不同蛋白载体的痢疾多糖结合疫苗小鼠免疫原性对比试验

试验中以小鼠为动物模型 ,对不同蛋白载体的痢疾多糖结合疫苗进行免疫效果观察。 3种福氏 2a痢疾结合疫苗和 3种宋内氏痢疾结合疫苗分别皮下免疫NIH小鼠 ,同时设置O SP(O 特异性多糖 )对照组 ,免疫 3针 ,在不同免疫针次间采血 ,用ELlSA测定抗体滴度。单独使用福氏 2aO SP和宋内氏O SP免疫后 ,小鼠血清中几乎没有抗LPSIgG抗体产生 ,而用结合疫苗免疫后 ,小鼠血清中产生了抗LPSIgG抗体 ,且第二次、第三次免疫后 ,小鼠血清中抗LPSIgG抗体水平有显著升高 ,表明结合疫苗具有加强免疫应答效应。三种不同的痢疾结合疫苗相比较 ,F 2a O SP rEPA结合疫苗较F 2a O SP TT结合疫苗和F 2a 0 SP DT结合疫苗的小鼠抗LPSIgG抗体水平高 ,S O SP rEPA结合疫苗较S O SP TT结合疫苗和S O SP CRM 9,结合疫苗的小鼠抗LPSIgG抗体水平高。以rEPA作为载体的痢疾结合疫苗比DT 。

双价痢疾结合疫苗的安全性及免疫原性

目的 研究双价痢疾结合疫苗的安全性及免疫原性。方法 将福氏 2aO -SP- rEPA结合疫苗和宋内氏O -SP- rEPA结合疫苗混合制备成双价痢疾结合疫苗 ,对该双价结合疫苗的安全性及免疫原性与痢疾单价结合疫苗进行比较。结果 双价痢疾结合疫苗安全可靠 ,在 4℃放置 0月、6月、12月与单价结合疫苗相比 ,小鼠血清抗体应答水平差异无显著性意义。结论 混合后没有改变两个单价结合疫苗的特性 ,且稳定性良好 ,可预防福氏 2a、宋内氏痢疾菌所引起的感染。

糖蛋白结合疫苗制备中载体蛋白琥珀酰化程度定量检测方法的建立

糖蛋白结合疫苗制备中赖氨酸单位减少率 (或赖氨酸单位替代率 )是衡量载体蛋白琥珀酰化程度的一个重要指标。本文建立了一种方便易行的化学检测方法 ,即氨基定量测定法 (简称改良Fields法 ) ,它是通过对琥珀酰化处理前和处理后载体蛋白中赖氨酸的ε一氨基的定量测定 ,间接计算出赖氨酸单位减少率大小的。经测试该方法中标准赖氨酸浓度的测试灵敏度范围在 0 .5～ 40 μg。同时用已知不同浓度赖氨酸和三批待测琥珀酰化载体蛋白进行验证 。

痢疾多糖-蛋白结合疫苗小鼠母子抗体传递试验

目的 以小鼠为试验动物模型 ,用不同的痢疾多糖 蛋白结合疫苗免疫母鼠 ,观察IgG抗体的母婴传递情况。方法 用福氏 2a痢疾多糖 重组铜绿假单胞菌外毒素A(rEPA)结合疫苗 (F2a O SP rEPA)和宋内痢疾多糖 重组铜绿假单胞菌外毒素A结合疫苗 (S O SP rEPA)分别皮下免疫母鼠 ,待其怀孕、分娩 ,用ELISA分别检测母体、子体小鼠的IgG抗体滴度。结果 子体小鼠出生第 2周的IgG抗体水平较高 ,随着小鼠周龄的增加 ,抗体水平逐渐下降。结论 痢疾多糖 蛋白结合疫苗免疫母体后 ,诱导的特异性抗体可经母体传递给子体 ,抗体滴度随时间的推移而逐渐降低。

大肠杆菌O157∶H7多糖-重组铜绿假单胞菌外毒素A结合疫苗的研制

目的 用大肠杆菌O15 7∶H7(EscherichiacoliO15 7∶H7,E .coliO15 7)的一个重要保护性抗原即菌体脂多糖 (LPS)制备有效的候选疫苗。方法 选用Westphal热酚法提纯E .coliO15 7∶H7的LPS ,经酸水解法进一步脱毒处理后得到无毒但却具弱免疫原性的O 特异性多糖 (O SP) ,然后采用己二酸二肼 (ADH)将其共价结合到琥珀酰化 (或没琥珀酰化 )重组铜绿假单胞菌外毒素 (rEPAsucc或rE PA)上。结果 制备得到的E .coliO15 7∶H7的O SP rEPAsucc或O SP rEPA结合疫苗是安全有效的 ,其免疫原性要比单一O SP的免疫原性强 ,免疫小鼠后产生的血清抗LPSIgG抗体滴度比单一O SP免疫后产生的抗体水平均有显著性升高 (P <0 .0 1) ,且再次注射后存在加强应答。结论 E .coliO15 7∶H7的O SP rEPAsucc结合疫苗可望作为一种预防肠出血性E .