狂犬病口服疫苗在实际储运和环境释放中的消减规律研究

为探索冻干剂、咀嚼剂和喷剂三种剂型的rAd5-ΔE1/E3-CGS狂犬病口服疫苗在运输、保存、反复冻融及不同温度下投放时疫苗效价的消减规律,将三种剂型的疫苗经过2~8℃运输48 h,重新入库的疫苗分别-20℃保存1年和反复冻融5次,再将冻融后疫苗分别于2~8℃保存4个月、15℃放置1个月、25℃放置1周和37℃放置3 d,于不同时间点取样检测疫苗效价(lgTCID 50/头份)。结果显示,三种口服疫苗经过2~8℃运输48 h后,效价分别下降至6.25、5.75和6.25,再经过-20℃保存1年和反复冻融5次后效价分别下降至5.67、5.33、5.33和5.33、5.00、5.67。在2~8℃保存4个月后,三种剂型口服疫苗效价均能达到5.00以上;在15℃放置1个月、25℃放置1周以及在37℃放置3 d后,疫苗效价最低分别为3.75、2.50和1.00。研究表明,三种剂型口服疫苗在冷链运输、冷冻保存、反复冻融和低温环境释放条件下具有良好的稳定性,常温环境对咀嚼剂的稳定性影响较小,高温环境会严重降低口服疫苗效价,建议在气温不高于15℃条件下进行rAd5-ΔE1/E3-CGS的环境释放。本研究为狂犬病口服疫苗的野外释放提供了数据支撑,也为流浪动物和野生动物的狂犬病疫苗口服免疫提供了技术支持。

2021年上海市浦东新区犬狂犬病免疫抗体和风险因素横断面调查

为了掌握上海市浦东新区2021年犬狂犬病免疫抗体水平,分析影响免疫抗体水平的风险因素,本研究开展横断面调查,使用狂犬病毒抗体ELISA检测试剂盒,对随机抽取的325份犬血清样品进行检测,并结合调查问卷,通过单因素分析和多变量Logistic回归分析,建立影响犬狂犬病免疫抗体水平的风险模型。血清学检测结果显示,浦东新区2021年犬狂犬病免疫抗体合格率达91.08%(95%CI:87.98%~94.18%)。单因素分析和回归分析结果显示,犬主人未接受狂犬病相关培训以及所在街镇无村级防疫员可能是影响该病免疫抗体合格率的风险因素(P<0.05)。本调查为浦东新区犬狂犬病的免疫、监测和防控提供基础数据。

犬癌胚抗原免疫梳检测方法的建立

为建立一种犬癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)免疫梳检测方法,将包被鼠抗CEA捕获抗体固定于硝酸纤维膜(nitrocellulose filter membrane,NC膜)上,筛选出合适的包被液、包被温度、封闭液、封闭条件、辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)标记抗体反应条件等,制备免疫梳。对建立的犬癌胚抗原免疫梳检测方法进行敏感性、特异性、重复性和稳定性实验,并采用化学发光法和所建立的免疫梳检测方法对10份患恶性乳腺肿瘤病犬只的血清样品进行检测。优化条件:CEA捕获抗体质量浓度为100μg/mL,HRP标记抗体按1∶400(体积比)稀释,包被液为碳酸盐缓冲液(pH 9.6),包被温度为37℃,封闭液为3%BSA-PBS[含3%(质量分数)牛血清白蛋白的磷酸盐缓冲液(pH 7.4)],封闭条件为4℃过夜,HRP标记抗体反应条件为37℃孵育1 h。建立的犬癌胚抗原免疫梳检测方法中CEA最低检出限为5 ng/mL,同时肿瘤标志物角蛋白8抗原、甲胎蛋白和前列腺抗原的检测结果均为阴性,重复性和稳定性良好;临床血清样品的免疫梳检测结果与化学发光法检测结果一致。研究结果表明:所建立的犬癌胚抗原免疫梳检测方法,可用于犬肿瘤疾病的初步诊断。

上海地区犬类主要疫病血清学调查

为了解2016年本市犬类主要疫病免疫抗体水平和感染情况,收集上海地区16个犬类免疫点的486份犬血清,运用酶联免疫吸附试验(ELISA)开展了4种犬类主要疫病(犬瘟热、犬细小病毒病、犬流感、狂犬病)的免疫抗体和感染抗体检测,并按照年龄、体型、品种进行了区分。检测结果:狂犬病、犬瘟热和犬细小的免疫抗体合格率分别为72.02%、56.30%和90.16%,犬流感感染抗体阳性率为8.02%;年龄和体型会导致抗体水平的部分差异;非纯种犬较纯种犬的抗体水平高。

