冬虫夏草菌在寄主钩蝠蛾幼虫中的潜伏侵染过程研究

冬虫夏草是青藏高原的特色名贵药材,是冬虫夏草菌Ophiocordyceps sinensis寄生于钩蝠蛾幼虫后形成的虫生子囊真菌,其发生机理和侵染途径至今未知。本文利用real-time q PCR实时定量技术检测了寄主蒲氏钩蝠蛾Thitarodes pui幼虫表皮、脂肪体、血淋巴和肠壁等组织中冬虫夏草菌定殖量,分别建立了起始于表皮的侵染路径(R20.678)和起始于肠道的侵染路径(R20.271)两种Holt数学模型,经比较分析后,推论冬虫夏草菌随口腔摄食侵染寄主幼虫的方式具有一定合理性和可行性,揭示冬虫夏草菌可以通过进食途径实现其对钩蝠蛾幼虫的带菌生长、侵染和寄生,从而为深入阐释冬虫夏草菌与寄主钩蝠蛾幼虫相互作用关系提供重要参考。

桑萜类生物合成酶HMGR的生物信息学分析

萜类化合物是桑叶具有药用功效的主要化学成分之一。利用Vector NTI Suit 8等工具,对GenBank中的桑萜类生物合成关键酶3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)基因的核苷酸和氨基酸序列进行了生物信息学分析。桑hmgr基因序列以基因组DNA形式登录,其中1-5 905 bp区间为该基因序列,包括启动子、CDS和内含子序列,推测其编码蛋白的分子式为C2602H4181N715O786S29,亚细胞定位于线粒体,存在跨膜结构域,且含有22个氨基酸的质体转运肽,是含有HMG-CoA-reductase-classⅠ重要功能域的疏水性蛋白,二级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主,三级结构中含有2个HMG-CoA和2个NADP(H)结合位点。

Fe^(2+),Cu^(2+),Zn^(2+)对植物生理特性影响的比较分析

以浸水处理为对照系统分析了Fe2+、Cu2+、Zn2+等金属离子对植物胁迫损伤相关的7个生理指标,并应用数理统计学和生物化学的相关原理和方法从氧自由基伤害的角度比较分析了这三种离子处理对植物生理特性的影响。结果表明:不同离子处理由于对植物造成的胁迫损伤不同,因而它们对植物生理特性的影响效应也有明显差异,并且这种差异与其所处理的离子胁迫性质间存在显著的关联性。

植物查尔酮异构酶的生物信息学分析

采用生物信息学方法和工具对GenBank中的洋葱、豌豆、番茄和茶等植物的黄酮类化合物合成关键酶查尔酮异构酶(CHI)的核酸和氨基酸序列进行了比对、分析和建模,进而对其分子结构、理化性质、亚细胞定位、蛋白转运肽、跨膜结构域、疏水性、分子系统进化、蛋白质二级和三级结构等重要参数进行了预测和推理。结果表明:该类酶基因的全长包括5′、3′非翻译区和一个开放阅读框,无蛋白转运肽,且定位于细胞质基质,是一个疏水性蛋白,二级结构均以随机卷曲和α-螺旋为主要构件,洋葱和豌豆的CHI三维建模成功。

microRNA在冠心病发生机制中的作用及其临床应用

冠状动脉性心脏病（简称冠心病）,及其最严重的并发症心肌梗死,已经成为人群最主要的死亡病因。其中,约有80%左右的心源性猝死是由冠状动脉粥样硬化性心脏病（AS）所引起的,而余下20%源于心肌病、左心室肥厚、Brugada综合征等疾病,如何降低冠心病的发病率、致残率和病死率一直是社会各界人士和科学工作者关注的焦点。

芽孢耐热机制探讨

芽孢耐热机制一直是一个非常重要的有待深入研究的基础理论问题。有关芽孢的强耐热原理已有许多讨论。从生物化学的角度探讨了芽孢生命活性物质热稳定性的产生机理。

冬虫夏草发生发育的生态响应

冬虫夏草(Ophiocordyceps sinensis)自然资源稀少且尚未实现人工培植,自然生态环境对冬虫夏草的发生发育至关重要。从冬虫夏草的发生发育过程、生长习性及生态响应、寄主钩蝠蛾昆虫的系统学与地理分布以及生长发育和食性等方面阐述了生态条件对冬虫夏草的影响,以有利于这一珍稀自然资源的保护和可持续开发利用。

H2O2与Fe^2＋、Cu^2＋、Zn^2＋协同作用对桑自由基伤害和保护酶活性的影响

研究了H2O2与Fe2+等金属离子产生的自由基胁迫对桑树生理特性的影响,旨在为桑树的抗逆栽培提供理论参考。以桑树叶片为材料,研究H2O2与Fe2+、Cu2+、Zn2+协同作用对桑自由基伤害和保护酶活性的影响。结果表明:经H2O2-Fe2+、H2O2-Cu2+和H2O2-Zn2+3种体系溶液处理的桑.OH含量分别提高34.38%、8.14%和5.43%;O2.-含量分别降低78.77%、54.75%和63.84%;1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)清除率分别降低44.60%、57.34%和54.64%;超氧化物歧化酶(SOD)活性分别提高44.45%、36.02%和28.28%;多酚氧化酶(PPO)活性分别降低68.18%、86.58%和54.78%;过氧化氢酶(CAT)活性分别降低97.46%、96.57%和68.02%;过氧化物酶(POD)活性分别降低22.22%、提高7.42倍和66.67%。H2O2与Fe2+等的协同作用破坏了桑细胞内自由基动态平衡,导致自由基含量提高,保护酶活性受到显著影响。

