原蛋白转化酶在转化生长因子β_1抑制HBV复制效应中的作用

目的:探讨原蛋白转化酶(PCs)在转化生长因子β1(TGFβ1)抑制HBV复制效应中的作用。方法:常规培养的HepG2.2.15细胞加2μg/L或5μg/L重组TGFβ1或/和20μmol/L PC抑制剂作用18h,收集细胞提取细胞总RNA和HBV衣壳DNA,采用荧光定量PCR技术检测PC mRNA和HBV DNA含量。结果:HepG2.2.15细胞的7种PCs均有不同程度的表达。加用重组TGFβ1后除PC5/6下调外,其余PCs均显著上调。尽管PC1/3和PC2上调最显著,但结合基础表达水平的分析显示furin和PACE4在TGFβ1处理前后均为优势表达PCs。在HepG2.2.15细胞上,进一步使用PC抑制剂可消除TGFβ1抑制HBV复制的效应。结论:上调PCs mRNA表达是TGFβ1抑制HBV复制的重要中间环节。此结果对进一步探讨TGFβ1有效干预HBV复制具有积极意义。

定量PCR检测慢性HBV感染者血清HBV-DNA含量

目的 了解不同慢性乙型肝炎病毒 (HBV)感染者血清HBV -DNA含量并探讨其临床意义。方法应用荧光能量转移定量聚合酶链反应 (QPCR)检测 2 4 5例不同临床类型慢性HBV感染者血清HBV -DNA含量。结果 HBeAg阳性患者HBV -DNA含量 ( 10 6 .2 2± 2 .0 5拷贝 /mL)显著高于HBeAg阴性 /抗 -HBe阳性患者的含量( 10 4.54± 1.84拷贝 /mL) (P <0 0 0 1) ;不同临床类型HBV感染者HBV -DNA含量 :慢性携带者 ,慢性肝炎 ,慢性重型肝炎 ,乙型肝炎肝硬化 ,四组间差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 HBV -DNA含量与HBeAg密切相关 ;

慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA含量与肝功能损害程度的关系

目的 了解慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA含量与肝功能损害程度的关系。方法 应用荧光能量转移定量聚合酶链反应检测233例慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA含量。结果 HBeAg阳性患者血清HBV DNA含量(10^(6.18±2.04)拷贝/毫升)显著高于HBeAg阴性/抗-HBe阳性患者的含量(10^(4.16±1.78)拷贝/毫升)(P<0.001);不同ALT水平的慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA含量无显著性差异(P>0.05);无黄疸组、轻度黄疸组、中度黄疸组、重度黄疸组的慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA含量分别为:(10^(5.56±2.02)拷贝/毫升)、(10^(5.38±1.84)拷贝/毫升)、(10^(5.46±1.92)拷贝/毫升)、(10^(5.34±1.98)拷贝/毫升),四组间无显著性差异(P>0.05)。结论 HBV DNA含量与HBeAg密切相关;病毒复制程度与肝功能损害程度无关。

MxA-88G/T和IFN-γ+874A/T位点多态性对地方流行区HBV感染自然转归的影响

目的:探讨常见影响乙型肝炎病毒(HBV)感染自然转归的宿主遗传因素在地方性流行区的作用。方法:收集华南地区100例HBV自限感染者(抗-HBs和抗-HBc均阳性)和340例慢性HBV感染者的外周全血,采用竞争分化聚合酶链反应技术为基础的方法进行MxA-88G/T和IFN-γ+874A/T基因分型。结果:MxA-88G/T的基因型在慢性HBV感染者和自限性感染者中的分布差异有高度显著性;与慢性感染患者相比,自限性感染者有较低的GG基因型(41.0%vs52.9%,P=0.036)和较高的TT基因型(16.0%vs2.4%,P=0.000)。然而,IFN-γ+874A/T的基因型在两组患者中的分布差异并无显著性;在慢性感染者和自限性感染者中,AA基因型分布率为65.0%vs72.8%(P=0.139),TT基因型为2.0%vs1.2%(P=0.894)。结论:常见影响HBV感染自然转归的宿主基因多态性在地方性流行区的作用有所改变,值得同类研究高度注意。

furin基因P1启动子区-229C/T多态性与肝硬化患者肝细胞功能的关系

目的:探讨furin基因启动子活性对肝硬化患者肝细胞功能的影响。方法:收集180例乙型肝炎肝硬化患者的血样和临床资料,采用竞争分化聚合酶链反应技术对furinP1启动子区单核苷酸多态性(SNP-229C/T)进行基因分型,并以其为活性指标分析启动子活性与肝脏血清酶学、胆红素、白蛋白和凝血酶原等水平的关系。结果:全部患者中,等位基因C的频率为75.3%(271/360),等位基因T的频率为24.7%(89/360),基因型CC、CT和TT的频率分别为62.2%(112/180)、26.1%(47/180)和11.7%(21/180)。SNP-229C/T基因分型与主要血清酶学、胆红素、白蛋白和凝血酶原等水平无关,而与碱性磷酸酶和γ-谷氨酰转移酶有关。结论:furin基因启动子的活性对肝细胞主要功能无影响,提示furin作为HBV感染的治疗新靶点具有一定的可行性。

恙虫病33例临床分析

恙虫病３３例临床分析中山医科大学附属第三医院传染科（５１０６３０）雷瑞祥，邓练贤恙虫病是由东方立克次体引起的一种急性传染病，其临床表现多样化，可出现多器官损害［１］，易造成误诊。我院１９９１～１９９５年收住恙虫病３３例，现分析报告如下。１临床资料１．...

