叶酸对糖尿病小鼠视网膜的保护作用及其抗氧化应激机制

目的探讨叶酸对糖尿病小鼠视网膜的保护作用及其抗氧化和抗炎机制。方法采用随机数字表法将32只16周龄SPF级雄性db/db小鼠随机分为模型组和叶酸组,另选择16周龄SPF级雄性C57BL/KsJ小鼠16只作为对照,叶酸组小鼠用(2 ml)叶酸灌胃每日1次,剂量为71μg/kg,连续60 d;对照组和模型组小鼠以相同的方法给予相同体积的生理盐水,定期观察并记录各组小鼠运动、精神状态、体质量、空腹血糖(FPG)水平变化。灌胃结束后摘取小鼠眼球并分离视网膜;采用苏木精-伊红染色法评估各组小鼠视网膜组织病理学变化;收集小鼠球后血标本,采用ELISA法测定小鼠血清中同型半胱氨酸(Hcy)水平;采用实时荧光定量PCR法检测各组小鼠视网膜中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)mRNA水平;采用Western blot法检测小鼠视网膜中B淋巴细胞瘤2蛋白(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、3-硝基酪氨酸(3-NT)和4-羟基壬氨酸(4-HNE)水平变化;采用生化试剂盒检测小鼠视网膜中超氧化物歧化酶(SOD)活性、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)和丙二醛(MDA)含量;采用免疫荧光染色法测定视网膜中NADPH氧化酶4(NOX4)含量。结果实验期间对照组小鼠FPG正常,体质量缓慢平稳增加;模型组小鼠FPG>16.7 mmol/L,体质量快速增加,叶酸组小鼠FPG逐渐下降,体质量增加较模型组平缓。实验后2个月,模型组小鼠血清Hcy浓度为(27.18±3.18)μmol/L,高于对照组的(8.28±2.18)μmol/L和叶酸组的(13.73±2.54)μmol/L,差异均有统计学意义(均P<0.05);对照组小鼠视网膜结构完整,模型组小鼠视网膜厚度变薄,毛细血管生成增加,可见炎症细胞浸润,叶酸组小鼠视网膜厚度较模型组增加,新生血管和炎症细胞减少。模型组视网膜中TNF-α和IL-6 mRNA相对表达量均高于对照组,叶酸组视网膜组织中TNF-αmRNA、IL-6 mRNA相对表达量低于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。叶酸组小鼠视网膜中bax、3-NT和4-HNE蛋白相对表达量均高于对照组,但低于模型组,bcl-2蛋白相对表达量均低于对照组而高于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05);叶酸组小鼠视网膜中T-SOD活性高于对照组而低于模型组,视网膜中8-OHdG质量浓度和MDA含量均低于对照组而高于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05);叶酸组小鼠视网膜组织中NOX4蛋白表达明显弱于模型组。结论叶酸对糖尿病小鼠视网膜组织具有保护作用,其作用机制与降低血清Hcy水平、抑制视网膜组织中氧化应激反应细胞凋亡有关。

不同低氧胁迫方式构建SD大鼠高原肺水肿模型的比较研究

目的研究不同低氧胁迫方式构建高原肺水肿模型的效果。方法将60只SD大鼠随机分为3组:对照组(海拔400 m),低压氧舱组(模拟海拔6000 m低氧胁迫48 h),实地低氧组(海拔4200 m低氧胁迫28 d);每组20只。通过检测实验大鼠肺组织的干湿比、形态学和病理生理学特征、关键基因水通道蛋白1(aquaporin-1,AQP-1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达,以及氧化应激水平,比较不同低氧胁迫方式构建SD大鼠高原肺水肿模型的效果。结果与对照组相比,低压氧舱组和实地低氧组大鼠的肺动脉压和肺组织含水量均显著升高(均P<0.01),而氧分压及氧饱和度显著下降(均P<0.01)。对照组肺组织形态在光镜和电镜下均显示结构正常;低压氧舱组和实地低氧组肺组织在光镜下均可见肺泡壁且肺泡间隔明显增宽,大量红细胞和炎性细胞溢出,且在肺泡间隔出现明显水肿。两实验组大鼠肺组织中AQP-1 mRNA和蛋白水平均较对照组明显升高(均P<0.01),VEGF mRNA和蛋白水平均较对照组明显降低(均P<0.01),而且血清中谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平明显降低,丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平明显升高。结论低压氧舱模拟海拔6000 m低氧胁迫48 h,以及海拔4200 m实地低氧胁迫28 d,均可有效构建SD大鼠高原肺水肿模型;其中,应用低压氧舱构建SD大鼠高原肺水肿模型相对更占优势。

青海海西蒙古族藏族自治州农牧区生活饮用水检测结果分析

目的了解青海海西蒙古族藏族自治州农牧区牧民生活饮用水来源及水质卫生情况,为牧区饮用水资源保护提供科学依据。方法按照《地表水环境质量标准》(GB 3838-2002)和《生活饮用水卫生标准》(GBT 5750.2-2006)对海西蒙古族藏族自治州农牧区三县一市进行水样采集、水质分析和判定评价。结果青海海西蒙古族藏族自治州游牧民族生活饮用水基本符合生活饮用水卫生标准。水样中总氮含量超标频率较高(62.5%),略超出限值;部分水样检测总大肠菌群阳性(35.3%)和耐热大肠埃希菌群阳性(11.8%)。个别水样检测汞、钙含量和氯化物含量超标;1处水样检测钙含量偏低。结论当地牧区生活饮用水水质状况良好,水样中总氮含量和微生物检测超标频率较高。建议有关部门加强监管和教育,保障牧民的生活饮用水安全。