV-2感染的保护性反应。

丙型肝炎病毒高变区1中介导感染的关键氨基酸残基鉴定

丙型肝炎病毒(HCV)包膜E2蛋白氨基端的高变区1(HVR1)由27个氨基酸组成,是HCV蛋白中变异频率最高的肽段。HVR1含中和抗体表位,同时对HCV细胞侵入起重要作用,其结构与功能的关系目前尚不清楚。本研究对H77株包膜蛋白基因中的HVR1进行了一系列缺失突变,然后将突变体表达质粒与假病毒包装质粒共转染人胚肾(HEK)293T细胞,用蛋白免疫印迹法检测细胞中HCV包膜E2蛋白的表达,用荧光定量聚合酶链反应检测培养上清液中的HCV假病毒(HCVpp)含量,以人肝癌细胞Huh7.5为靶细胞检测HCVpp的感染力。结果显示,缺失整个HVR1或HVR1中部分氨基酸残基对HCV包膜蛋白表达及HCVpp产量均无明显影响,但对HCVpp感染力产生不同影响。缺失第16～24位氨基酸残基导致HCVpp感染力增强,缺失第1～8位或1～12位氨基酸残基仅部分降低HCVpp感染力,缺失第13～15位和25～27位中的任意一个氨基酸残基均导致HCVpp感染力低于原型的5%。结果提示,HVR1中第13～15位和25～27位的6个氨基酸是介导HCV感染的关键氨基酸残基。

我国食品工程的安全保障与监督管理

食品安全问题直接关系人们的身体健康以及生命安危,因此要全面加强对我国食品工程的安全保障与监督管理工作,才能够保证食品质量。本文主要围绕我国食品工程的安全保障与监督管理展开分析和论述,首先介绍食品工程的概念,然后分析当下食品工程安全管理工作存在的问题和不足,最后提出做好食品工程安全保障与监督管理工作的有效举措。

探讨网络食品经营存在的问题及监管对策

电子商务是网络时代的新兴产物,对经济有着重要的促进作用。但是各种不法现象也随之出现,使网购食品的质量得不到保证。网络食品经营者为了牟取暴利,通常非法添加一些有害成分、夸大宣传产品甚至以次充好,这都是欺骗消费者的不良行为。当消费者碰到网购食品质量有问题时,往往无地投诉,消费者的相关权利也得不到维护,这也是当今社会网络购物的一个难点。本文从法律法规的角度对网络食品经营者的经营现状以及销售问题食品的危害性进行深入分析,食品药品监管部门也针对这些问题提出了相应的解决方案。

互联网食品安全监管的现状、困境与优化对策

食品安全责任重于泰山,尤其是在互联网的背景之下,必须要做好互联网食品的安全监管工作,维护人们的生命健康和安全。本文主要围绕互联网食品安全监管的现状、困境与优化对策展开分析和论述,首先介绍互联网食品安全监管的现状以及存在的困境,然后分析推进互联网食品安全监管的优化对策。

我国食品安全监管存在问题探析

最近几年,我国出现了多次严重的食品安全问题,造成了很大的社会影响。这些问题暴露了我国食品安全监管中存在的不足,需要对其进行整改和优化。对此,本文简析了我国食品安全监管标准,并分析了我国食品安全监管模式,指出食品安全监管中的问题,并针对问题提出了优化措施,旨在为保障国家食品安全提供参考。

智能运动管家 穿戴式运动追踪器大集合

近来可穿戴设备的风暴越刮越猛，今年可谓可穿戴设备的爆发年，先后涌现出了Jawbone UP2、GEAKWatch等杰出代表。为了迎合现代人关注身体健康的心理，这类产品中很多都具有运动追踪功能。现在，就让我们一起来盘点一下吧!