内生菌DEB-2发酵液对辣椒白星病田间防效初探

试验结果表明,内生菌DEB-2发酵液对辣椒白星病有较好的防治效果。第1次药后7d,内生菌DEB-2发酵液原液、稀释1倍液的防效分别为65.07%、58.91%。末次药后7d防效分别为76.07%、68.17%。内生菌DEB-2发酵液对辣椒整个生育期安全,在生产上推荐使用内生菌DEB-2发酵液原液。

人工发酵古尼虫草中甘露醇的测定

利用比色法简便、准确和快速地测定发酵生产的古尼虫草菌丝中甘露醇含量。结果表明 ,甘露醇的最大特征吸收峰在 41 2nm处 ,质量浓度在 1 0～ 5 0mg/L范围内线性较好 ,其回归方程 ρ=-0 842 +97 3 2 9A,r=0 9992 ;平均回收率 1 0 0 2 4% ,RSD =0 5 4% (n=5 )。样品中甘露醇采用水提取法 ,提取时间 2h。甘露醇显色后 2 0min内测定对结果影响不大 ,在测定时要注意排除果糖对测定结果的影响。用此法测得发酵古尼虫草菌丝体中甘露醇的含量为 7.4% ,RSD =0 .2 4% (n =6)。

DEB-2菌株产抗真菌活性物质的初步研究

为寻找新的抗真菌药物,对DEB-2菌株中产生的抗真菌作用的粗提物进行了初步研究。结果表明:DEB-2菌株发酵液中的抗菌物质可能是一种蛋白质或肽类物质、分子量大于3.5 kD;该抗真菌物质具有较高的热稳定性,121℃处理20 min活性没有损失,对变性剂脲、紫外线相当稳定,在酸碱条件下仍具有一定活性;对木瓜蛋白酶不稳定。

蛹草拟青霉中虫草菌素的提取及检测

建立了用超声波法提取蛹草拟青霉中虫草菌素和用HPLC法测定其含量的方法。试验结果表明，在检测波长259nm处，虫草菌素浓度为5．42～173．3μg／mL时，回归方程C=-1．2846＋3．41192×10^-5A，r=0．9996；平均回收率100．15％，RSD=0．54％（n=4）；超声波法提取菌丝体中虫草菌素时，提取溶剂以水或低于20％浓度的乙醇溶液较好，提取时间30min；用此法可测定不同蛹虫草菌株中虫草菌素的产量。

古尼拟青霉镇痛组分的分离及其性质初探

采用葡聚糖凝胶SephadexG-25柱层析方法从古尼拟青霉(Paecilomyces gunnii)镇痛粗提物(CGUAS)中分离到5个单峰组分,其中CGUAS-p1组分的镇痛效果最好,在浓度为5mg/mL时,对冰醋酸所致小鼠扭体抑制率为92.31%,镇痛效果几乎与杜冷丁相当,并且对小鼠具有一定的镇静作用.经化学分析,各单峰组分中均含有糖和蛋白质,而且镇痛效果与各组分中糖和蛋白质的含量成正比(n=4),其中CGUAS-p1、CGUAS-p2、CGUAS-p4、CGUAS-p5组分的糖和蛋白质的出峰时间相近,推测古尼拟青霉镇痛物质可能为糖肽类物质.

细脚棒束孢E3菌株产N^6-(2-羟乙基)腺苷的培养基及前体物筛选

为研究有利于E3菌株产N6-(2-羟乙基)腺苷[N6-(2-hydroxyethyl)-adenosine,HEA]的培养基组分、前体物及氨基酸,以查氏培养基作为基础培养基,液体静置发酵,分别对碳氮源、无机盐、前体物和氨基酸进行筛选,结果表明:碳、氮源最好的是淀粉和(NH4)2HPO4;无机盐只有钾盐能促进菌株产生HEA,效果最好的是KH2PO4;前体物和氨基酸中腺苷和腺嘌呤促进菌株累积HEA能力相同,精氨酸、赖氨酸、脯氨酸、组氨酸、色氨酸、L-谷氨酸和丝氨酸等均能促进菌株产HEA,精氨酸效果最好,菌丝体中HEA含量达2068.21±55.34μg/g,HEA产量达13.10±1.48mg/L。

