巴氏毕赤酵母表达系统的特点及其研究进展

巴氏毕赤酵母表达系统具有真核生物表达的特点。本文综述了巴氏毕赤酵母菌及其表达载体的特点以及外源基因在该系统中表达存在的一些问题。

绿色荧光蛋白基因向花鲈胚胎的转移及其表达

通过显微注射的方法,将绿色荧光蛋白(Greenfluorescentprotein,GFP)基因注射入花鲈(Lateolabraxjaponicus)单细胞期受精卵动物极细胞质内。初步研究了显微注射后的花鲈胚胎的存活状况。在荧光显微镜下观察到了GFP的表达,多数胚胎表现为嵌合性表达。利用PCR技术,从花鲈尾芽期胚胎DNA中扩增出了特异片段,大小为750bp,表明显微注射胚胎中整合了外源GFP基因。

冬瓜山铜矿隔离矿柱开采方法及稳定性分析

叙述了冬瓜山铜矿采用大直径深孔嗣后充填开采法进行多个采场同时开采,嗣后一次全尾胶结填充采空区的做法;同时通过数值计算软件模拟3种采场结构参数,分析采场的稳定性。计算结果表明:当采场长度越长,采场宽度越大时,围岩里面的最大主应力越大;当采场宽是14m,长是28m,永久矿柱厚度是4m时,采场塑性区范围最小;此组参数被定为隔离矿柱的最终采场结构参数,实现了隔离矿柱的安全高效开采。

安庆铜矿富水炮孔导爆索起爆冲击波分析

安庆铜矿的VCR采矿法大直径深孔采用导爆索起爆。爆破过程中,通常会遇到一些地下水丰富的炮孔即使在装药前用高压风去处理孔内的积水,然而吹完后很快又出现积水,因此需要采用水孔爆破技术。借助ANSYS有限元数值软件模拟导爆索在空气中和水中起爆,由计算结果可知:导爆索爆炸后在水中产生冲击波的超压值要比在空气中爆炸后产生的冲击波超压值显著加大,起爆后在炮孔内经过反复反射与叠加,使冲击波的超压最大值及作用时间都提高,使爆破效果更好。

焦磷酸测序试剂盒检测HBV耐药的性能评价及临床适用性

目的 评价焦磷酸测序试剂盒（HBV DRT）检测HBV耐药的性能及临床适用性.方法 使用HBV核酸定量标准品梯度稀释系列样品验证试剂盒PCR检测下限;使用含HBV基因序列rt区片段、10个耐药相关突变位点均为野生型或均为突变型的2个质粒样品制备不同突变型/野生型比例的系列样品,重复检测至少10次用于评价试剂盒的准确性及建立突变比例真实值与检测值的线性关系;选取102例经Sanger测序分析rt区序列的核苷（酸）类药物治疗慢性乙型肝炎患者临床样本,使用HBV DRT试剂盒检测分析10个HBV耐药相关突变位点的特征,评价两种测序分析结果的一致性.结果 HBV DRT的PCR检测下限为50 IU/ml;线性分析提示除rt236位点外,其他9个耐药位点的突变比例真实值与检测值线性关系均达到R2＞ 0.98（P＜0.001）;临床样本检测结果显示,4例样本部分位点PCR扩增失败,98例样本HBV DRT与Sanger测序检测结果比较,差异有统计学意义（x2=71.2,P＜0.001）,总符合率达92.6％ （897/969）,其中10个耐药相关突变位点结果全部一致的样本占46.9％（46/98）.两种测序方法在10个位点上的一致率介于71.5％～ 100％;两种测序结果不一致中,87.5％ （63/72）为Sanger测序结果为野生型（WT）而HBV DRT检测结果为WT/突变混合型（MT）,6.9％ （5/72）为Sanger测序结果为WT而HBV DRT检测结果为MT,5.6％ （4/72）为Sanger测序结果为WT/MT而HBVDRT检测结果为WT.结论 HBV DRT试剂盒检测乙型肝炎耐药基因具有良好的敏感性和准确性,在检测样本中存在少量病毒突变株时优于直接测序,可用于耐药突变的早期检测.