麦冬皂苷D对细菌脂多糖所致小肠上皮细胞损伤的保护作用

目的研究麦冬皂苷D(ophiopogonin D,OPD)对小肠上皮细胞损伤的保护作用及其作用机制。方法体外培养大鼠小肠上皮细胞IEC-6,用噻唑兰(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)法检测麦冬皂苷D对大鼠小肠上皮细胞IEC-6活性的影响;建立细菌脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)损伤大鼠小肠上皮细胞IEC-6模型,检测麦冬皂苷D对上皮细胞的凋亡作用以及紧密连接屏障功能作用的影响。结果 LPS可显著降低IEC-6细胞的存活率;LPS显著促进炎症指标核转录因子NF-κB、凋亡相关蛋白caspase-9以及可导致紧密连接功能紊乱的肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)的表达;LPS抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。麦冬皂苷D可逆转LPS造成的功能紊乱,包括促进Bcl-2的表达,抑制caspase-3及MLCK的表达,一定程度上恢复黏膜屏障功能。结论麦冬皂苷D可缓解LPS造成的肠上皮细胞损伤,该作用与抗炎、抑制细胞凋亡及降低MLCK表达相关;麦冬皂苷D可能成为炎症性肠病临床治疗的一个潜在的候选药物。

距离测试中拉布拉多犬行为及心率变化对导盲犬培训成功率的影响

目的采用距离测试(distance test,DT)评价拉布拉多犬行为学及心率变化特征,以期为导盲犬的前期筛选提供有效的行为学方法和生理依据。方法本实验所用60只拉布拉多犬(8~15月龄,雌性22只,雄性38只)由中国导盲犬大连培训基地提供,其中30只经培训后通过考核,被认定为成功培训的导盲犬,其余30只被认定为不适合作为导盲犬的淘汰犬。采取距离测试中兴趣,探索及游戏邀请三个变量进行犬的行为学测试,实时监测心率变化。结果距离测试中导盲犬的平均心率变化显著低于淘汰犬心率变化(P<0.05)。导盲犬和淘汰犬之间在兴趣,探索及游戏邀请测试中行为学变化差异无显著性(P>0.05)。结论距离测试中,导盲犬心率变化显著低于淘汰犬心率变化;导盲犬相对于淘汰犬,具有更加稳定的心理素质及较好的控制情绪的能力。本研究可为距离测试与心率结合预测导盲犬培训成功率提供理论基础。

无患子外种皮提取物防除玉米田杂草研究

为了评价无患子外种皮提取物（以下称无患子提取物）及其与除草剂复配制剂的田间实际除草效果,作者在安徽省桐城市黄甲镇农田开展了无患子提取物及其与甲草胺、噁草酮的4种复配制剂防除玉米田杂草的田间药效试验。结果表明,供试药剂对玉米田主要杂草具有良好的防除效果。在3900-4500 mL·hm^-2的用量范围内,施药后15 d和30 d,30%无患子提取物水剂对马唐、莎草的株防效分别达82%和87%以上,鲜重防效都达85%以上;对丁香蓼的株防效达75%以上,鲜重防效达82%以上;对总草的鲜重防效达83%以上。无患子提取物与甲草胺（含量20%）、噁草酮（含量6%）复配,在化学除草剂用量减半的情况下,依然表现出突出的除草效果。无患子提取物与甲草胺复配,在4500 mL·hm^-2的用量下,施药后15 d和30 d,对马唐、莎草的株防效分别达90%和94%以上;对丁香蓼的株防效达79%以上;对总草的鲜重防效达88%以上。无患子提取物与噁草酮复配,在3600 mL·hm^-2的用量下,施药后15 d和30 d,对马唐、莎草的株防效分别达94%和96%以上;对丁香蓼的株防效达94%以上;对总草的鲜重防效达96%以上。本研究结果对于减少化学除草剂的用量,减少化学农药对环境的污染,在一定程度上降低农产品农药残留风险,具有重要的参考价值,为无患子资源的开发利用,提供了理论依据。

