L-精氨酸对糖尿病大鼠肾脏、大脑、睾丸氧自由基和抗氧化水平的影响

目的探讨L-精氨酸对糖尿病(DM)大鼠肾脏、大脑、睾丸氧自由基和抗氧化水平的影响。方法给大鼠腹腔注射四氧嘧啶制备DM模型,随机分为DM组、L-精氨酸治疗组及正常对照组;用药4w末处死大鼠,测定肾脏、大脑及睾丸组织一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量。结果DM大鼠睾丸NOS活性(P<0.01)及大脑、睾丸NO含量(P<0.05,P<0.001)、肾脏SOD(P<0.001)、肾脏、大脑、睾丸GSH-Px活性(P<0.01,P<0.001,P<0.05)均较正常对照组显著降低,而肾脏、大脑、睾丸MDA含量均较正常对照组明显升高(均P<0.001);L-Arg可显著增加DM大鼠肾脏、大脑、睾丸NOS活性和NO含量(均P<0.001)及大脑SOD(P<0.01)、大脑、睾丸GSH-Px活性(P<0.05,P<0.001),并使肾脏、大脑、睾丸MDA含量显著降低(分别P<0.01,P<0.001,P<0.001)。结论DM大鼠肾脏、大脑、睾丸组织存在脂质过氧化损伤;L-Arg通过提高NO含量,保护抗氧化酶活性,对DM大鼠肾脏、大脑、睾丸组织的氧化应激有一定的减轻作用。

葛根素对糖尿病大鼠心肌损伤的影响

目的:探讨葛根素对糖尿病大鼠心肌损伤的影响及其机制。方法:雄性SD大鼠随机分成6组:正常对照组,糖尿病模型组,葛根素高(160mg·kg-1)、中(120mg·kg-1)、低(80mg·kg-1)剂量治疗组,氨基胍(100mg·kg-1)治疗组;各组大鼠每天腹腔注射相应药物1次,正常对照组及糖尿病模型组腹腔注射等体积丙二醇。治疗12周后,透射电镜下观察心肌的形态学改变,用生化方法测定血糖浓度、心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、Ca2+-ATPase、Na+-K+-ATPase活性及丙二醛(MDA)含量,采用RT-PCR检测心肌组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、葡萄糖转运体4(GLUT-4)、醛糖还原酶(AR)的mRNA表达水平。结果:糖尿病组大鼠心肌组织电镜下主要见到心肌细胞肌原纤维减少,纤维间脂滴沉积,线粒体排列紊乱,嵴部分断裂或消失,结构不清;SOD、Ca2+-ATPase、Na+-K+-ATPase活性和PPAR-γ、GLUT-4 mRNA表达明显低于正常对照组(均P<0.01),而血糖浓度、MDA含量和AR mRNA表达明显高于正常对照组(均P<0.01)。经葛根素治疗后,上述改变逆转,与糖尿病模型组比较差异显著(P<0.05或P<0.01),电镜下心肌组织形态学病变明显减轻,肌纤维排列较整齐,仅见少量脂滴沉积,大部分线粒体嵴清晰致密。结论:葛根素对糖尿病大鼠心肌具有一定的保护作用,其机制可能与上调PPAR-γ、GLUT-4 mRNA的表达,促进心肌细胞对葡萄糖的摄取,减轻氧化应激损伤有关。

