小鼠原代肝细胞的分离培养及体外脂肪变性模型构建方法的优化

目的优化改进原代肝细胞分离培养方法并建立肝脂肪变性(hepatic steatosis)的细胞模型,以提升实验效率与准确性。方法在原代肝细胞培养及已有的脂肪变性模型上进行优化,对逆向灌注插管及固定方式进行细化,精确小鼠肝脏灌注消化的速度与时间,并在撕去肝脏包膜及过滤过程中应用含2%胎牛血清(FBS)的培养基;探索诱导脂肪变性细胞模型选用的游离脂肪酸种类、浓度与比例,精确诱导时间。结果所得小鼠原代肝细胞存活率达90%以上,量足、形态好、状态佳;所构建的脂肪变性细胞模型胞质内脂滴明显、糖脂代谢能力下降,并表现出轻度炎性反应及胰岛素抵抗状态。结论优化完善的技术手段,帮助得到稳定且模拟活体生理状态的脂肪变性细胞模型。

组织工程甲壳素载体支架对角膜上皮损伤修复作用的研究

探讨甲壳素载体支架培养角膜上皮细胞的可行性以及对角膜上皮的损伤修复作用。以自制的甲壳素膜片为材料,测定其厚度、含水量、透光率、机械强度、生物相容性和降解性,在甲壳素膜片上培养兔角膜上皮细胞观察其细胞相容性,构建组织工程角膜上皮,将其移植到受损的角膜上皮层,观察其修复作用。结果甲壳素膜厚度为0.20mm,含水量为81.59%,不同波长下的透光率均大于80%,干态和湿态下的载荷强度分别为6.56和29.85N,植入肌肉及皮下后炎症反应较轻,有利于细胞贴附,并能促进角膜上皮的损伤修复。该材料基本符合组织工程角膜支架材料的要求,为组织工程角膜支架的研究指明了方向。

对流免疫电泳缓冲液及电泳介质的筛选

为找到对流免疫电泳中安全经济且效果好的电泳缓冲液以及电泳介质,从常用缓冲液中筛选出6种pH值在8.6的缓冲液进行电泳,分别用琼脂和琼脂糖作为电泳介质,观察电泳后抗原抗体形成白色沉淀线的情况。研究结果显示,6种缓冲液中Tris-HCl缓冲液效果最好,琼脂和琼脂糖凝胶均可产生明显的白色沉淀线,且随着抗原浓度的降低白色沉淀线逐渐变浅;巴比妥−巴比妥钠、TAE、Gly-NaOH和NaCl-NaOH缓冲液中琼脂糖作为电泳介质的效果均比琼脂好,TGS缓冲液效果最差。从而得出结论,Tris-HCl、巴比妥和巴比妥钠、TAE、Gly-NaOH和NaCl-NaOH缓冲液均可作为对流免疫电泳的缓冲液,但从安全与经济角度以及实验效果角度考虑Tris-HCl最好,TAE、Gly-NaOH次之。因此,免疫学实验课中将Tris-HCl作为对流免疫电泳的缓冲液。

老龄化对单侧肾切除术后大鼠青霉素排泄的影响

目的探究老龄大鼠单侧肾切除术后抗生素类药物排泄的规律和肾功能的变化。方法选用健康雄性Sprague-Dawley大鼠,分为青龄组(3月龄)和老龄组(18月龄),行右肾切除术。术后给两组腹腔注射青霉素,60 min后采血。管碟法检测青霉素血药浓度;试剂盒检测肌酐尿素氮水平评估肾功能;肾脏组织苏木素-伊红(HE)染色观察其病理变化。结果术后老龄大鼠对青霉素的排泄减缓;青、老龄组大鼠术后肾功能生化指标较术前无明显改变;术后10 d时青、老龄组大鼠肾脏质量均代偿性增加;术后老龄组肾小管及间质慢性炎症和纤维化强于青龄组。结论老龄大鼠在术后发生了明显的病理生理特征性改变从而导致青霉素的排泄减缓,但其肾功能无明显改变。

浅谈本科生科创实验室的建设与管理

近年来,高校越来越重视对本科生创新能力的培养。开展本科生科研创新活动是培养具有高素质创新型人才的有效方法。根据本科生科创项目的特点建立科创实验室并进行有效的管理,对促进科创项目的开展,培养本科生科研能力,提升科研素养都至关重要。

不同专业学生关于分子生物学实验课授课模式倾向性的调查与思考

本着“成效为本”的教育理念,针对几种分子生物学实验教学的授课形式收集了基础医学、临床医学八年制及研究生学生的意见,通过分析不同专业学生对分子生物学实验授课模式的接受程度,提出在教学实践中应针对不同专业学生采用不同的授课模式因材施教。

甲壳素共混膜对新西兰兔深Ⅱ度烫伤促愈合研究

目的初步研究2种甲壳素混合膜对烫伤创面的促愈合效果及机制。方法制备新西兰兔深Ⅱ度烫伤模型,设阴性对照组、实验1组(CT-HCTS)和实验2组(CT-CMCTS)、阳性对照组(止血愈创纱)。观察各组脱痂时间及愈合速率,取材并进行组织病理学检查,ELISA测定创面羟脯氨酸和TGF-β1的表达。结果 (1)与阴性对照组相比,实验组均能显著促进创面脱痂和愈合(P<0.05),并能显著增加羟脯氨酸含量和TGF-β1的表达量(P<0.05),且峰值提前。实验组组间差异不明显(P>0.05);阳性对照组促愈合效果极显著(P<0.01);(2)与阳性对照组相比,实验组促愈合效果较弱,有显著差异(P<0.05)。结论 CT-HCTS和CT-CMCTS共混膜能有效促进烫伤创面的愈合,使羟脯氨酸和TGF-β1的表达量提高,峰值提前。