细脚棒束孢E3菌株产N6-(2-羟乙基)腺苷的液体发酵条件优化

以N6-(2-羟乙基)腺苷[N6-(2-hydroxyethyl)-adenosine,HEA]的产量为评价指标,查氏培养基为基础培养基,分别筛选液体静置发酵的光照、温度、时间、培养基初始pH、装液量和接种量,结果表明:有利于细脚棒束孢(Isaria tenuipes)E3菌株产HEA的发酵条件为黑暗或荧光、黄光,培养温度为25~28℃,培养时间为110d,培养基的初始pH为6.0~7.0,装液量为50%,接种量为2.5%。

红曲及其活性物质的研究进展

综述了近年来红曲及其活性物质在食品、药品等方面的研究状况 ,特别指出红曲中桔霉素 (Citrinin)

红曲霉的分离及其红曲米的生产

根据红曲霉菌的性质 ,用双抗淀粉培养基从红曲米中分离纯化得到一株红曲霉菌株 (MonascusFM 1) ,用该菌种生产的红曲米色泽为紫红色 ,总色价为 14 30U/ g。

蛹虫草液体种制备及发酵生产菌丝体和虫草菌素工艺优化

为获得蛹虫草液体种制备和液体发酵生产菌丝体和虫草菌素的最佳工艺,以蛹草拟青霉Peacilomyces militarisBCEC07菌株为菌种,通过对接种量(孢子浓度)的考察,探索不同孢子浓度对蛹虫草液体母种制作效果的影响;通过单因素和正交试验,优化生产虫草菌素各营养因子的最佳种类和配比。结果表明:在1.5×1010孢子数的接种量时制作的母种最适合用于蛹虫草液体发酵产菌丝体和虫草菌素;蔗糖、蛋白胨、MgSO4.7H2O、K2HPO4和NAA是最适合的碳源、氮源、无机盐及生长因子;工艺优化后得出蛹虫草液体发酵产菌丝体的最佳配方为30g/L蔗糖、25g/L蛋白胨、1.5g/L KH2PO4、0.5g/L MgSO4.7H2O和4.0mg/L NAA;产虫草菌素的最佳配方为:30g/L蔗糖、25g/L蛋白胨、1.5g/L KH2PO4、0.5g/L MgSO4.7H2O和3.0mg/L NAA。优化后生物量和虫草菌素总产量分别提高了43.00%(达31.60g/L)和31.60%(达645.12mg/L)。为进一步提高蛹虫草菌丝体及虫草菌素的单位产量提供参考。

前体及营养物提高蛹虫草虫草菌素产量的研究

研究不同前体及营养物对蛹虫草液体深层发酵产胞外虫草菌素的影响,并优化其促进虫草菌素生产的最佳添加条件。结果表明:添加腺嘌呤、甘氨酸、腺苷、L-谷氨酰胺4种前体或营养物能大幅提高蛹虫草液体发酵胞外虫草菌素的产量。两种前体和营养物能够通过协同互补作用提高胞外虫草菌素的产量,而且腺嘌呤的组合添加效果明显高于腺苷组合,特别是1g/L的腺嘌呤与8g/L的甘氨酸组合添加胞外虫草菌素产量达到1644.21mg/L,是基础培养基的4.66倍。不同前体及营养物添加发酵后其核苷类物质的含量表明:80%的虫草菌素被分泌到发酵液中,蛹虫草整个核苷酸代谢系统是紧密相连的,很多核苷类物质都能直接或间接转化成虫草菌素。

添加前体促进蛹虫草发酵生产菌丝体和虫草菌素的研究

研究了不同前体及营养物对蛹虫草液体发酵产菌丝体和虫草菌素的影响,并优化了其添加条件。结果表明添加前体及营养物能大幅提高蛹虫草液体发酵菌丝体及其中虫草菌素的含量,通过对9种供试前体及营养物进行筛选,确定能有效提高菌丝体及其中虫草菌素含量的物质是腺嘌呤、甘氨酸、腺苷、L-谷氨酰胺4种。2种前体及营养物能够通过协同互补作用提高虫草菌素产量,腺苷的组合添加效果明显高于腺嘌呤组,特别是2g/L腺苷和16g/LL-谷氨酰胺组合添加胞内虫草菌素含量达到了25.92mg/g(是原来的282.97%),菌丝体产量也达到28.5g/L(是原来的157.89%)。