银杏叶提取物对糖尿病大鼠睾丸损伤的作用

目的 :研究银杏叶提取物 (GBE)对糖尿病所致的睾丸损伤的作用及其机制。方法 :用光镜及透射电镜观察链脲佐菌素 (STZ)诱导的糖尿病 1个月大鼠睾丸的形态学改变 ,并测定睾丸组织丙二醛 (MDA)、NO产物NO2 -/NO3 -的含量及超氧化物歧化酶 (SOD)、一氧化氮合酶 (NOS)的活性。结果 :①糖尿病大鼠睾丸组织光镜下主要表现为睾丸曲细精管萎缩、变形及生精上皮脱落 ,透射电镜下主要见到支持细胞浆内内质网扩张、脂滴空泡形成 ,溶酶体明显减少 ,银杏叶组大鼠睾丸组织光镜、透射电镜下上述病变明显改善。②睾丸组织的MDA、NO2 -/NO3 -含量及tNOS和iNOS活性银杏叶组低于糖尿病组 ,SOD活性银杏叶组高于糖尿病组。结论 :GBE对糖尿病所致的睾丸损伤有明显的保护作用 ,其作用机制与提高SOD活力减少MDA产生 。

银杏叶提取物对实验性2型糖尿病大鼠肝脏的保护作用

目的:研究银杏叶提取物(EGB)对实验性2型糖尿病大鼠肝脏损伤的影响及机制。方法:雄性SD大鼠39只,随机分为4组:正常对照组、高脂组、糖尿病对照组和EGB治疗组。采用高脂饮食加链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病大鼠模型,EGB治疗组给予EGB 8 mg.kg-1.d-1治疗8周。用光镜和透射电镜观察EGB对2型糖尿病大鼠肝组织的形态学改变,并检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GSH-PX)和总一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活性及MDA、NO含量。结果:糖尿病组光镜下主要表现为肝细胞脂肪变性明显,出现大量脂肪空泡,胞浆内糖原颗粒减少或消失。电镜下主要表现为肝细胞核固缩,胞浆内含大量脂滴,细胞器明显减少,贮脂细胞明显增生,胶原纤维增生。肝组织内GSH-PX、SOD、CAT活性明显低于正常对照组,MDA、NO含量及总NOS、iNOS活性显著高于正常对照组;EGB治疗组肝脏组织病理改变较轻,GSH—PX、SOD、CAT活性明显高于糖尿病组,MDA、NO含量及总NOS、iNOS活性显著低于糖尿病组。结论:EGB对2型糖尿病大鼠的肝脏具有保护作用、抗脂质过氧化作用和抑制NO的过多产生可能在其中起重要作用。

银杏叶提取物对糖尿病大鼠脂代谢及巨噬细胞功能的影响

目的:研究银杏叶提取物(EGb)对2型糖尿病大鼠脂代谢及巨噬细胞功能的影响。方法:SD大鼠分4组:正常对照组、高脂组、糖尿病组、EGb治疗组,治疗结束取血测血糖、血脂、血胰岛素并分别灌取4组大鼠腹腔及肺泡巨噬细胞,测定巨噬细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)及丙二醛(MDA)的水平,并用RT-PCR方法测定大鼠肺泡巨噬细胞内CD36、PPARγ的基因表达水平。结果:糖尿病大鼠血糖、血胰岛素、总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)升高,经EGb治疗后,血糖、血胰岛素、TC、TG、LDL-C明显降低;糖尿病大鼠腹腔及肺泡巨噬细胞内SOD活性下降、NO及MDA含量增高,经EGb治疗后,SOD活性升高、NO2-/NO3-及MDA含量下降;糖尿病大鼠肺泡巨噬细胞CD36基因表达升高,PPARγ基因表达升高,经EGb治疗后,CD36基因表达继续升高但无显著差异、PPARγ基因表达继续升高。结论:EGb对糖尿病大鼠巨噬细胞脂质过氧化有较好的拮抗作用,并能降低一氧化氮含量,从而改善糖尿病时巨噬细胞功能;EGb可提高2型糖尿病大鼠肺泡巨噬细胞CD36、PPARγ基因的表达水平,这可能是其降血脂和改善胰岛素抵抗的机制之一。

