内蒙古包头地区汉族原发性高血压与HLA-DQA1*0301等位基因的相关性研究

目的探讨内蒙古包头地区汉族人群中原发性高血压与人类白细胞抗原(HLA)-DQA1*0301等位基因的相关性。方法用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术对原发性高血压患者119例(高血压组)及正常对照组130例进行HLA-DQA1*0301等位基因的检测,并对结果进行分组比较。结果 HLA-DQA1*0301等位基因频率在高血压组为0.403 4,正常对照组为0.376 9,两组频率差异无统计学意义。按性别及有无家族史分组统计HLA-DQA1*0301等位基因频率,各组间差异亦无统计学意义。采用Lo-gistic回归控制了年龄的混杂作用后分析HLA-DQA1*0301基因与高血压发生的关系,结果显示该基因与高血压的发生没有关系。结论内蒙古包头地区汉族人群原发性高血压与HLA-DQA1*0301等位基因可能无相关性。

GSTT1、GSTM1基因多态性与重度慢性牙周炎易感性关系的研究

目的:研究GSTT1+/0和GSTM1+/0基因型及其联合基因型与重度慢性牙周炎(chronic periodontitis,CP)易感性的关系。方法:用聚合酶链反应检测50例重度慢性牙周炎患者和51例正常对照者的GSTT1+/0、GSTM1+/0的基因型。结果:GSTM1(0/0)和GSTT1(0/0)基因型及GSTM1(0/0)与GSTT1(0/0)联合基因型对重度慢性牙周炎相对危险度(OR)分别为9.56(95%CI,3.88-23.59),8.68(95%CI,3.50-21.51),36.83(95%CI,10.42-130.13)。结论:在内蒙古汉族人群中,基因型GSTT1(0/0)和GSTM1(0/0)增加了个体对重度慢性牙周炎易感性,且上述两种基因型间存在协同作用。

几种鱼类血红蛋白不与人血红蛋白相互作用及其进化意义

目的:观察鱼类血红蛋白与人血红蛋白及其相互之间的相互作用。方法:利用淀粉-琼脂糖混合凝胶交叉电泳的方法。结果:人血红蛋白穿过或兜过四种鱼类血红蛋白时并没有出现通常相互作用(简称互作)所观察到的"峰"或"谷"的改变。结论:鱼类血红蛋白与人血红蛋白之间没有互作,这一结果对了解血红蛋白的四级结构及分子进化都具有一定的意义。

鱼纲动物鲤鱼和两栖纲动物牛蛙血红蛋白自身不相互作用的研究及其进化意义

目的:研究鱼纲动物鲤鱼和两栖纲动物牛蛙血红蛋白自身的相互作用。方法:淀粉-琼脂糖混合凝胶交叉电泳。结果:鲤鱼、牛蛙的血红蛋白自身在“直接交叉”、“穿过”、“兜过”实验电泳过程中均未出现扭曲现象。结论:鲤鱼、牛蛙的血红蛋白自身不相互作用。

两种软骨鱼血红蛋白不与人胎儿血红蛋白相互作用及其进化意义

目的:研究两种软骨鱼——条纹斑竹鲨、孔鳐的血红蛋白成分与人胎儿血红蛋白的相互作用。方法:淀粉 -琼脂糖混合凝胶交叉电泳。结果:条纹斑竹鲨、孔鳐的血红蛋白成分不与人胎儿血红蛋白相互作用。结论:与前面所 进行的其它脊椎动物血红蛋白与人血红蛋白及人胎儿血红蛋白相互作用的研究对照比较,进一步验证了脊椎动物血红 蛋白与人血红蛋白相互作用的分界线可能位于爬行纲动物,丰富了血红蛋白的进化理论。

淀粉-琼脂糖凝胶混合保温法分析鲤鱼血红蛋白的粗结构

目的:建立一种简便的血红蛋白杂交手段。方法:采用淀粉-琼脂糖凝胶混合保温法进行鲤鱼血红蛋白相互作用的研究。结果:用淀粉-琼脂糖凝胶电泳的方法可以将鲤鱼血红蛋白(Hemoglob in,Hb)依据电泳速度快慢分为3种组分,由阳极侧向阴极侧依次命名为HbCⅠ、HbCⅡ和HbCⅢ,其中HbCⅡ是HbCⅠ与HbCⅢ分子杂交而形成。结论:淀粉-琼脂糖凝胶混合保温法进行血红蛋白相互作用的研究简便、经济、易行,结果可靠而且重复性好。

包头汉族人HLA-DQA1基因型与寻常型银屑病的相关性研究

目的:探讨HLA-DQA1*0201等位基因与包头市汉族寻常型银屑病患者的相关性。方法:采用聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)检测64例寻常型银屑病患者及63名健康对照的HLA-DQA1*0201基因型,记录此等位基因的分布情况。结果:HLA-DQA1*0201与包头市汉族寻常型银屑病患者具有明显的相关性。HLA-DQA1*0201在有家族史及无家族史患者中分布差异无显著性。结论:HLA-DQA1*0201等位基因与包头市汉族寻常型银屑病相关。