石斛抗真菌内生细菌的筛选及其抗菌特性的初步研究

从药用植物石斛组织中分离到4株具有抗真菌活性的细菌菌株,其中DEB-2菌株具有比较稳定的抗真菌作用,能强烈抑制多株植物病原菌、人体病原菌、植物内生菌和食品腐败菌,显示该菌在植物真菌病害的防治、抗真菌药物的筛选、食品防霉变和植物组织培养污染真菌的防治上有一定的应用前景;抗菌机理观察,发现被拮抗菌丝尖端均有不同程度变粗、膨大、崩解或者菌丝分枝增多的现象,表明被拮抗菌丝的细胞壁可能被破坏,使细胞内原生质流出而抑制其菌丝的尖端生长.

古尼拟青霉的毒理及药用价值研究概况

对古尼拟青霉的毒性、致畸、致突变和药用价值的研究进行了概述。研究表明,古尼拟青霉无致畸、致突变作用,属无毒性类物质,并具有多种药用功能:镇静、镇痛、调节机体免疫力、抗衰老、抗癌、增强记忆、预防和治疗高脂血症、抗心律失常、降低心肌耗氧、耐急性缺氧等。古尼拟青霉的药用价值及开发前景值得关注,有待深入研究。

固体培养条件对蛹虫草产子实体和虫草菌素的影响

研究了营养液不同pH值和米粒大小两个培养条件对蛹虫草固体发酵产子实体和虫草菌素的影响。当营养液pH值为5．5～6．0时子实体的产量最大，营养液pH值为6．5时，虫草菌素总的产量最大，达48．44g／瓶。较大的米粒有利于蛹虫草子实体的生长，较小的米粒有利于蛹虫草虫草菌素的积累。子实体的产量随着米粒的变小而减少；子实体中虫草菌素的含量随着米粒的变小而增加。当采用整米作为培养基基质时，蛹虫草子实体产量最大，达1．67g／瓶，当采用40目米＋10目米（1：1，M／M）作为培养基基质时，蛹虫草子实体中虫草菌素含量最大，达1．87％，虫草菌素总的产量也最大，达52．46mg／瓶。

复方中草药对乌蒙乌鸡生长性能、屠宰性能和肉品质的影响

为研究复方中草药制剂对乌蒙乌鸡生长性能、屠宰性能和肉品质的影响。将120只乌蒙乌鸡随机分成4组(对照组、Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组),对照组饲喂基础日粮,Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组分别在基础日粮中添加0.05%、0.1%、0.2%的复方中草药。结果显示,Ⅰ组与对照组相比,日均增重、腿肌率、瘦肉率均显著提高(P<0.05),日均耗料量、料肉比、胸肌红度(a*值)、腿肌剪切力均显著降低(P<0.05)。Ⅱ组与对照组相比,日均增重、屠宰率、半净膛率、胸肌率、腿肌率、瘦肉率、pH均显著提高(P<0.05),日均耗料量、料肉比、胸肌与腿肌红度(a*值)、胸肌黄度(b*值)、胸肌亮度(L*值)、胸肌与腿肌滴水损失率、胸肌蒸煮损失率、胸肌与腿肌剪切力均显著降低(P<0.05)。Ⅲ组与对照组相比,日均增重、胸肌率、腿肌率、瘦肉率均显著提高(P<0.05),日均耗料量、料肉比、胸肌红度(a*值)、胸肌蒸煮损失率、腿肌剪切力均显著降低(P<0.05)。这表明日粮中添加不同剂量复方中草药能改善乌蒙乌鸡的生长性能、屠宰性能和肉品质,提高乌蒙乌鸡的食用和药用价值,最适添加剂量为0.1%。