糖生物学——生物化学领域的广袤前沿

糖生物学是在以糖链为生物信息分子的水平上阐明多细胞生物生命现象的一门科学。本文介绍了糖生物学的研究内容以及发展现状和动向。

木本曼陀罗毛状根植株再生体系的建立

建立了木本曼陀罗(Datura arborea L.)毛状根的植株再生体系并对再生植株进行了初步检测。采用"一步法"诱导不定芽的适宜培养基为MS+6-BA2.0mgL-1+NAA0.2mgL-1;采用"两步法"诱导不定芽时,先在MS+6-BA4.0mgL-1+KT0.5mgL-1+2,4-D0.5mgL-1上诱导愈伤组织,然后在MS+6-BA4.0mgL-1+NAA0.2mgL-1上诱导愈伤组织分化不定芽。诱导不定芽的最适宜生根培养基为1/2MS+IBA0.1mgL-1。用PCR技术从再生植株叶片中得到了rolB、rolC目的基因片段。HPLC检测结果表明毛状根再生植株中莨菪烷类生物碱(Tropane alkaloids,TA)的含量较野生植株有明显的提高。

粘毛黄芩毛状根培养体系的建立及其黄芩苷的动态合成

目的:建立粘毛黄芩毛状根培养体系,并对其生长特性和次生代谢产物的合成进行初步探索。方法:采用卸甲型根癌农杆菌Agrobacterium tumofaciens C58C1感染粘毛黄芩无菌苗的茎段,获得毛状根,并得到了优质株系;测定了毛状根的生长曲线;利用PCR对毛状根进行T-DNA转化的检测及利用HPLC进行黄芩苷含量检测。结果:PCR检测结果表明,发根农杆菌Ri质粒的rolC基因已整合入粘毛黄芩毛状根基因组中。C58C1感染粘毛黄芩无菌苗茎段8 d后,毛状根陆续在其伤口处产生,28 d时幼茎产生毛状根的外植体达81%。1/2 MS液体培养32 d后毛状根干重增加了17.42倍,总黄酮和黄芩苷含量分别增加了21.60,25.56倍。结论:粘毛黄芩毛状根离体培养的建立为进一步进行药用活性成分的工业化生产奠定了基础。

水稻苯丙氨酸解氨酶的生物信息学分析

苯丙氨酸解氨酶(PAL)是水稻防卫反应中的关键蛋白,采用生物信息学工具和方法对GenBank中的日本晴水稻pal基因的核苷酸序列及其相应氨基酸序列进行预测和分析,获得了其分子结构、理化性质、系统演化和生物学功能等重要参数.结果表明:水稻pal基因序列只有开放阅读框,其编码蛋白亲水性较强,无跨膜转运肽,且定位于细胞基质,二级结构以随机卷曲和α-螺旋为主要构件,三维建模成功,并明确了多个功能位点.

粘毛黄芩CHS基因的克隆分析及其正反义植物表达载体的构建

目的:获得粘毛黄芩查尔酮合成酶(CHS)基因正反义植物表达载体,通过转化粘毛黄芩进一步探讨CHS在黄酮化合物生物合成途径上的作用机理。方法:通过RT-PCR从粘毛黄芩总RNA扩增出CHS基因目的片段,克隆至PMD18-T载体,测序并进行生物信息学分析。结果:测序证明序列正确,同时推测出CHS氨基酸序列及三维结构。克隆片段和pCAMBIA1304+载体用BlgII和BstE II双酶切,然后连接CHS基因目的片段及pCAM-BIA1304+载体大骨架片段,得到CHS正反义植物表达载体。结论:成功构建粘毛黄芩CHS基因正反义植物表达载体,并通过冻融法转化C58C1和LBA4404,为农杆菌介导的粘毛黄芩CHS基因对植物的遗传转化奠定基础。

心血管病学SCI文献的计量研究

心血管病被认为是现今最严重的慢性非传染性疾病,其相关的临床医学、基础医学和转化医学研究也成为当前的热点领域.利用Web of Science平台,检索SCI刊源1999~2012年间的心血管病学文献,并进行了国家或地区、基金资助机构、研究机构、出版年、研究方向和来源出版物等指标的归类整理和统计分析,可为该领域科研工作者了解学科进展、申报课题和发表论文提供参考.