犬真菌性皮肤病的诊断及各方法的疗效观察

本课题应用伍氏灯法以及刮片镜检来诊断真菌性皮肤病,并选用ZBPZ药物的方法对犬进行真菌性的治疗,同时把48条犬分为A、B、C、D 4组,A组12条犬内服Z(真维宁)、B(保肤康软胶囊),外用P(皮康舒)、Z(真菌克星)药物综合使用;B组12条犬使用内服ZB 2种药;C组12条犬外用PZ 2种药;D组12条犬为对照组,不用药正常饲喂。治疗3周,治疗前、治疗后和每个疗程结束时用伍氏灯检查。结果表明,A组ZBPZ药物综合用药治愈率90%,而B组60%,C组为45%。结果表明用ZBPZ法治疗犬真菌性皮肤病,疗效显著,犬的治愈率高。

2017年度上海地区犬类主要疫病血清学调查分析

为了解本市犬类主要疫病免疫抗体水平及感染情况,收集上海地区14个犬类免疫点的422份犬血清,运用酶联免疫吸附试验(ELISA)开展了5种犬类主要疫病(犬瘟热、犬细小病毒病、犬流感、犬副流感、狂犬病)的抗体检测,并按照性别、年龄、体型、品种进行了分类。经检测,狂犬病、犬瘟热IgG和犬细小IgG的抗体阳性率分别为93.36%、65.30%和93.42%,犬瘟热IgM和犬细小IgM的抗体阳性率分别为81.12%和1.64%,犬流感、犬副流感抗体阳性率分别为7.99%和16.88%;年龄、体型和品种会导致抗体水平的部分差异。本地区犬类重要疫病免疫情况较好,发生疫病的风险整体偏低。

犬第三眼睑增生切除法与包埋法治疗效果的比较

犬第三眼睑增生是由于腺体肥大等原因与瞬膜一起从眼内向外翻转而发生炎症的一种眼病,多采用切除法与包埋法进行治疗。为研究犬第三眼睑增生切除法与包埋法的利弊,本试验将20只双眼患第三眼睑增生且不患其他疾病的犬分为切除组和包埋组,进行手术并跟踪观察比较治疗效果。结果显示,切除法具有手术简便、恢复时间短等优势,但患犬治愈后会有干眼病等后遗症发生,对犬的健康有极大危害;而包埋法虽然手术复杂,恢复时间较长,但只要能熟练的操作也能达到治愈效果,且对患犬不会产生其他不良影响。结果表明,虽然2种手法各有利弊,但切除法的弊大于利,后遗症会带给犬更多的不便;而包埋法的利大于弊,只要能熟练掌握手术方法,做好术后的护理,就可以克服弊端。建议在今后的临床中应尽量的建议前来就诊的畜主使用包埋法对第三眼睑增生进行治疗。

上海地区农村犬对农村环境影响的调研

农村伴侣犬对当地的人文、环境都有一定的影响。调研显示,存在农村养犬量大、犬屋差异大、犬粪及病死犬处理意识淡薄等问题。在此基础上,提出了配套建设规范犬屋、贯彻养犬管理条例、加强对病死犬无害化处理的宣传等改善措施。

犬癌胚抗原免疫梳检测方法效果评价

通过对临床收集的80份犬血清分别进行化学发光法和免疫梳检测,对实验室研发的犬癌胚抗原免疫梳检测方法进行效果评价。结果说明该方法未产生非特异性结合,且与化学发光法的敏感度相近,有进一步研发推广的价值。

2011-2020年上海地区犬只狂犬病本底状况回顾性分析

目的为掌握上海市犬只狂犬病免疫状况、抗体水平和流行情况,评估犬只狂犬病流行风险。方法利用统计学方法对上海市2011-2020年犬只狂犬病血清学和病原学检测数据进行回顾性分析。结果上海市注册犬只狂犬病免疫抗体平均合格率为83.8%(95%CI:83.3%~84.3%),流浪犬抗体平均合格率为17.7%(95%CI:15.8%~19.6%),一犬伤多人事件(伤人数≥2)犬只狂犬病病毒阳性率高达94.1%;从时间、空间和群间分布情况看,各年份、各区、各监测场点犬只狂犬病抗体水平存在一定的差异性;流浪犬与城镇犬、示范村农村犬、养殖场犬等不同类型犬只之间的抗体水平差异有统计学意义(P<0.01)。结论上海市注册犬只狂犬病免疫措施扎实,效果确实;上海属于狂犬病的自然疫源地,流浪犬未构筑有效免疫屏障,不足以阻断病毒在群内的传播,是当前上海狂犬病流行的最大风险点,建议进一步强化流浪犬的免疫研究和收容管理。