猕猴桃灰霉病拮抗解淀粉芽孢杆菌X17可湿性粉剂的研制

以植物内生解淀粉芽孢杆菌X17为研究对象,通过对载体、分散剂、润湿剂、稳定剂、保护剂的筛选,确定了内生解淀粉芽孢杆菌X17可湿性粉剂最佳配方:硅藻土10%,羧甲基纤维素钠4%,十二烷基硫酸钠6%,甲基纤维素2%,糊精0.1%。结果显示,制备的解淀粉芽孢杆菌X17可湿性粉剂在25℃室温下芽孢含量为2.0×10^(10) cfu/g,pH 7.0,悬浮率78%,润湿时间35 s,细度通过率99%,制剂贮藏6个月存活率达78%。盆栽试验结果表明,内生解淀粉芽孢杆菌X17可湿性粉剂和母粉500倍液对猕猴桃灰霉病的保护效果分别为80.59%和68.82%,菌株X17可湿性粉剂的防治效果优于其母粉。

DEB-2菌株对贵州苹果早期落叶病病原的毒力效应

为苹果早期落叶病的生物防治提供依据,采用组织分离法分离病原、形态与分子鉴定方法鉴定贵州苹果落叶病病原,用生物测定法研究DEB-2菌株对贵州苹果早期落叶病病原的毒力效应。结果表明:贵州苹果早期落叶病主要为苹果轮斑病和苹果斑点落叶病,其病原分别为轮斑病病原(Alternaria mali)和苹果斑点落叶病病原(Altemaria alternata);DEB-2菌株发酵液对A.mali和A.alternata抑制菌丝生长的EC50值分别为1.34%和0.12%;对抑制孢子萌发的EC50值分别为2.32%和5.32%。DEB-2菌株发酵液有效地抑制了贵州苹果早期落叶病原菌的菌丝生长和孢子萌发。

青蒿内生真菌Alternaria sp.(PQH12)提取物体外细胞毒活性及抗氧化活性的研究

本文分别采用环己烷、正丁醇、乙酸乙酯、丙酮、甲醇5种极性不同的溶剂分别提取青蒿内生真菌Alternaria sp.(PQH12)的菌丝体。采用MTT法分别测定不同极性溶剂提取物对3种肿瘤细胞株(HL-60、MCF-7和COLO205)的生长抑制率,采用DPPH自由基清除法和超氧阴离子O-·2清除法评价了青蒿内生真菌Alternaria sp.(PQH12)不同极性溶剂提取物的抗氧化活性。结果显示,正丁醇和乙酸乙酯提取物均表现出对肿瘤细胞生长的抑制作用;浓度为20μg/mL时,正丁醇提取物对HL-60细胞的生长抑制率为80.56%,乙酸乙酯提物对MCF-7和COLO205细胞的生长抑制率分别为54.47%和83.09%;在两种抗氧化活性评价体系中,甲醇提取物的抗氧化活性均明显优于其他溶剂的提取物,其IC50值分别为0.20 mg/mL(DPPH)和0.19 mg/mL(O-·2)。该结果表明,青蒿内生真菌Alternaria sp.(PQH12)具有较好的细胞毒和抗氧化潜力,具有一定的开发利用价值,可以作为进一步实验研究的对象。

贵州黄花蒿内生真菌多样性及其产抗病活性物质菌株的筛选

为了解贵州黄花蒿植株内生真菌多样性,挖掘农作物病害生物防治新资源,采集贵州生物多样性丰富地区的黄花蒿（Artemisia annua.Linn.）植物13株,分离获得内生真菌;通过形态学和5.8S-ITS rDNA分子系统发育分析得出分类;以小麦赤霉、水稻纹枯、番茄黑斑等9种农作物病原真菌作为靶标菌,采用平板对峙法对产抗病活性物质的菌株进行筛选。结果表明：分离获得内生真菌122株,鉴定得到子囊菌门真菌共10目8科12属,担子菌门2目2科2属,接合菌门1目1科1属。共计18株（14.8%）黄花蒿内生真菌对病原菌具有较强的拮抗作用,其中以青霉属GZUCCZY0012菌株的抗病活性最为广谱,对6种病原真菌菌丝生长均具有较强的抑制作用,抑制效果为72.60%～94.86%。