目的:巨噬细胞具有炎症趋化能力,近年来巨噬细胞膜伪装的纳米递送载体引起研究者的广泛关注。本文提供了一种巨噬细胞膜伪装纳米颗粒的方法,即摄取-挤出法,并对该法制得的纳米颗粒进行表征,考察纳米颗粒在不同细胞中的摄取。方法:利用溶...目的:巨噬细胞具有炎症趋化能力,近年来巨噬细胞膜伪装的纳米递送载体引起研究者的广泛关注。本文提供了一种巨噬细胞膜伪装纳米颗粒的方法,即摄取-挤出法,并对该法制得的纳米颗粒进行表征,考察纳米颗粒在不同细胞中的摄取。方法:利用溶胶-凝胶法制备装载阿霉素的介孔硅(DMSN)纳米颗粒,再利用RAW 264.7巨噬细胞吞噬DMSN,最后将巨噬细胞连续挤出制得巨噬细胞膜伪装的载有阿霉素的介孔硅(DMSN@CM)纳米颗粒。动态光散射激光粒度仪(DLS)测定DMSN@CM颗粒的粒径和表面电位,透射电子显微镜(TEM)观察纳米颗粒形态,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)验证细胞膜的成功伪装。然后通过激光共聚焦显微镜与流式细胞术共同考察了DMSN@CM在不同细胞中的摄取情况。结果:成功制备了DMSN和DMSN@CM纳米颗粒。DMSN粒径为116.7±3.2 nm,zeta表面电势为-29.5±1.3 m V;MSN@CM粒径为128.0±9.3 nm,zeta表面电势为-26.7±1.2 m V。TEM与SDS-PAGE共同验证了DMSN@CM表面细胞膜的成功包覆。细胞摄取试验表明巨噬细胞膜的伪装可以抑制RAW 264.7细胞对DMSN@CM的摄取;促进MDA-MB-231细胞对DMSN@CM的摄取。结论:利用摄取-挤出法成功构建了DMSN@CM纳米颗粒,该法简便高效,为纳米颗粒的细胞膜伪装提供了一种新的手段。展开更多
目的:核酸治疗近年来越来越受到关注,但是核酸药物易被快速清除、易被核酸酶降解、非特异性生物分布、以及不易被细胞摄取的缺点使其在体内难以发挥效果。本文提供了一种具有谷胱甘肽(GSH)响应性释放的纳米粒,能够进行有效核酸药物递送...目的:核酸治疗近年来越来越受到关注,但是核酸药物易被快速清除、易被核酸酶降解、非特异性生物分布、以及不易被细胞摄取的缺点使其在体内难以发挥效果。本文提供了一种具有谷胱甘肽(GSH)响应性释放的纳米粒,能够进行有效核酸药物递送。方法:使用十六烷基三甲基氯化铵(CTAC)制备介孔硅纳米粒,在介孔硅纳米粒表面进行巯基修饰并活化,使其与巯基修饰的聚丙烯亚胺和聚乙二醇反应,形成具有GSH响应的介孔硅纳米粒,通过静电吸附进行核酸荷载。马尔文粒度仪测量表面电位、粒径,透射电镜观察纳米粒形态。核酸电泳检测其核酸负载效率,通过体外检测GSH响应释放聚乙烯亚胺(PEI)情况,共聚焦显微镜观察细胞摄取以及溶酶体逃逸情况。结果:成功构建了具有GSH响应的纳米粒,粒径为76.44±1.68 nm,表面电位为33.93±0.59 m V;通过透射电镜观察到纳米粒呈圆形带孔颗粒状;琼脂糖核酸负载试验观察到当氮磷比大于20时,能够有效进行核酸负载。共聚焦显微镜显示该纳米粒能够成功被MDA-MB-231乳腺癌细胞摄取。在溶酶体逃逸试验中观察到纳米粒进入细胞后3 h,Cy5-siRNA与溶酶体的荧光分离,证明构建的纳米粒成功从溶酶体逃脱。结论:成功构建了具有GSH响应的介孔硅纳米粒,能够有效用于核酸递送。展开更多
文摘目的:巨噬细胞具有炎症趋化能力,近年来巨噬细胞膜伪装的纳米递送载体引起研究者的广泛关注。本文提供了一种巨噬细胞膜伪装纳米颗粒的方法,即摄取-挤出法,并对该法制得的纳米颗粒进行表征,考察纳米颗粒在不同细胞中的摄取。方法:利用溶胶-凝胶法制备装载阿霉素的介孔硅(DMSN)纳米颗粒,再利用RAW 264.7巨噬细胞吞噬DMSN,最后将巨噬细胞连续挤出制得巨噬细胞膜伪装的载有阿霉素的介孔硅(DMSN@CM)纳米颗粒。动态光散射激光粒度仪(DLS)测定DMSN@CM颗粒的粒径和表面电位,透射电子显微镜(TEM)观察纳米颗粒形态,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)验证细胞膜的成功伪装。然后通过激光共聚焦显微镜与流式细胞术共同考察了DMSN@CM在不同细胞中的摄取情况。结果:成功制备了DMSN和DMSN@CM纳米颗粒。DMSN粒径为116.7±3.2 nm,zeta表面电势为-29.5±1.3 m V;MSN@CM粒径为128.0±9.3 nm,zeta表面电势为-26.7±1.2 m V。TEM与SDS-PAGE共同验证了DMSN@CM表面细胞膜的成功包覆。细胞摄取试验表明巨噬细胞膜的伪装可以抑制RAW 264.7细胞对DMSN@CM的摄取;促进MDA-MB-231细胞对DMSN@CM的摄取。结论:利用摄取-挤出法成功构建了DMSN@CM纳米颗粒,该法简便高效,为纳米颗粒的细胞膜伪装提供了一种新的手段。
文摘目的:核酸治疗近年来越来越受到关注,但是核酸药物易被快速清除、易被核酸酶降解、非特异性生物分布、以及不易被细胞摄取的缺点使其在体内难以发挥效果。本文提供了一种具有谷胱甘肽(GSH)响应性释放的纳米粒,能够进行有效核酸药物递送。方法:使用十六烷基三甲基氯化铵(CTAC)制备介孔硅纳米粒,在介孔硅纳米粒表面进行巯基修饰并活化,使其与巯基修饰的聚丙烯亚胺和聚乙二醇反应,形成具有GSH响应的介孔硅纳米粒,通过静电吸附进行核酸荷载。马尔文粒度仪测量表面电位、粒径,透射电镜观察纳米粒形态。核酸电泳检测其核酸负载效率,通过体外检测GSH响应释放聚乙烯亚胺(PEI)情况,共聚焦显微镜观察细胞摄取以及溶酶体逃逸情况。结果:成功构建了具有GSH响应的纳米粒,粒径为76.44±1.68 nm,表面电位为33.93±0.59 m V;通过透射电镜观察到纳米粒呈圆形带孔颗粒状;琼脂糖核酸负载试验观察到当氮磷比大于20时,能够有效进行核酸负载。共聚焦显微镜显示该纳米粒能够成功被MDA-MB-231乳腺癌细胞摄取。在溶酶体逃逸试验中观察到纳米粒进入细胞后3 h,Cy5-siRNA与溶酶体的荧光分离,证明构建的纳米粒成功从溶酶体逃脱。结论:成功构建了具有GSH响应的介孔硅纳米粒,能够有效用于核酸递送。