软骨鱼系动物与爬行纲动物血红蛋白A_2现象的研究

目的:比较研究软骨鱼系动物(孔鳐)与爬行纲动物(乌龟、中华鳖、翠青蛇)的“HbA2 (血红蛋白A2 )现象”。方法:将动物溶血液和其红细胞悬浮液并排进行淀粉-琼脂糖混合凝胶电泳,观察有无差异。结果:软骨鱼类动物孔鳐“HbA2现象”阳性;爬行纲动物乌龟“HbA2现象”阳性,中华鳖和翠青蛇“HbA2现象”阴性。结论: 在生物进化中,两类动物血红蛋白结构的不同造成了“HbA现象”的不同。

美国锦龟血红蛋白与人血红蛋白相互作用的生物信息学和计算机模拟研究

目的:研究美国锦龟(Westernpaintedturtle)血红蛋白与人血红蛋白在淀粉琼脂糖交叉电泳行为中发生相互作用的机理。方法:采用Accelrys公司DiscoveryStudio(DS)Modeling1.1和InsightⅡ2000软件,利用生物信息学和计算机模拟的方法,对美国锦龟(Westernpaintedturtle)血红蛋白的序列进行分析,预测其二级结构,对其空间结构进行同源模建,并计算表面静电势分布,同时将美国锦龟血红蛋白与人血红蛋白的一级结构、二级结构、三级结构及静电势分布进行比较分析。结果:美国锦龟血红蛋白β链与人血红蛋白有65.8%的同源序列,而αD和αA链与人的血红蛋白α链的同源性分别为61.0%和67.4%。二者具有相似的空间结构和静电势分布特点。结论:美国锦龟血红蛋白与人血红蛋白在淀粉琼脂糖交叉电泳中发生相互作用是基于结构的同源性。

内蒙古包头地区汉族人血管紧张素转换酶基因与糖尿病肾病的相关性研究

目的:探讨血管紧张素转换酶(ACE)基因与糖尿病肾病(DN)发病的关系。方法:用PCR方法检测100例N IDDM病人及63例正常对照的ACE基因型。结果:ACE基因型及等位基因构成比在正常对照组和N IDDM组间无统计学差异;DD基因型及D等位基因频率在DN组(0.06)与非DN组(0.02)之间无显著性差异。结论:ACE基因多态性与DN发病无关。

蒙古族人群细胞色素P4501A1基因MSPI多态性的研究

目的:探讨内蒙古地区蒙古族人群细胞色素P4501A1(cytochrome P4501A1,CYP1A1)基因MSPI多态性。方法:用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,分析了526名蒙古族正常健康成人CYP1A1基因3?端限制内切酶MSPI位点的3种基因型(A、B、C)的分布频率。结果:MSPI基因型A占32.7%,基因型B占53.2%,基因型C占14.1%,等位基因m1、m2分别为59.3%、40.7%。结论:内蒙古地区蒙古族人群CYP1A1基因存在MSPI多态性,此人群CYP1A1基因MSPI多态位点的等位基因和基因型的分布与中国北方汉族人无显著性差异。

两种爬行纲动物血红蛋白与溴酚蓝互作的研究

目的:研究两种爬行纲动物(乌龟、翠青蛇)血红蛋白(Hb)与溴酚蓝(BPB)是否互作。方法:在淀粉-琼脂糖混合凝胶电泳过程中,让溴酚蓝兜过动物的血红蛋白,观察有无互作。结果:溴酚蓝兜过翠青蛇血红蛋白和乌龟血红蛋白时出现“凹兜”样改变。结论:两种爬行纲动物能与溴酚蓝互作。这说明乌龟和翠青蛇血红蛋白有相似的结构,造成了Hb都能与溴酚蓝互作,这可能与生物进化有关。

生物信息学方法推测脊椎动物血红蛋白相互作用机制

目的通过分析脊椎动物血红蛋白(Hb)分子进化过程,解释Hb相互作用的现象并推测作用机制。方法采用NCB I、PDB等在线生物信息学网站及SMS、ANTHEPROT 5.0、C lustalx 2.0、MEGA 4、Vector NTI 9等软件包对比脊椎动物门各纲羊膜和非羊膜动物Hb氨基酸多序列的同源相似性,查找保守位点,构建分子进化树,预测二级结构,对比三级结构模型,推测Hb相互作用现象的发生机制。结果氨基酸多序列对比显示,非羊膜动物α链没有保守氨基酸(cAA),β链有3个cAA,羊膜动物α链、β链分别有27个和68个cAA;分子进化树显示非羊膜动物Hb氨基酸每位点替代值(SpS)远大于羊膜动物(P<0.01);预测二级结构分析Hb作用面发现非羊膜动物α链40位氨基酸主要参与无规则卷曲结构,羊膜动物α链40位和β链94位氨基酸均主要参与α螺旋结构;对比空间结构模型发现羊膜动物α链均有一个苏氨酸(41位)与β链的组氨酸(98位)形成氢键,而非羊膜动物不能形成此氢键。结论脊椎动物Hb相互作用发生的关键可能在于是否存在α链苏氨酸(41位)与β链组氨酸(98位)形成的氢键。

