PGC-1α通过线粒体介导巨噬细胞极化状态的机制研究

目的探讨通过敲低PGC-1α对肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophages,TAMs)极化状态的影响及其机制。方法以小鼠腹腔巨噬细胞(mouse peritoneal macrophages,PMs)为研究对象,与4T1细胞共培养24 h建立TAMs;shRNA转染构建瞬时低表达PGC-1α的TAMs;Western blot检测TAMs中PGC-1α、TAMs极化指标、TAMs线粒体功能蛋白的蛋白表达;Real-time PCR(qRT-PCR)检测TAMs的mt DNA水平;流式细胞术检测TAMs极化标志物,ROS水平的变化;ATP测定试剂盒检测TAMs中ATP水平的变化。结果与PMs组比较,TAMs组PGC-1α蛋白表达上调(P <0. 05),M2型分泌细胞因子蛋白(TGF-β1、IL-10)表达升高(P <0. 05),线粒体功能相关蛋白(NRF-1、TFAM)表达升高(P <0. 05),M2型极化标记物(CD206)表达升高(P <0. 05),M1型分泌细胞因子蛋白(TNF-α、IL-1β)表达降低(P <0. 05);sh-PGC-1αTAMs组较TAMs组发生了相反的变化,即PGC-1α蛋白表达降低(P <0. 05),M2型分泌细胞因子蛋白(TGF-β1、IL-10)表达降低(P <0. 05),线粒体功能相关蛋白(NRF-1、TFAM)表达降低(P <0. 05),M2型极化标记物(CD206)表达降低(P <0. 05),M1型分泌细胞因子蛋白(TNF-α、IL-1β)表达升高(P <0. 05),M1型极化标记物(CD86)表达升高(P <0. 05)。结论 PGC-1α参与了乳腺TAMs向M2极化的过程,其机制可能为癌细胞与TAMs相互作用,增强了TAMs中依赖PGC-1α的线粒体功能,促使细胞向M2分化,并产生M2型细胞因子。