高效液相色谱同时测定3类食品中的5种罂粟壳生物碱

建立了同时检测3类食品中吗啡、可待因、蒂巴因、罂粟碱、那可汀5种罂粟壳生物碱含量的高效液相色谱法。试样经无水乙醇超声提取,Waters-C18(4.6 mm×250 mm,0.5μm)柱分离,以甲醇-0.01 mol.L-1磷酸盐为流动相梯度洗脱,通过紫外检测器进行检测。5种罂粟壳生物碱的质量浓度在10～600 mg.L-1范围内与其峰面积呈良好线性,相关系数(r)不低于0.999 6,检出限为0.1～0.6 mg.kg-1。分别对熟食类、调料类、卤汤类样品进行高、低2个水平的加标回收实验,平均回收率为88%～108%,相对标准偏差(n=6)为0.77%～10.7%。该方法操作简单,具有较高的准确度和精密度,适用于食品中5种罂粟壳生物碱含量的检测。

基于Hippo信号通路的野黄芩苷抗结直肠癌HCT116细胞的研究

本文旨在探究野黄芩苷(scutellarin,SCU)对人结直肠癌HCT116细胞的作用及机制。不同浓度SCU处理人结直肠癌HCT116细胞,采用显微镜观察法、MTT法、平板克隆形成试验、细胞划痕试验、Hoechst 33342/PI双染法、流式细胞术、qRT-PCR以及Western blot等多种手段进行检测。结果显示,SCU能明显改变HCT116细胞形态,降低细胞活力;抑制HCT116细胞克隆和迁移(P<0.01);诱导细胞核致密浓染,促进细胞凋亡,使细胞凋亡率显著增加(P<0.05或P<0.01)。机制研究结果表明,SCU能显著上调caspase-9、caspase-3的mRNA表达水平(P<0.01),下调Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平(P<0.01),上调Bax的mRNA和蛋白表达水平(P<0.01)。此外,SCU能明显升高MST1、LATS1的mRNA和蛋白表达量(P<0.05或P<0.01),升高p-YAP(Ser127)的蛋白表达量(P<0.05或P<0.01),降低YAP1、TAZ和下游靶点c-Myc的mRNA和蛋白表达量(P<0.05或P<0.01)。综上所述,SCU能通过调节Hippo信号通路的活性,抑制HCT116细胞的增殖和迁移,并诱导细胞凋亡,从而发挥抗结直肠癌的作用。

气相色谱法分析炸鸡油中脂肪酸及反式脂肪酸

应用毛细管气相色谱法对源自肯德基的生熟炸鸡油进行了脂肪酸及反式脂肪酸定性、定量分析,结果表明:肯德基炸鸡油选用棕榈油,脂肪酸组分主要有棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸,且含有反式亚油酸、亚麻酸约1%,熟油则比生油含更多的反式脂肪酸,表明煎炸过程中会产生少量反式脂肪酸。

深基坑顺向岩层高边坡的支护施工

在顺向岩层的高基坑边坡支护工程中，采用预应力锚索结合土钉墙和挂网喷浆，取得了良好的工程效果。

开展行为观察,关注外来幼儿的社会性发展——在角色游戏中促进外来幼儿社会性发展的实践与研究

在我园＂幼儿社会性行为发展评价＂中发现,外来幼儿在遵守社会规则、生活习惯、社会认知、同伴关系、无侵犯性、同情助人维度上外来幼儿发展较差。为此,幼儿教师应着重开展行为观察,关注外来幼儿的社会性发展,以有效地发挥角色游戏的社会化作用,帮助外来幼儿在角色游戏中提高社会性协作能力。

现浇混凝土免拆模板外墙保温系统施工技术的应用

在加速推动绿色低碳发展,构建节约型社会的背景下。随着国家建筑节能目标的提高和技术创新水平的不断提升,建筑节能与结构一体化已成为建筑围护结构节能的又一创新技术发展方向。为了实现绿色环保的发展理念以及国家节能环保的相关政策,开创了免拆模板这一新工艺、新技术。传统外墙保温系统存在一个通病,即保温系统易脱落、渗水、燃烧等,而现浇混凝土免拆模板外墙保温系统的诞生则实现了保温与建筑同生命周期。本项目采用了现浇混凝土免拆模板外墙保温系统,形成了一套较为成熟的施工流程,本文对现浇混凝土免拆模板外墙保温系统的施工条件和施工方法进行了阐述,并对其应用优点进行了论述,以供参考。

