受体相互作用蛋白140在脓毒症急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞中的表达及其作用

目的探讨受体相互作用蛋白140（receptor interacting protein140,RIP140）在脓毒症急性肺损伤（acute lung injury,ALI）大鼠肺泡巨噬细胞中的表达及其在炎症反应过程中的作用。方法 36只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组和盲肠结扎穿孔术（CLP）致脓毒症肺损伤3、6、12、24 h组。HE染色观察肺组织病理变化;免疫组化检测RIP140在肺组织的表达分布;Western blot及免疫荧光观察肺泡巨噬细胞RIP140的表达变化及定位;RT-q PCR测定肺泡巨噬细胞IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA水平变化。结果 CLP组可见明显肺损伤病理改变且随时间进展逐渐加重。RIP140在脓毒症肺损伤大鼠肺组织中主要表达于炎性渗出细胞,且随时间进展,表达RIP140的细胞数量逐渐增多。CLP术后6 h大鼠肺巨噬细胞RIP140蛋白表达水平较正常对照组开始升高（P〈0.05）,至12~24 h维持一较高水平,且主要表达于细胞核。CLP术后3 h大鼠肺巨噬细胞IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA水平较正常对照组开始升高（P〈0.05）,至12~24 h维持一较高水平,下调肺泡巨噬细胞RIP140的表达可明显抑制IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA的表达。结论脓毒症肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞可通过上调RIP140表达增强肺组织炎症反应,从而参与早期急性肺损伤的炎症应答。

社会主义新农村建设中大学生“村官”培养的思考

从建设社会主义新农村,加速推进中国农村地区城市化进程,调整农村产业结构,改变农村的生态环境,提高新知识、新技术传播和普及速度出发,对如何培养大学生"村官"等进行了综述。

论科学发展观与中国城镇化建设

当前我国社会主义新农村的规划与建设存在一些问题,如何根据科学发展观来推进农村小城镇化,正确处理新农村、小城镇规划编制所面对的问题,避免失误,从而完善社会主义新农村的规划建设,无疑具有一定的现实意义。

关于城乡建设中节能减排措施的思考

以科学发展观为指导,结合当前社会主义新农村建设,针对新一轮城乡规划和建设的实施,提出应对建筑节能减排和城乡管理所应采取的可行性措施。

城镇化进程中的农村土地资源整合对策

分析了城镇化导致的农村土地问题,一是城乡建设的快速发展造成土地资源的稀缺;二是农村劳动力大量转移,家庭承包责任制下的细碎化的土地不利于现代农业规模化发展。结合山东东阿县城镇化改造中的农村土地资源整合实践,提出了农村土地资源整合应遵循的原则及具体对策。

土地资源整合基础上的农村产业发展策略

针对当前农村土地整合、流转带来的机遇,结合几个适宜农业升级发展的问题,探讨助推农村产业发展的策略,为农民经济收入的提高及生活环境的改善建言献策。

浅谈现代家庭的布置与装饰

随着生活水平的提高,人们对居住环境也提出越来越高的要求。居室的合理布局与装饰已成为每个家庭关注的热点。 现代住宅多由卧室、起居室、客厅、卫生间和厨房等部分组成。这些房间由于分工和作用不同,在布局和装修方面也应遵循不同的原则。 1 卧室:营造温馨气氛和浪漫情调 卧室,顾名思义是休息之所。现代生活的快节奏,使人绷紧的神经在这里得以彻底放松。因此,现代卧室布置,最讲究气氛和情调。首先,卧室的主色调要鲜明,选择有利于视觉的色彩,并可随季节的变换采用不同的色调。如夏季采用冷色调,如淡青、浅灰色。

脓毒症的前世今生及序贯器官衰竭认知及理念

脓毒症(sepsis)是目前世界范围内感染致死的主要原因,具有患病率及病死率高的特点,全球每年sepsis患病超过1900万例,其中600万例患者死亡,存活的300万例中伴有认知功能障碍。sepsis是急危重症医学面临的重要临床问题,及时识别与恰当处理可改善Sepsis患者的预后[1-4]。Sepsis的前世今,历经1991年(Sepsis 1.0)-2001年(Sepsis 2.0)-2016年(Sepsis 3.0)的跨越,一次次修订与完善中,最新版Sepsis 3.0抛开全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS),改以器官衰竭(OD)为核心,以SOFA定义OD,提出了Quick SOFA的理念[5-7]。序贯器官衰竭(sequential organ failure,SOFA)评分提出至今已有25年,它的问世为临床提供了一套评估和监测危重患者器官功能障碍的简单方法。

