铜绿假单胞菌lasR基因反义肽核酸序列筛选及其抑制生物被膜形成的研究

目的筛选靶向铜绿假单胞菌lasR基因的反义肽核酸序列,探讨其对铜绿假单胞菌的生物被膜形成能力的影响。方法针对铜绿假单胞菌lasR基因设计4条反义寡核苷酸序列,利用斑点杂交筛选出与lasR基因结合最佳的反义寡核苷酸序列,以此合成与穿膜肽连接的肽-肽核酸序列。分别用不同浓度的肽-肽核酸导入铜绿假单胞菌生物被膜模式菌PAO1中,测定不同时相点细菌生长光密度[D(600)]值并进行菌落计数,观察肽-肽核酸对其生长的抑制作用。利用光学显微镜和扫描电镜观察生物被膜形成情况。q PCR方法检测lasR mRNA表达。结果斑点杂交实验结果显示:4条反义寡核苷酸序列中3条有杂交信号产生,其中第1条序列信号最强,以此为基础合成反义肽核酸。不同浓度的肽-肽核酸对铜绿假单胞菌表现出不同程度的体外抗菌活性,且随着浓度增加,抗菌活性增强。结论有效筛选出高效反义核苷酸序列,经筛选出的靶向铜绿假单胞菌lasR基因的反义肽核酸对铜绿假单胞菌的生长及生物被膜形成能力有明显抑制作用,同时抑制lasR mRNA的表达。

PBL教学法对国内临床检验教学效果影响的meta分析

目的通过meta分析,综合评价问题式教学法(PBL)教学法对国内临床检验医学教学效果的影响,为该领域医学教育方式的探索提供循证依据。方法全面检索相关文献库、会议资料以及研究报告等,并根据严格纳排标准筛选出相关文献资料;运用meta分析方法对纳入文献进行定性或定量分析。结果共纳入28篇文献;学生总成绩方面,PBL教学组优于传统教学组[加权均数差(WMD)=7.38,95%CI:6.11~8.65,P<0.05];另外,在学生评价方面,认为PBL在激发学习兴趣、促进创新能力、强化师生合作交流等11个方面都优于传统教学组(P<0.05),同时认为PBL组的教学效果满意度更好[相对危险度(RR)=1.19,95%CI:1.09~1.30,P<0.05]。结论PBL教学法在国内临床检验教学效果上具有一定优势,但也不能忽视教学章节与学生层次的影响,应根据根据授课内容与对象的合理调整教学资源,探索更多适合我国临床检验PBL教学模式。

重庆地区表观健康成年人血清睾酮参考区间的建立

目的建立重庆地区表观健康人群血清睾酮的参考区间。方法选取体检健康成年人为研究对象,按性别、年龄分组,检测血清睾酮水平,根据美国临床和实验室标准协会C28-A3文件相关要求,建立血清睾酮的95%参考区间。结果研究纳入体检健康人群共602例,其中男性300例,血清睾酮水平呈正态分布,平均水平为(4.89±1.33)ng/mL;女性302例,血清睾酮水平呈非正态分布,水平中位数(四分位数)为[0.38(0.20~0.57)]ng/mL,二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。进一步年龄分组比较血清睾酮测定结果,男性血清睾酮水平在两个年龄亚组间的差异无统计学意义(P>0.05),女性的睾酮水平随年龄增长而降低,20~<50岁年龄组明显高于≥50岁年龄组(P<0.05)。重庆地区表观健康人群血清睾酮的参考区间:男性为2.28~7.50 ng/mL,女性20~<50岁为0.10~1.03 ng/mL,女性≥50岁为0.10~0.70 ng/mL。结论初步建立了重庆地区表观健康人群不同性别的血清睾酮的参考区间,女性人群需根据年龄分组采用不同的参考区间。

重庆地区孕妇HbA1c及早中孕空腹血糖正常参考区间的建立以及联合诊断妊娠期糖尿病的临床价值

目的建立重庆地区孕妇糖化血红蛋白A1c（HbA1c）及早中孕空腹血糖正常参考区间，并探讨HbA1c联合早中孕空腹血糖（FPG）的方法用于诊断妊娠期糖尿病（GDM）的可行性，以提高孕妇的依从性。方法回顾性分析2014年9月至2015年8月在第三军医大学大坪医院妇产科产前检查及分娩的孕妇中，选取在孕10—13周“进行空腹血糖的检测，在孕24—28周同时进行75g口服葡萄糖耐量试验（OGTF）和HbA1c检查的孕妇，筛查出185例孕妇为GDM组，及随机抽取同期正常孕妇269名为对照组，检测两组早孕FPG、HbA1c中孕FPG及OGTT结果，将对照组检测结果按全国临床和实验室标准化研究院制定的C28-A3标准，计算并制定重庆地区孕妇24—28周HbA1c和早中孕空腹血糖的参考区间。采用t检验、符号秩合检验、NcMemar检验和κ检验、制作ROC曲线进行统计学分析。结果GDM组与对照组的早孕FPG、HbA1c中孕FPG水平分别为（5．06±0．37）与（4．85±0．32）mmoL／L（t=6．569，P=0．000）、5．3（5．1，5．4）％与5．2（5．0，5．3）％（z=-5．79，P=0．000）、5．23（5．11，5．4）与4．74（4．54，4．91）mmoL／L（z=-14．31，P=0．000）。早孕FPG、HbA1c中孕FPG的95％医学参考区间分别为4．21～5．49mmol／L、4．58％～5．52％和4．03～5．08mmol／L。早孕FPG、HbA。中孕FPG诊断GDM的AUC分别为0．659、0．655、0．890。而联合HbA1c与中孕FPG和三者联合诊断GDM效能无差异，AUC均为0．898。当分别以4．94mmol／L和5．35％作为早孕FPG和HbA1c诊断GDM的cut-off值时，其敏感度分别为64．7％和38．0％、特异度分别为62．2％和85．6％，阳性预测值分别为54．3％和65．1％，阴性预测值分别为72．1％和66．9％。而HbA1c联合中孕FPG诊断GDM的敏感度为83．8％，特异度为85．9％，阳性预测值为80．3％，阴性预测值为88．5％。联合诊断方法与传统OGTT诊断GDM的吻合度较好，对应的κ系数分别为0．692（P=0．000）。结论HbA1c联合中孕FPG与传统OGTT诊断GDM的吻合度较好，且前者的依从性较好，可作为GDM诊断方法的有力补充。

潜艇密闭环境下军人皮肤表面微生物分布特征研究

目的研究潜艇密闭环境下军人皮肤表面微生物分布特征和变化特点,为潜艇艇员针对性卫勤保障提供依据。方法利用样本采集拭子采集潜艇艇员皮肤表面标本122份,进行细菌培养,分纯后通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)鉴定。结果共分离细菌52种229株,真菌2种2株,主要优势条件致病菌为鲍氏不动杆菌、铜绿假单胞菌和阴沟肠杆菌,优势栖居菌为滕黄微球菌、奥斯陆莫拉菌、乌尔新不动杆菌、表皮葡萄球菌和黏质沙雷菌。任务中后期与任务前期相比,优势条件致病菌和栖居菌均明显增多。结论获得了潜艇密闭环境下军人皮肤表面微生物菌谱,平战时需进行针对性药品配备并采取战创伤救治措施。