犬传染性肝炎的病理学观察

为观察犬感染传染性肝炎后各器官的病理变化。采集均来自患传染性肝炎(犬腺病毒Ⅰ型)ICH试纸检测阳性的患犬,通过制作病理切片、镜下观察并分析其病理变化。从病理切片中看到肝窦扩张,淤血明显,肝索紊乱,肝细胞部分稍显浊肿,可见少许双核肝细胞,胆汁浸入小胆管上皮;胆囊黏膜出血、水肿,胆囊壁明显增厚;小肠固有膜水肿,黏膜浅层自溶坏死;肾脏淤血、出血,近曲小管部分浊肿,远曲小管水肿,肾小球增大,毛细血管袢充血;淋巴结结构正常,血管纤维增生,大量浆细胞、嗜酸性粒细胞浸润,可见吞噬含铁血黄素组织细胞散在。其中肝脏、胆囊变化最为明显。表明犬传染性肝炎主要侵袭患犬的肝胆、消化系统及免疫系统,为病理学研究和治疗的侧重点提供理论依据。

上海市狂犬病调查与分析

为了解上海市人间和畜间狂犬病流行状况以及犬免疫情况,探查感染来源和防控漏洞,采用摸底调查和数据分析方法开展调查,并分析流行原因。调查显示,自2009年以来,上海市几乎每年都有人间狂犬病病例出现;2019年5—6月发生的3起犬咬伤事件中,有2起确定感染来源为流浪犬;2011—2018年上海市免疫犬的狂犬病免疫合格率一直保持在75%以上,但2019年1—5月流浪犬猫的抗体阳性率仅为11.32%,远低70%的国际要求。结果表明,上海市流浪犬中存在狂犬病流行,并导致了人的发病死亡,它是上海市狂犬病流行的主要风险源。因此,要加强流浪犬的管理、监测和免疫,降低流浪犬的数量,提高流浪犬的免疫密度和免疫质量;加强防控技术培训和防治知识宣传,提高公众防范意识;完善相关法规,进一步明确相关部门的工作职责。本调查探明了上海市狂犬病流行的主要原因,并提出了可行性建议,为上海市控制和消灭狂犬病提供了参考。

上海市门诊宠物猫和动物园流浪猫的猫疱疹病毒1型中和抗体检测

为了解临床中猫疱疹病毒1型(FHV-1)疫苗的免疫效果和流浪猫的FHV-1感染状况,利用临床分离株建立了FHV-1中和抗体检测方法,并对20份宠物门诊FHV-1免疫猫血清和10份未免疫的动物园流浪猫血清进行中和抗体检测。结果显示,免疫宠物猫和未免疫流浪猫的抗体阳性率均为60%。结果表明,上海市FHV-1疫苗免疫效果不佳,未免疫流浪猫FHV-1感染较严重。结果提示,需加强猫科动物的FHV-1免疫抗体监测,及时补免,同时加强流浪猫的管理、收容、免疫和监测。本研究为防控猫科动物FHV-1感染提供了参考。

犬瘟热病毒SH202003株全基因组序列分析

为了解上海地区犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)遗传变异情况,本研究采用首尾重叠的11对特异性引物,对CDV上海株SH202003进行RT-PCR扩增,将扩增片段进行反复测序,序列拼接后最终获得了SH202003株全基因组序列,应用Lasergene 7.0和Mega 6.0软件对全基因及H基因进行序列分析,并构建系统进化树。结果显示,SH202003株基因组全长为15690 bp,编码6种结构蛋白(N、P、M、F、H和L),H和L基因间隔序列为CUA,L和5′端尾随序列为CAA,与Hebei株核苷酸和氨基酸相似性最高,达到98.6%和96.6%,与疫苗株核苷酸相似性在92.2%~94.3%,氨基酸相似性只有82.7%~87.0%;全基因进化树中,SH202003株与流行野毒株在同一分支,与疫苗株在不同的分支;H基因同样与Hebei株亲缘关系最近,核苷酸和氨基酸相似性分别为98.7%和99.5%,与疫苗株Snyder Hill、CDV3、Convac及Onderstepoort亲缘关系较远;SH202003株处于Asia-1型分支,属于Asia-1型强毒株;SH202003株具有9个潜在N-糖基化位点,与强毒株Hebei株一致。研究表明,上海株SH202003属于CDV强毒株,为Asia-1型,其H基因序列相对保守,具有9个潜在N-糖基化位点,但是全基因序列存在较多突变,与疫苗株的匹配度较差,可能是免疫犬依然发生犬瘟热的主要原因。