长链非编码RNA linc00467在儿童急性髓系白血病中的表达及耐药中的作用研究

目的研究长链非编码RNA linc00467在儿童急性髓系白血病(AML)中的表达及功能。方法采集2016年5月至2018年6月确诊的5例儿童AML病例的骨髓标本,以进行骨髓检查提示为正常的3例儿童骨髓标本作为对照。通过实时荧光定量PCR检测并比较linc00467在两组样本中的表达量。通过慢病毒系统在AML细胞(HL-60)中过表达linc00467(linc00467过表达组),以表达绿色荧光蛋白(GFP)的空载体转入AML细胞作为对照(GFP对照组);通过慢病毒系统将干扰序列插入AML细胞中(sh-linc00467干扰组),以插入随机序列作为对照(sh-NC对照组)。检测各组细胞增殖情况及对阿霉素耐药性的影响。结果与对照组儿童相比,linc00467在儿童AML中表达上调。过表达与干扰linc00467表达对细胞增殖无明显影响(P>0.05)。相比于GFP对照组,过表达linc00467在0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μg/mL阿霉素浓度作用下均可增强HL-60细胞活性(P<0.05)。相比于sh-NC对照组,干扰linc00467的表达在0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μg/mL阿霉素浓度作用下均可降低HL-60细胞活性(P<0.05)。与未处理组相比,阿霉素处理HL-60细胞后linc00467表达量升高(P<0.05)。结论linc00467有促进AML细胞对阿霉素耐药的生物学功能,为AML新的治疗药物开发提供了依据。

应用COMT基因SNP位点鉴别拉布拉多和金毛猎犬胆量行为的研究

目的检测拉布拉多和金毛猎犬儿茶酚-O-甲基转移酶(Catechol-O-methyltransferase,COMT)基因SNP位点的多态性,并统计分析SNP位点的基因型及单倍型与犬胆量行为间的关联性,以期为工作犬培训的前期筛选提供有效的遗传学分子标记。方法选取91只拉布拉多和27只金毛猎犬,共计118只,采用犬胆量评估(dog courage assessment,DCA)测试方法对犬的胆量行为进行评估,用高分辨率熔解曲线法(high resolution melting,HRM)对该118只犬的COMT基因的4个SNP位点:-1666 bp C>G、c.39 A>G、c.216 G>A和c.482 G>A进行基因型鉴定,应用SPSS 19.0和PHASE 2.1软件统计分析4个SNP位点的基因型和单倍型与犬胆量行为之间的相关性。结果拉布拉多和金毛猎犬的品种、性别和年龄与犬的胆量行为之间没有显著关联性(P>0.05)。COMT基因的4个SNP位点的基因型与拉布拉多和金毛猎犬的胆量行为之间存在显著相关性(P<0.01)。COMT基因4个SNP位点的单倍型与拉布拉多和金毛猎犬的胆小性情显著相关(P<0.01),并且c.216 G>A和c.482 G>A位点的A等位基因在犬的胆小行为上起主导作用。结论COMT基因的4个SNP位点的基因型和单倍型与拉布拉多和金毛猎犬的胆量行为之间存在显著相关性,提示COMT基因对犬的胆量行为具有显著的影响,可作为胆小犬早期鉴定的有效遗传学分子标记。

SLC1A2基因SNP位点与拉布拉多和金毛猎犬活跃度的相关性研究

目的 检测SLC1A2基因SNP位点与拉布拉多和金毛猎犬活跃度的相关性,以期为导盲犬早期选育筛选有效的遗传学分子标记。方法 选取中国大连导盲犬培训基地的99只犬(拉布拉多犬80只,金毛猎犬19只),采用Passive test(PT)行为测试法对犬的活跃度进行评估。同时采集该99只犬的静脉血,提取血细胞中的基因组DNA样本,采用PCR/测序方法对该99只犬的SLC1A2基因T129C、T1549G和T471C 3个SNP位点进行基因型鉴定,并统计分析犬的活跃度与SLC1A2 SNP位点的相关性。结果 SLC1A2基因的3个SNP位点中,T129C和T1549G位点没有多态性,分别仅存在C/C型和G/G型。T471C位点存在3种基因型:T/T、T/C和C/C。这3种基因型与活跃度、性别以及品种间不存在显著相关性(P>0. 05)。另外,品种与活跃度之间也没有显著相关性(P>0. 05),但性别与活跃度间存在显著相关性(P=0. 049)。结论 SLC1A2基因的T129C、T1549G和T471C位点与导盲犬的活跃度不具有显著相关性,不能作为导盲犬的遗传学筛选的指标。由于性别与活跃度间存在显著相关性,因而在行为学测试中,对犬的活跃度评分标准应雌雄有别。