基于Hedgehog信号通路探析白头翁汤抗结直肠癌HCT116细胞机制

目的:探讨白头翁汤水煎液通过调控经典Hedgehog(Hh)信号通路诱导人结直肠癌细胞HCT116凋亡的作用及其机制。方法:用白头翁汤(25、50、100、200、500、750、1000 mg·L^(-1))处理HCT116细胞24 h,然后用噻唑蓝(MTT)比色法检测白头翁汤对细胞增殖的影响;分别设置空白组、白头翁汤组(125、250、500 mg·L^(-1))和五氟尿嘧啶(5-FU)组(40 mmol·L^(-1)),显微镜观察细胞给药前后形态变化;划痕实验检测白头翁汤对细胞迁移的影响;Hoechest 33324/碘化丙锭(PI)染色法评价白头翁汤对细胞凋亡的影响;流式细胞术检测白头翁汤对HCT116细胞凋亡的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞凋亡相关B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平及Hh信号通路关键因子音猬因子(SHh)、GLI家族锌指蛋白1(Gli1)、G蛋白偶联受体蛋白Smoothened(Smo)、苏氨酸蛋白激酶Fused抑制因子(SuFu)、c-核蛋白类基因(c-Myc)蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2和Hh通路相关基因SHh、Gli1、Smo、SuFu、c-Myc mRNA表达水平。结果:与空白组比较,白头翁汤组(125、250、500 mg·L^(-1))HCT116细胞形态发生明显改变,细胞变圆,其增殖被抑制,且呈浓度依赖性,迁移能力下降(P<0.05,P<0.01),细胞核出现致密浓染,凋亡数量增加。与空白组比较,白头翁汤(500 mg·L^(-1))处理HCT116细胞24 h,Bax蛋白和mRNA表达水平升高(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白和mRNA表达水平降低(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,白头翁汤组(500 mg·L^(-1))处理24 h后,Hh信号通路关键因子SHh、Gli1、Smo、c-Myc的mRNA和蛋白水平表达降低(P<0.05,P<0.01),Hh信号通路负调控因子SuFu表达水平升高(P<0.05,P<0.01)。结论:白头翁汤通过降低Hh信号通路活性来抑制结直肠癌细胞HCT116增殖和迁移,诱导癌细胞凋亡。

白藜芦醇通过调控Notch信号通路诱导结直肠癌HCT116细胞凋亡的研究

目的:基于Notch信号通路探究白藜芦醇抑制人结直肠癌HCT116细胞增殖和诱导凋亡的作用和机制。方法:MTT法检测白藜芦醇对HCT116细胞增殖的影响;显微镜观察白藜芦醇对HCT116细胞形态的影响;细胞划痕实验检测白藜芦醇对HCT116细胞迁移能力的影响;Hoechst 33342/PI染色法和流式细胞术检测白藜芦醇对HCT116细胞凋亡的影响;Real-time PCR法检测白藜芦醇对细胞凋亡相关因子B淋巴细胞瘤-2(Bcl2)、Bcl2关联X蛋白(Bax)以及Notch信号通路相关因子缺口蛋白1(Notch1)、齿状蛋白1(Jagged1)、多毛增强子1(Hes1)、原癌基因蛋白(Cmyc)mRNA表达的影响;Western blot法检测白藜芦醇对细胞凋亡相关蛋白BCL-2、BAX以及Notch信号通路相关蛋白Notch1、Jagged1、缺口胞内域1(NICD1)、HES1、CMYC表达的影响。结果:与模型对照组相比,白藜芦醇80μg/mL~160μg/mL时间剂量依赖性地抑制HCT116细胞增殖(P<0.01),7.5、15、30μg/mL白藜芦醇干预改变HCT116细胞形态,明显降低其迁移能力(P<0.05或P<0.01),细胞Hoechst荧光强度从51.45±6.20增加到79.54±6.60(P<0.05),细胞总体凋亡率从(9.14±0.80)%增加到(64.74±3.36)%(P<0.01),此外促凋亡因子Bax mRNA和蛋白表达显著上调(P<0.01),抑凋亡因子Bcl2 mRNA和蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01),Notch信号通路中Notch1、Jagged1、NICD1、Hes1、Cmyc mRNA和蛋白表达显著下调,NICD1蛋白表达下调(P<0.05或P<0.01)。结论:白藜芦醇能够抑制HCT116细胞增殖、迁移,并诱导细胞发生凋亡,其机制可能与抑制Notch信号通路激活相关。