银杏叶提取物对糖尿病大鼠膈肌的保护作用

目的 :研究银杏叶提取物 (EGb)对糖尿病大鼠膈肌的保护作用。方法 :用光镜和透射电镜观察EGb对糖尿病大鼠膈肌的形态学改变 ,并测定膈肌线粒体琥珀酸脱氢酶 (SDH)、超氧化物歧化酶 (SOD)、一氧化氮合酶(NOS)的活性 ,一氧化氮 (NO)、丙二醛 (MDA)的含量。结果 :糖尿病大鼠膈肌线粒体SDH、SOD活性下降 ,NOS活性及MDA、NO含量增高 ;电镜下主要表现为膈肌线粒体扩张 ,嵴变短 ,空泡化。EGb治疗组病变明显减轻。与糖尿病组比较 ,膈肌线粒体SDH、SOD活性升高 ,NOS活性及NO、MDA含量下降。结论 :EGb通过减轻自由基和过量一氧化氮对膈肌线粒体造成损伤 ,提高SDH活性 ,改善线粒体呼吸链的功能 ,从而对糖尿病大鼠膈肌起到保护作。

L-精氨酸对糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用

目的探讨L精氨酸(LArg)在糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用。方法给大鼠腹腔注射四氧嘧啶制备糖尿病模型,随机分为糖尿病组、LArg组及正常对照组;用药4w末处死大鼠,检测血糖、血胆固醇、血清及心肌组织中SOD、GSHPx、NOS活性和MDA、NO含量以及心肌组织中Na+K+ATPase、Ca2+ATPase活性。结果与模型组比较,LArg可明显降低糖尿病大鼠血糖、血胆固醇水平及MDA含量(均P<0001),显著增加血清GSHPx、NOS活性(分别P<001,P<0001),同时使心肌线粒体GSHPx活性、NO含量明显增加(分别P<005,P<0001),并且使心肌组织中Na+K+ATPase、Ca2+ATPase活性显著增加(P<0001,P<001)。结论LArg在糖尿病性心肌损伤中通过LArgNO通路对心肌损伤具有一定的保护作用,适当补充外源性LArg对糖尿病患者防治心血管系统并发症有重要意义。

L-精氨酸对糖尿病大鼠肝、心肌及膈肌线粒体自由基损伤的保护作用

目的探讨L-精氨酸(L-Arg)对糖尿病大鼠肝脏、心肌及膈肌线粒体自由基损伤的保护作用。方法给大鼠腹腔注射四氧嘧啶制备糖尿病模型,随机分为糖尿病组、L-Arg治疗组及正常对照组;用药4w末测定三组大鼠肝脏、心肌及膈肌细胞线粒体中Mn-SOD、GSH-Px活性和MDA含量及膈肌线粒体内GSH含量。结果糖尿病组较正常组,大鼠肝、心肌、膈肌线粒体内GSH-Px活性显著降低(P<0.01,P<0.05,P<0.001),MDA含量显著升高(P<0.01,P<0.05,P<0.01),肝、膈肌线粒体Mn-SOD活性(均P<0.01)及膈肌线粒体GSH含量(P<0.05)也明显降低;与模型组比较,L-Arg可显著增加糖尿病大鼠肝、心肌、膈肌线粒体GSH-Px活性(P<0.05,P<0.05,P<0.001)及肝、膈肌线粒体Mn-SOD活性(均P<0.001),并使膈肌线粒体MDA含量显著降低(P<0.01),而GSH含量明显升高(P<0.001)。结论糖尿病大鼠肝、心肌、膈肌线粒体内自由基生成增多;L-Arg可通过提高肝、心肌、膈肌细胞线粒体中自由基清除酶的活性来加速自由基的清除,提高机体的抗氧化能力,从而保护机体功能免受氧化损伤。