非接触式激光多普勒血流成像技术对人手背部微循环血流的观察

目的应用激光多普勒血流成像技术观察人手背部微循环血流灌注量变化。方法采用非接触式激光多普勒血流成像仪检测10例健康成年人手背部的微循环血流灌注量。结果手背平均血流灌注量为60.72 PU,示指甲、大拇指甲、中指甲、无名指甲和小指甲中血流灌注量分别为(302.64±115.32)、(339.99±137.53)、(353.44±131.36)、(356.53±129.05)、(389.39±146.32)PU,大拇指、示指、中指、无名指、小指上部血流灌注量分别为(238.06±139.08)、(195.64±78.15)、(144.80±73.76)、(143.85±75.34)、(146.74±54.80)PU,大拇指、示指、中指、无名指、小指下部血流灌注量分别为(128.23±50.84)、(105.65±41.84)、(73.16±27.79)、(81.61±31.18)、(71.15±25.13)PU。结论应用激光多普勒血流成像技术可观察到人手背不同部位的表面血流灌注量存在差异,血流灌注量手指甲以示指甲最低而小指甲最高,上半部从大拇指到小指依次减少,下半部大拇指最高而小指最低。

虫草素抑制肺癌细胞增殖的体外研究

目的探究虫草素对肺癌细胞增殖的调节作用及其对细胞相应生理指标的影响。方法建立肺癌细胞体外培养体系,将生长状态良好的细胞进行分组,并分别与浓度为0、20、40、70、100、1 000μmol/L的虫草素共培养24h,通过MTT法测定肺癌细胞的增殖率,同时采用一氧化氮(NO)检测试剂盒测定各药物处理组细胞中NO的含量。结果20μmol/L及其以上浓度的虫草素能显著抑制肺癌细胞的增殖(P<0.01),显著降低肺癌细胞中NO的相对含量(P<0.05或0.01),且呈剂量依赖性。结论虫草素对肺癌细胞的增殖具有显著的抑制效果,且可能通过介导NO相关的信号途径抑制细胞增殖。

环加氧酶2基因的大肠杆菌表达与纯化

通过RT-PCR从肺癌细胞株A549克隆环氧化酶2(cyclooxygenase2,COX-2)基因全长1.8 kb,测序结果与已发表的一致;将该片段插入pET32-a(+)载体中,构建原核表达载体pET-32-COX-2,转入BL-21中,IPTG诱导重组融合蛋白his-COX-2表达,SDS-PAGE分析71kD处有特异条带,与理论相符;Western blotting验证为COX-2蛋白;用镍离子螯合柱(Ni-NTA)纯化融合蛋白,获得纯度较高的原核表达蛋白.为其新型抑制剂的研发与抗肿瘤作用蛋白疫苗的研制奠定基础.

血管紧张素转化酶结构与功能的生物信息学分析

目的血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE,EC 3.4.15.1)是人类血压控制系统的关键酶,其抑制剂也是广泛应用于临床的降压和心力衰竭治疗一线药物。方法本文采用Protparam等生物信息学方法和工具对ACE基因及其编码蛋白的序列特征、分子结构和理化性质等进行了预测分析。结果表明该基因的核苷酸序列全长2473 bp,包括3'-UTR、ORF和5'-UTR序列,其蛋白分子式C3752H5724N1020O1086S26,含732个氨基酸残基,以Leu含量最高,定位于分泌途径,含跨膜结构域,是一种含有21个碱基的质体转运肽和Glu Zincin功能域的疏水性不稳定蛋白质。其二级结构和三维模型解析完成,结果显示以随机卷曲和α-螺旋为主。结论本研究可为深入开展人ACE蛋白的酶学特性和血流动力学调节机制研究提供理论参考。

慢病毒载体介导的脂肪干细胞miR-1重组表达系统的构建

目的构建miR-1稳定过表达并且适于体内示踪的基因修饰大鼠脂肪干细胞(rASCs)模型.方法首先对体外培养的rASCs进行表型鉴定及成骨、成脂诱导分化;然后观察重组慢病毒转染rASCs过程中不同感染复数(MOI)及有无添加聚凝胺(polybrene)对报告基因萤火虫荧光素酶(FLuc)表达和活性的影响;最后采用qRT-PCR检测miR-1-3p和miR-1-5p的表达水平.结果通过观察FLuc介导酶促反应引起的生物发光筛选出最佳转染条件为MOI 60,且添加聚凝胺能增强慢病毒转染rASCs的效率;随后应用该条件转染rASCs构建miR-1稳定过表达模型,qRT-PCR结果显示miR-1-3p和miR-1-5p的表达水平分别升高了65.6倍和37.4倍(P<0.05),证实该模型构建成功.结论慢病毒载体能成功介导外源基因在rASCs中稳定过表达,并且报告基因FLuc催化底物产生的生物发光有利于进一步的体内示踪研究.总言之,本研究为基因修饰细胞模型的构建提供了方法学基础,并为心肌组织再生修复提供新的工程细胞株.

生物体内的信息管理

生物体内的信号转导对生命活动起着至关重要的作用。本文应用信息资源管理学和计算机网络通讯中的有关原理及方法对生物体内细胞信号转导的信息控制等问题进行了初步阐述。