框架结构竖向及水平构件穿插高效施工方法研究

在现代建筑工程施工中框架结构体系整体施工质量对相应的施工效果有较大影响,随着建筑行业不断发展,应做好施工技术的创新深化。如今厂房普遍存在层高高、工期紧、单层建筑面积大等特点,传统的柱模板散拼、梁柱混凝土一起浇筑、采用普通钢管脚手架支撑的施工方法施工周期较长、模板周转率较低,针对此种现状,采用盘扣式支撑架,柱模板集中整拼、整块吊运、安装,框架结构竖向及水平构件分开浇筑、穿插施工的方式,提高大模板支撑体系安全系数,缩短了流水段施工工期,有效保证柱子混凝土成型质量。基于此背景下,文章针对框架结构竖向及水平构件穿插高效施工方法的施工管理描述,提出对穿插施工的要求,做好工程整体设计和具体施工内容安排,加强工程施工全过程的管控。

吴茱萸碱通过调控Hedgehog信号通路诱导结直肠癌HCT-116细胞凋亡的研究

目的:基于Hedgehog信号通路研究吴茱萸碱抑制人结直肠癌HCT-116细胞增殖和诱导凋亡的作用及机制。方法:采用MTT法检测吴茱萸碱对HCT-116细胞和人正常结肠上皮NCM-460细胞增殖的影响;显微镜观察吴茱萸碱对HCT-116细胞形态的影响;结晶紫染色考察吴茱萸碱对HCT-116细胞克隆形成能力的影响;细胞划痕试验检测吴茱萸碱对细胞水平迁移的影响;Hoechest33324/PI染色观察吴茱萸碱对HCT-116细胞凋亡的影响;试剂盒检测吴茱萸碱对HCT-116细胞凋亡相关因子Caspase-9和Caspase-3活性的影响;蛋白免疫印迹试验(Western blotting)检测吴茱萸碱对细胞凋亡相关蛋白BAX、BCL-2、细胞周期相关蛋白Cyclin D1以及Hedgehog信号通路相关蛋白SHH、Gli1、SMO、c-Myc表达的影响;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测吴茱萸碱对细胞凋亡相关因子Bax、Bcl-2、Cyclin D1以及Hedgehog信号通路相关因子Shh、Gli1、Smo、c-Myc mRNA表达的影响。结果:吴茱萸碱抑制HCT-116细胞的增殖且在高剂量和长时间给药情况下对人正常结肠上皮NCM-460细胞产生一定的抑制效应。此外,HCT-116细胞经吴茱萸碱5、10、20μmol/L干预后形态发生改变,细胞水平迁移能力和克隆形成能力显著下降,染色质固缩,细胞核呈致密浓染,Caspase-9和Caspase-3活性升高(P<0.01);吴茱萸碱10、20μmol/L作用HCT-116细胞48 h后,Bax mRNA和蛋白表达随吴茱萸碱浓度增高而上调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01);吴茱萸10、20μmol/L碱诱导了周期调节因子Cyclin D1 mRNA和蛋白的下调(P<0.01);Hedgehog信号通路中的关键因子Shh、Gli1、Smo、c-Myc mRNA和蛋白表达也在吴茱萸碱干预后显著下降(P<0.05或P<0.01)。结论:吴茱萸碱抑制HCT-116细胞的生长、增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能涉及抑制Hedgehog信号通路的激活。