几种硬骨鱼纲、鸟纲动物血红蛋白与人血红蛋白氯仿沉淀试验的比较研究

采用淀粉-琼脂糖混合凝胶电泳的方法分析了硬骨鱼纲动物(鲤鱼、鲫鱼、泥鳅)、鸟纲动物(家鸽、家鸡、家鸭)和人的血红蛋白在氯仿沉淀试验中的稳定性,发现在泥鳅和家鸭的血红蛋白组分中存在对氯仿不稳定的成分,而在鲤鱼、鲫鱼、家鸽、家鸡的血红蛋白中未发现这种不稳定性.人血红蛋白A和血红蛋白A2对氯仿处理也表现稳定.研究结果提示硬骨鱼纲动物、鸟纲动物及人的血红蛋白对氯仿沉淀试验有不同表现,可能存在血红蛋白稳定多态性现象.

CYP1A1基因MspI酶切位点多态性与慢性重度牙周炎易感性的关系

目的:研究内蒙古地区汉族非吸烟人群和吸烟人群中,细胞色素P4501A1(cytochrome P4501A1,CYP1A1)基因MspⅠ酶切位点多态性与慢性重度牙周炎(chronic Severe periodontitis,CP)易感性的关系。方法:对50例CP患者和51例正常对照者按吸烟情况进行分组,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP),检测研究人群中CYP1A1基因3’端MspⅠ酶切位点的3种基因型(A,B,C)的分布频率。结果:不考虑吸烟情况下,MspⅠ基因型C在病例组和对照组中各占20％和13．7％,基因型A在两组中分别占42％和47．1％,基因型B在两组中分别占38％和39．2％,各基因型在两组间比较差异无显著性(P>0．05)。但在吸烟组Mspl C型者患慢性重度牙周炎的危险性(OR)是其他基因型的5倍(95％可信限:1．342 18．62)。结论:MsplC型可能是吸烟者慢性重度牙周炎易感性的遗传标志。

东南亚型遗传性胎儿血红蛋白持续增多症或东南亚型β°-地中海贫血

目的 :弄清过去所发现遗传性胎儿血红蛋白持续增多症 (HPFH )的类型和分子机制。方法 :用血红蛋白淀粉 -琼脂混合凝胶电泳检出胎儿血红蛋白 (HbF)增多、醋酸纤维膜电泳洗脱定量、酸洗脱法观察HbF在红细胞中分布、β珠蛋白基因族中基因缺失情况的分析、SouthernBlot、Gγ启动子 -15 8附近情况的分析 (酶切 ,测序 )、单体型分析、α珠蛋白基因数目的研究等。结果 :与一般HPFH不同 ,此例是 β珠蛋白基因缺失、δ珠蛋白基因存在。缺失的全长约为 2 7kb ,包括整个 β珠蛋白基因和它的 3’HS1区。先证者的α珠蛋白基因型为 :ααα/αα、其父亲为αα/αα。结论 :此例HPFH为东南亚型 ,属于 β。 地中海贫血范畴。特殊之处是多出一个α珠蛋白基因 。

蒙古族谷胱甘肽S-转移酶GSTT1和GSTM1基因多态性

目的探讨内蒙古地区蒙古族谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GSTs EC 2．5．1．18)GSTM1和GSTT1基因多态性分布特点,为内蒙古少数民族基因型研究提供相关数据。方法采用内对照聚合酶链反应技术(PCR)和凝胶成像分析方法,对555例内蒙古地区蒙古族个体的GSTT1、GSTM1基因缺失型频率进行了分析。结果GSTM1基因缺失型、GSTT1缺失型在内蒙古地区蒙古族人群中检出频率分别为55．7%和65．9%。同时具有GSTM1缺失型和GSTT1缺失型个体的检出频率为32．2%。结论中国蒙古族人群GSTM1、GSTT1基因呈多态性分布,与汉族及其他少数民族存在一定差异。

鱼纲动物孔鳐血红蛋白自身不相互作用的研究及其进化意义

目的:研究一种软骨鱼系动物(孔鳐)自身血红蛋白成份的相互作用。方法:淀粉-琼脂糖混合凝胶交叉电泳。结果:孔鳐自身血红蛋白成份不相互作用。结论:本实验完善了研究室所作的“各种脊椎动物血红蛋白自身相互作用的系列研究”。同前面所进行的各种脊椎动物血红蛋白分别与人血红蛋白、胎儿血红蛋白相互作用的研究对照比较,进一步验证脊椎动物血红蛋白与各种蛋白分子在电场中的相互作用的分水岭可能位于爬行纲动物,丰富了血红蛋白分子进化理论。