葛根素对糖尿病大鼠睾丸的保护作用

目的:探讨葛根素对糖尿病大鼠睾丸的保护作用及其机制。方法:雄性SD大鼠随机分成6组:正常对照组,糖尿病模型组,葛根素高(160mg·kg-1)、中(120mg·kg-1)、低(80mg·kg-1)剂量治疗组,氨基胍(100mg·kg-1)治疗组;各组大鼠每天腹腔注射相应药物1次,正常对照组及糖尿病模型组腹腔注射等体积丙二醇。治疗12周后,透射电镜下观察睾丸的形态学改变,用生化、免疫学方法测定睾丸组织中一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)、丙二醛(MDA)的含量及一氧化氮合酶(NOS)、诱导型NOS(iNOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、Ca2+-ATPase、Na+-K+-ATPase的活性,采用RT-PCR检测睾丸组织内皮型NOS(eNOS)、iNOS、CGRP、ET-1、醛糖还原酶(AR)的基因表达水平。结果:糖尿病组大鼠睾丸组织电镜下主要见到支持细胞与曲细精管基底膜接触面减小、出现空泡,胞浆内内含物形成;NO、CGRP含量及SOD、Ca2+-ATPase、Na+-K+-ATPase活性和eNOS、CGRPmRNA表达明显低于正常对照组(P<0.05或P<0.01),而ET-1、MDA含量及NOS、iNOS活性和iNOS、AR、ET-1mRNA表达明显高于正常对照组(均P<0.01)。经葛根素治疗后,上述改变逆转,与糖尿病模型组比较差异显著(P<0.05或P<0.01),电镜下睾丸组织的形态结构接近于正常组;而葛根素高、中、低剂量治疗组、氨基胍治疗组间差异无显著。结论:葛根素对糖尿病大鼠睾丸具有一定的保护作用,其机制可能与改善睾丸血供及减轻氧化应激损伤有关。

葛根素对糖尿病大鼠坐骨神经损伤的影响

目的:探讨葛根素对糖尿病大鼠坐骨神经的保护作用及其机制。方法:雄性SD大鼠随机分成6组:正常对照组,糖尿病模型组,葛根素高(160mg·kg-1)、中(120mg·kg-1)、低(80mg·kg-1)剂量治疗组,氨基胍(100mg·kg-1)治疗组;各组大鼠每天腹腔注射相应药物1次,正常对照组及糖尿病模型组腹腔注射等体积丙二醇。治疗12周后,测定6组大鼠血清、坐骨神经一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合酶(NOS)活性和血浆内皮素-1(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)含量及坐骨神经丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、Ca2+-ATPase、Na+-K+-ATPase活性和神经元型NOS(nNOS)、醛糖还原酶(AR) mRNA的表达水平。结果:糖尿病组大鼠血液NO、CGRP含量及坐骨神经NOS、SOD、Ca2+-ATPase、Na+-K+-ATPase活性、NO含量和nNOS mRNA的表达均明显低于正常对照组(P<0.01或P<0.05),而血液NOS活性、ET-1含量和坐骨神经MDA含量、AR mRNA的表达均明显高于正常对照组(P<0.01或P<0.05);经葛根素治疗后,上述改变逆转,与糖尿病模型组比较差异有显著性(P<0.01或P<0.05)。结论:葛根素对糖尿病大鼠坐骨神经具有一定的保护作用,其机制可能与改善神经内膜血供及减轻氧化应激损伤有关。

蝉拟青霉对大鼠营养状况的影响

目的 :观察蝉拟青霉菌丝体水提取物对正常及环磷酰胺所致免疫抑制大鼠血液蛋白质、白细胞水平及肝细胞形态结构的影响 ,探讨其对机体营养状况的影响。方法 :用HiCN法、双缩脲法、溴甲酚绿法分别测定血红蛋白、血清总蛋白、白蛋白含量 ;测定外周血白细胞数 ;并在电子显微镜下观察肝细胞的形态结构。结果 :蝉拟青霉使正常大鼠血清总蛋白、球蛋白含量显著增加 (P <0 .0 1 ) ,并能拮抗由于使用环磷酰胺所造成的血红蛋白、血清总蛋白、球蛋白含量的降低 (P <0 .0 5 ) ;使正常大鼠血白细胞数明显升高 (P <0 .0 5 ) ,并能阻遏由于使用环磷酰胺所致的白细胞降低 (P <0 .0 5 ) ;使正常大鼠肝细胞粗面内质网、线粒体增多。结论 :蝉拟青霉对机体的营养状况有改善作用。