上海市社区流浪猫TNR试点分析

为积累城市流浪猫管理经验,做好流浪猫人兽共患病监测预警,2019年2—5月,上海市动物疫病预防控制中心实施了流浪猫TNR试点工作。通过制定方案、招募志愿者、问卷调查、实施流浪猫TNR和满意度调查等方式,摸清该小区犬猫数量;对捕获的38只流浪猫实施绝育手术和人兽共患病检测,进行标记后放归;满意度调查结果显示,该小区流浪猫数量激增和叫声扰民现象有效缓解,小区环境卫生状况明显改善;实践发现流浪猫TNR全面推广和全覆盖捕获难度较大,存在一定的手术风险等问题,由此提出加大经费支持和宣传引导,强化志愿者培训和个人防护,加强流浪猫TNR配套技术研究和保障能力等建议。

牛病毒性腹泻-黏膜病研究进展

本文从病毒的基因分型、流行状况和诊断方法等几个方面介绍了我国牛病毒性腹泻-黏膜病的研究进展情况,并根据发达国家的防控经验,提出了针对我国牛病毒性腹泻/黏膜病的防控策略。

禽白血病净化检测中不同样品应用的比较

为研究泄殖腔棉拭子、胎粪、血浆、精液、蛋清等不同检测样品在种鸡场禽白血病净化实施中的适用性和差异,将不同类型样品的禽白血病病毒p27抗原ELISA检测结果进行分组比对:一是将泄殖腔棉拭子与其他样品比对;二是以血浆病毒分离检测结果为基准,将血浆与蛋清、精液样品比对;三是将蛋清与胎粪样品比对。结果显示,泄殖腔棉拭子样品阳性率偏高,各类样品间检测结果均存在显著或极显著差异,无法相互替代。结果表明,不建议泄殖腔棉拭子样品用于禽白血病净化监测;为提高净化效率,血浆、精液、蛋清和胎粪样品应在净化检测中联合应用。

核桃青皮提取物对犬脓皮病治疗效果观察

对云南农业大学动物医院门诊收治的患脓皮病犬进行病原菌的分离鉴定,分别用临床常用治疗脓皮病药物林可霉素和不同浓度核桃青皮提取物为研究对象,评价其对分离菌的抑(杀)菌效果。试验结果表明,昆明地区犬脓皮病的主要病原菌为金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌以及大肠杆菌,以三重感染为主。临床试验疗效显示,林可霉素对照组临床治愈率为70%,显效率为10%,其中有10%患犬显效后复发,总有效率为80%,30 d后在未治愈的患犬病变组织中分离到病原菌,林可霉素对脓皮病各病原菌的抑菌圈在治疗后均明显减小。核桃青皮提取物的抑菌效力和治疗效果与浓度成正比,治疗后在未治愈的患犬组织分离鉴定到病原菌,药敏试验抑菌圈直径在用药前后无明显变化。实验结果表明,林可霉素治疗犬脓皮病效果较好,但病原菌易对其产生耐药性;核桃青皮提取物治疗组患犬在整个治疗期间都获得了不同程度的康复,使用高浓度核桃青皮粗提取物治疗后病原菌无耐药性产生,且治疗有效率达到100%。

糖适康配合胰岛素治疗小型犬糖尿病的疗效与临床观察

本试验针对糖适康配合胰岛素治疗犬糖尿病与单纯使用胰岛素治疗糖尿病的疗效效果进行观察。挑选20只典型糖尿病小型犬,其中10只用于糖适康配合胰岛素治疗(试验1);另外10只单纯用胰岛素治疗做对照试验(试验2)。其结果为糖适康配合胰岛素治疗小型犬糖尿病比单使用胰岛素治疗的效果要好。

猫口腔炎的细菌分离鉴定

通过采样拭子采集患口腔炎的猫口腔黏膜、舌头、牙龈分泌物样本,分离到23株菌,经致病性试验证实有3种菌具有致病性。根据形态、生长特性和生化特性,11株被鉴定为葡萄球菌,9株被鉴定为链球菌,3株被鉴定为巴氏杆菌;从5只健康猫样本中分离到大肠杆菌5株。细菌分离结果表明,大肠杆菌为常在非致病菌,葡萄球菌、链球菌及巴氏杆菌为致病菌。药敏试验结果表明,分离的3种致病菌对头孢噻肟高度敏感。因此临床上治疗应首选头孢类抗生素。