脂多糖诱导巨噬细胞中核受体协同抑制因子启动子甲基化对炎症因子的调控作用

目的探讨核受体协同抑制因子(NCOR)在脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞炎症反应中的作用及其调控机制。方法 1μg/ml的LPS分别处理小鼠巨噬细胞RAW264.7 24 h和48 h,应用Western blot和Real time-PCR检测NCOR的表达水平以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)mRNA水平,荧光素酶报告基因检测核因子-κB(NF-κB)的启动子活性。LPS处理细胞48 h后,应用MSP检测NCOR启动子是否发生甲基化以及Western blot检测DNMT3b的表达变化。Real time-PCR检测5'-aza和LPS联合处理细胞后NCOR mRNA的表达水平;转染DNMT3b siRNA后,分别应用Western blot和Real time-PCR检测DNMT3b的表达水平,以及DNMT3b siRNA和LPS联合作用下NCOR、TNF-α、IL-6的表达水平和NF-κB的启动子活性。结果 LPS干预细胞24、48 h后,NCOR蛋白和mRNA表达显著下调(P<0.05),而TNF-α、IL-6 mRNA表达水平、DNMT3b蛋白的表达水平以及NF-κB的启动子活性显著上升(P<0.05)。MSP检测说明LPS可介导NCOR的启动子甲基化。用5'-aza和LPS联合处理细胞后NCOR mRNA水平较LPS组有显著上升(P<0.05)。采用DNMT3b siRNA可显著下调DNMT3b蛋白和mRNA水平,并可部分逆转LPS介导的抑制NCOR表达的效应,抑制TNF-α、IL-6的表达水平和NF-κB的启动子活性(P<0.05)。结论 NCOR启动子的甲基化是LPS介导巨噬细胞炎症反应发生、发展的关键步骤,其可作为治疗ALI/ARDS的潜在靶点。

DAPK1在急性肺损伤小鼠肺组织中的表达及其作用

目的探讨死亡相关蛋白激酶1(DAPK1)在急性肺损伤小鼠肺组织中的表达及在炎症失控中的作用。方法将30只雄性C57小鼠按随机数字表法分为5组:正常对照组、LPS诱导急性肺损伤3、6、12、24 h组。应用2 mg/kg DAPK1抑制剂TC-DAPK 6预处理小鼠后,再用10 mg/kg LPS诱导小鼠肺损伤。HE染色光镜观察小鼠肺组织病理改变;免疫组化检测肺组织中DAPK1的表达和分布;应用RT-PCR和Western blot检测肺组织DAPK1和NF-κB p65的表达;ELISA检测血清炎症因子TNF-α、IL-6水平变化;Kaplan-Meier生存分析对各组小鼠存活时间进行分析。结果 LPS致伤组肺组织可见明显病理损伤改变且随时间进展加重,而DAPK1蛋白在正常对照组小鼠肺组织仅少量表达,在急性肺损伤小鼠肺组织中表达随时间进展明显增加;与正常对照组相比,LPS组肺组织DAPK1 mRNA蛋白表达水平均明显增高(P<0.05),血浆炎症因子TNF-α、IL-6均明显升高(P<0.05)。抑制小鼠肺DAPK1表达可明显降低LPS诱导的肺组织中DAPK1和NF-κB p65蛋白水平、血清炎症因子TNF-α、IL-6的水平(P<0.05)。此外,抑制DAPK1可延长LPS致急性肺损伤小鼠的生存期(P<0.01)。结论 DAPK1通过调控NF-κB炎症通路参与了LPS诱导的小鼠急性肺损伤,其可作为潜在的治疗靶点。

过氧化物酶增殖体激活受体γ辅助激活子-1α在脓毒症肺损伤大鼠肺组织中的表达

目的探讨脓毒症肺损伤大鼠过氧化物酶增殖体激活受体γ辅助激活子-1α(PGC-1α)在急性肺损伤(ALI)发病中的作用。方法将54只SD大鼠随机分为9组:正常对照组(6只);假手术组3、6、12、24 h(各6只);盲肠结扎穿孔组3、6、12、24 h(各6只)。利用盲肠结扎穿孔手术复制大鼠急性肺损伤模型。HE染色观察大鼠肺组织病理情况;ELISA检测血浆炎症因子(IL-1β、TNFα、IL-6)表达变化;real-time PCR检测肺组织PGC-1αmRNA表达;Western blot检测肺组织PGC-1α蛋白表达情况。结果大鼠经盲肠结扎穿孔后,肺组织显示出血、肺泡塌陷、肺泡间隔增厚、肺间质水肿及大量炎症细胞浸润等肺部炎症的表现。与正常对照组比较,假手术组各时间点大鼠血浆炎症因子(IL-1β、TNFα、IL-6)、肺组织PGC-1αmRNA及蛋白表达水平均无统计学差异(P>0.05);盲肠结扎穿孔组各时间点血浆炎症因子(IL-1β、TNFα、IL-6)表达水平较正常对照组明显升高(P<0.05),且成时间效应关系;肺组织PGC-1αmRNA及蛋白表达水平较正常对照组明显降低(P<0.05),并随着术后时间的延长逐渐降低(P<0.05)。结论正常大鼠肺组织可表达PGC-1α,脓毒症肺损伤大鼠肺组织内PGC-1α的mRNA和蛋白表达水平下降,提示PGC-1α可能参与ALI的发生发展过程。