银杏叶提取物对糖尿病大鼠心肌线粒体的保护作用

目的观察银杏叶提取物(EGb)对糖尿病大鼠心肌线粒体的保护作用。方法40只SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组和EGb治疗组,观察各组大鼠心肌线粒体超微结构,检测心肌线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)的活性,以及一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)的含量。结果糖尿病大鼠心肌线粒体主要表现为肿胀,嵴变短,空泡化;SDH、SOD活性下降,NOS活性及MDA、NO含量增高。EGb治疗组病变较糖尿病组明显减轻,心肌线粒体SDH、SOD活性升高,NOS活性及NO、MDA含量下降。结论EGb能保护自由基和过量一氧化氮对心肌线粒体的损伤,提高SDH活性,从而对糖尿病大鼠心肌起保护作用。

L-精氨酸对糖尿病大鼠坐骨神经损伤的保护作用

目的:探讨L-精氨酸(L-Arg)对糖尿病(DM)大鼠坐骨神经损伤的保护作用及其机制。方法:用链脲佐菌素制备糖尿病模型。SD大鼠随机分为正常对照组(NC组)、DM组、L-Arg治疗组(L-Arg组)。L-Arg治疗12周后,测定三组大鼠血清、坐骨神经组织一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性及血浆内皮素-1(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)含量,以及坐骨神经组织Ca2+-ATPase、Na+-K+-ATPase活性及神经元型NOS(nNOS)、醛糖还原酶(AR)基因的表达。结果:DM组大鼠血清、坐骨神经NO含量和NOS活性、血浆CGRP含量及坐骨神经Ca2+-ATPase、Na+-K+-ATPase活性和nNOS mRNA的表达均明显低于NC组(P<0.01或P<0.05),而血浆ET-1含量、坐骨神经AR mRNA的表达均明显高于NC组(均P<0.01);经L-Arg治疗后,上述改变逆转,与DM组比较差异有显著性(P<0.01或P<0.05)。结论:L-Arg对DM大鼠坐骨神经损伤具有一定的保护作用,其机制可能与改善神经血供及抑制多元醇代谢途径有关。

福寿螺纤溶酶的分离纯化及其性质研究

目的：建立一种高效的福寿螺纤溶酶(ACFE)分离纯化技术,并研究其理化性质。方法：福寿螺经组织匀浆、缓冲液抽提与选择性热变性,再经大豆胰蛋白酶抑制剂耦联的Sepharose 4B亲和层析、DEAE-Sephacel离子交换层析与羟基磷灰石亲和层析。结果：分离纯化得到一种均一的ACFE成分,其分子量为32kD,pI为3.6,最适pH在9.5～11.0之间,该酶热稳定性强,能抗4mol／L脲处理；其具有水解合成底物S-2288和Chromozym P的活性,活性受Zn^(2+)、Cu^(2+)等抑制,受对氨基磺酸氟(PMSF)抑制,但不受对羟甲基苯磺酸(PHMB)影响。结论：首次从福寿螺体内分离纯化得到ACFE。

医学生物化学“说课”实例

医学生物化学是高等院校医学专业的必修课程,"说课"是设计教学活动的新手段。为进一步提高生化教育质量,促进教学相长,通过具体生物化学"说课"实例,剖析教学内容的知识结构和特点,运用合理的教法实施教学过程,并对学生的学习方法进行指导,为探求新型生化教学模式提供参考。

医学生物化学动画库的制作及在教学中的应用评价

根据医学生物化学知识特点和教学大纲要求,甄选出适当内容制作直观动画,并在教学实践中应用。对动画在医学生物化学课堂教学中的应用效果进行评价分析,结果表明动画的应用不仅丰富了课堂教学内容,而且有助于学生对难点知识的理解与记忆,从而提高医学生物化学教学质量。

