复合益生菌制剂对肠炎大鼠血清生化指标、粪便菌群、胃肠道消化酶活性及肠道形态的影响

本试验旨在探究复合益生菌制剂对葡聚糖硫酸钠(Dextran Sulfate Sodium,DSS)诱导的大鼠粪便菌群及其代谢物短链脂肪酸(Short-Chain Fatty Acids,SCFAs)、血清炎性因子与抗氧化指标、粪便炎性标志物、消化酶活性和肠道组织形态的影响,阐明该复合益生菌制剂对肠炎模型动物肠道健康的影响。选取24只SD大鼠,随机分成3组,分别为对照组(生理盐水+基础饲粮)、肠炎模型组(DSS+生理盐水+基础饲粮)和益生菌组(DSS+复合益生菌制剂+基础饲粮),造模1周,正饲3周,采样并测定相关指标。结果显示:与肠炎模型组相比,益生菌组的SOD和GSH活性上升(P<0.01),血清炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α和IFN-γ水平下降(P<0.01),粪便炎性标志物FC、MMP-9和MPO降低(P<0.01);3个处理组均含有拟杆菌门(Bacteroidetes)、厚壁菌门(Firmicutes)、疣微菌门(Verrucomicrobiota)、变形菌门(Proteobacteria)、脱硫杆菌门(Desulfobacterota)、弯曲菌(Campylobacterota)、髌骨细菌门(Patescibacteria)、放线菌门(Actinobacteriota)、蓝藻细菌门(Cyanobacteria)等菌门;与肠炎模型组比较,益生菌组粪便中SCFAs含量均增加(P<0.01);益生菌组消化酶活性均高于肠炎模型组(P<0.01),低于对照组(P<0.01);相比于肠炎模型组,益生菌组回肠和空肠黏膜形态趋向于对照组正常小鼠状态逐渐恢复。可见,复合益生菌制剂可改变DSS诱导的肠炎大鼠的粪便微生物群多样性和组成,促进有益菌定植和SCFAs的产生,提高免疫力和消化酶活性,降低炎性指标,恢复肠道组织形态。

氧化应激对围产期奶牛及犊牛的影响研究进展

围产期奶牛要承受由妊娠、产犊及泌乳3个阶段交替带来的生理性变化,此时奶牛既要维持后期胎儿的正常生长发育,还要保证随后泌乳正常,此阶段发生的生理变化以及能量负平衡很容易诱发奶牛的氧化应激反应。机体组织和细胞持续的氧化应激不仅损害围产期奶牛的生产性能,还会给胎儿带来生理和行为上的危害,影响后代终身生理进程及繁殖机能。本文对近年来关于围产期奶牛氧化应激的研究进展进行概述,综述氧化应激的代谢特征、致病因素以及对犊牛的消极影响,以期为生产上维持围产期奶牛正常生理机能及保证氧化应激影响下犊牛的机体健康提供理论参考。

胆碱对热应激诱导的奶牛乳腺上皮细胞凋亡的影响

[目的]本试验旨在揭示胆碱对热应激诱导的奶牛乳腺上皮细胞凋亡的抑制作用。[方法]奶牛乳腺上皮细胞系(MAC-T细胞)于含10%胎牛血清的DMEM培养基中进行体外培养,将细胞分为对照组、胆碱组(100μmol·L^(-1))、热应激组(42℃,2 h)、热应激+胆碱组。采用CCK-8法分析添加胆碱对MAC-T细胞的药物毒性及细胞增殖活性的影响,采用Western blot分析蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)磷酸化水平及激活转录因子4(ATF-4)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)和Bcl-2关联X(Bax)蛋白表达水平,RT-qPCR检测GRP78、CHOP、ATF-4、Bax、Bcl-2、Caspase-3(胱氨酸蛋白3基因)mRNA水平。[结果]与对照组相比,热应激组MAC-T细胞的相对存活率极显著降低(P<0.01),p-PERK、ATF-4、CHOP、GRP78和Bax蛋白表达量极显著升高(P<0.01),Bcl-2表达量极显著下降(P<0.01),且显著上调Caspase-3 mRNA表达水平;与热应激组相比,热应激+胆碱组MAC-T细胞相对存活率显著增加(P<0.05),p-PERK、ATF-4、CHOP、GRP78和Bax蛋白表达量均极显著下降(P<0.01),Bcl-2蛋白表达量升高(P<0.05),且Caspase-3 mRNA表达水平受到明显抑制。[结论]胆碱通过调控内质网应激介导的凋亡信号通路的表达,抑制由热应激诱导的奶牛乳腺上皮细胞的凋亡。

TNF-α诱导小鼠乳腺上皮细胞凋亡和程序性坏死研究

[目的]本试验旨在探究肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导对小鼠乳腺上皮细胞凋亡和程序性坏死的影响。[方法]体外培养小鼠乳腺上皮细胞系(HC-11细胞)并分为4个处理组:对照(Ctrl)组、TNF-α(T)组、TNF-α+CHX(环己酰亚胺)(TC)组和TNF-α+CHX+Z-VAD-FMK(Caspase家族抑制剂)(TCZ)组。向细胞中加入TNF-α(20、50、100 ng·mL^(-1))、CHX(4μmol·L^(-1))、Z-VAD-FMK(20μmol·L^(-1)),分别处理12 h和24 h,检测细胞活力和细胞凋亡及程序性坏死相关基因和蛋白的表达,利用透射电镜观察不同处理后细胞的超微结构变化。[结果]与对照组相比,100 ng·mL^(-1) TNF-α(T-100)处理12 h后细胞活力极显著降低(P<0.001),50 ng·mL^(-1) TNF-α(T-50)和100 ng·mL^(-1) TNF-α(T-100)处理24 h后细胞活力极显著降低(P<0.01),所有TC和TCZ处理12 h和24 h后细胞活力极显著降低(P<0.001);光学显微镜下观察发现T、TC和TCZ处理后细胞呈不同程度死亡;与对照组相比,T组和TC组Bax/Bcl-2和Caspase-3 mRNA和蛋白表达水平均显著上升(P<0.05);T组和TC组Caspase-8 mRNA表达水平极显著上升(P<0.01),而TCZ组Caspase-8 mRNA水平极显著降低(P<0.001),TC组和TCZ组RIP3、MLKL mRNA表达水平极显著上升(P<0.001),但只有TCZ组程序性坏死标志蛋白RIP3、MLKL和p-MLKL表达量极显著上升(P<0.01),且p-MLKL/MLKL蛋白表达比值显著上升(P<0.05);与对照组相比,TCZ组细胞内出现空泡、线粒体肿胀、断裂等坏死细胞所具有的细胞超微结构变化;TC组和TCZ组PGAM5 mRNA表达水平极显著上升(P<0.001),TCZ组PGAM5蛋白表达水平极显著上升(P<0.01),TC组和TCZ组Drp1 mRNA和蛋白表达水平均极显著上升(P<0.01)。[结论]TNF-α和TNF-α+CHX处理均可诱导小鼠乳腺上皮细胞凋亡,TNF-α+CHX+Z-VAD-FMK处理可诱导小鼠乳腺上皮细胞发生程序性坏死。