形成性评价体系在生物化学课程中的应用研究

目的探讨形成性评价在生物化学课程中实施效果。方法选取该校2014级临床课改班及2015~2017级临床“5+3”专业学生249人作为观察组,同时选取五年制临床医学专业同年级学生2812人作为对照组。对照组实施传统的期末考试评价方式,观察组实施形成性评价方式,比较2组中同一年级学生生物化学总成绩及不及格率。结果观察组中2014~2017级学生生物化学总成绩及不及格率分别优于对照组中相应年级学生,差异有统计学意义(P<0.05)。结论形成性评价考核方式能真实、客观地反映学生的学习水平及教师的教学效果。

形成性评价在医学生物化学教学中的应用

在《医学生物化学》教学评价体系中适当地引入形成性评价指标,建立形成性评价与期末终结性考核评价相结合的教学评价系统。首先在大课教学中期通过考易平台进行选择题测试,测试后教师给予及时反馈与讲解,另外在毕博网络教学平台出1~2道讨论题,教师与学生可以做线上线下讨论,教师最终做出点评和总结;其次实验课上根据学生课上听课情况、动手积极与否、操作有无错误、结果是否合理、实验报告的书写是否规范等方面进行形成性评价,教师对每次实验的过程及结果进行记录并总结,并在下一次实验课授课前进行统一反馈;再次在以案例为基础的学习讨论课上,就教师提出的问题,学生以小组为单位通过自行查阅资料、进行组内和组间交流讨论,最后教师根据学生的讨论结果和讨论中出现的问题进行总结和评价。在这三部分教学环节中都使用形成性评价,弥补传统的终结性评价的不足,以便更有效地提高教学质量。

《医学生物化学》课程整合的实践初探

课程整合是现代课程改革的主要问题之一,更是目前我国基础教育课程改革方案的重点内容之一。《医学生物化学》是临床医学专业学生的一门重要基础课程,但是在教学中存在内容多、课时少等问题;上课仍然以讲授为主;对学生的评价主要通过期末考试,基本上是"一考定乾坤"等问题。因此,综合其他院校和其他科目课程整合的经验,教师重新构建了《医学生物化学》课程体系,首先在教学内容上进行调整,压缩一些内容,留出一些课时,引入讨论式教学模式,讨论过程中引入临床案例,使生物化学理论知识与临床实践相衔接,培养学生对知识的运用和分析问题能力。同时,改变目前单一依靠期末考试成绩作为考核的唯一标准,将理论课中讨论课表现、撰写小综述、期中考核、机动小测验等内容纳入考核体系,不但可以及时反馈学生每个阶段的学习效果,而且可以更全面客观地评价出学生的综合能力。

L-精氨酸对糖尿病大鼠心肌损伤的影响

目的研究L-精氨酸(L-Arg)对糖尿病(DM)大鼠心肌的保护作用。方法 28只大鼠腹腔注射链脲佐菌素(60 mg/kg)制备DM模型,随机均分为DM组、L-Arg〔300 mg/(kg.d)〕治疗组。另设立正常对照(NC)组(n=12)。用药12周末处死大鼠,用透射电镜观察3组大鼠心肌细胞的形态学改变,采用RT-PCR检测心肌组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮素-1(ET-1)mRNA的表达水平,并测定心肌组织内eNOSi、NOS、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性以及一氧化氮(NO)、ET-1的含量。结果电镜下可见DM组大鼠心肌细胞肌原纤维含量明显减少,肌浆网扩张,线粒体肿胀变性。DM组大鼠eNOS mRNA表达、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性及NO含量明显低于NC组,而ET-1 mRNA表达及ET-1含量明显高于NC组。L-Arg组大鼠心肌病变明显减轻,eNOS mRNA表达、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性及NO含量明显高于DM组,ET-1mRNA表达及ET-1含量明显低于DM组。结论 L-Arg对DM大鼠心肌具有保护作用,其机制可能与L-Arg增加心肌组织NO含量、降低ET-1含量,改善心肌血供有关。