昼夜节律紊乱与多囊卵巢综合征的关系

昼夜节律通过以24h为周期的生理振荡使机体适应外界环境变化,并起到调节能量代谢、炎症、细胞更新及肠道微生物群的作用,其功能紊乱会导致女性生殖能力下降。多囊卵巢综合征越来越多地被描述为一种遗传性多基因性状,在暴露于不良生活方式或环境危险因素后表现出来。研究表明现代生活方式中不健康的饮食和睡眠习惯可通过昼夜节律紊乱导致多囊卵巢综合征的发生,其机制可能涉及内分泌和生殖失衡(高雄激素)代谢改变(胰岛素抵抗、脂代谢异常)、胃肠道微生物组紊乱(生态失调)和遗传因素等。在维持昼夜节律稳定过程中发挥重要作用的基因被称为生物钟基因,可能是预防和治疗多囊卵巢综合征的新靶点。综述昼夜节律紊乱与多囊卵巢综合征发生发展的相关研究,旨在为未来研究及临床治疗提供参考。

广州地区流行性出血热58例临床与流行病学分析

目的 :为进一步了解近年广州地区流行性出血热 (EHF)的临床和流行病学特点。方法 :对 5 8例EHF患者的临床及流行病学资料进行综合分析。结果 :( 1)肝、肾损害发生率分别为 87 5 %和 92 9% ,分别有87 9%和 81%的患者出现蛋白尿和血小板减少 ;心电图改变发生率为 81 3 % ;( 2 )EHF病毒重叠乙型肝炎病毒(HBV)感染率高达 4 7 1% ( 2 4 5 1) ,但单纯感染组与重叠感染组比较 ,两组的肝损害发生率并无显著性差异 (P>0 0 5 ) ;( 3 )临床分型属重型和危重型共占 4 8 3 % ,但具有典型临床五期经过者仅为 3 9 7% ;( 4 )本病在春季( 1～ 3月 )多发 ,多见于男性青壮年民工和农民 ;18 9%病例病前有明确鼠类接触史。结论 :本地区EHF重型和危重型病例较多 ,病死率较高 ,近年收治病人逐年增多 ,应引起重视。

248例慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平与肝组织HBsAg/HBcAg表达的相关性研究

目的探讨慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平与肝组织病理学损害和HBsAg/HBcAg表达的关系。方法对248例慢性乙型肝炎患者进行肝穿刺活检,采用免疫组织化学法检测HBsAg和HBcAg,同时检测患者血清HBV DNA水平。结果在肝脏炎症程度G1～G4四组患者之间血清HBV DNA水平无显著性差异(P>0.05),肝纤维化程度S1～S4四组患者之间血清HBV DNA水平也无显著性差异(P>0.05);在肝组织HBsAg表达强度-～+++四组患者之间血清HBV DNA水平无显著性差异(P>0.05),而肝组织HBcAg随血清HBV DNA水平的增高而表达增强。结论慢性乙型肝炎患者肝组织炎症活动度和纤维化程度与血清HBV DNA水平无相关性。

散发性戊型病毒性肝炎142例临床分析

目的：探讨本院收治的散发性戊型病毒性肝炎（戊肝）的临床特点及其预后。方法：对经血清学检测证实的１４２例戊肝患者进行分析。结果：临床上戊肝患者黄疸较深，过半数病例血清胆红素（ＳＢ）≥１７０μｍｏｌ／Ｌ，伴随丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）大幅度升高，平均峰值为正常的３０～４０倍。各种慢性肝病患者重叠戊肝相当常见（４６％），其临床特点为：①黄疸的消退和肝功能的恢复较慢；②重症肝炎的发生率高（２３％）、并发症多、预后较差。结论：慢性肝病重叠戊肝患者的病情远较单纯戊肝严重，须及早明确诊断和积极治疗。

HBV相关慢加急性肝衰竭预后简易评分系统的建立

目的：建立 HBV 相关慢加急性肝衰竭（HBV -ACLF）严重度简易评分系统。方法收集620例 HBV -ACLF 患者的临床资料，选择肝性脑病、血清肌酐、血清总胆红素、凝血酶原活动度、感染、肝脏大小、腹水液平等7个临床指标，应用统计学方法并结合临床实际，确定各指标从0～4分评分界点，并累计总分。据此建立模型并确定诊断界点，对此评分模型进行验证。结果对HBV -ACLF 患者临床资料进行统计学分析，交互卡方检验确定各指标评分分值并建立模型。将500例患者分为生存组和死亡组。两组间评分差异有统计学意义（t ＝25．78，P ＜0．001）。受试者工作特征曲线（ROC 曲线）下面积0．963，最佳临界值9．5，灵敏度0.98，特异度0．83。120例患者对其进行验证，≥10分预后差，病死率为84．3％，≤9分组预后好，病死率为3．5％。两组病死率比较差异有统计学意义（χ^2＝72．2，P ＜0．001）。结论本评分系统可用于 HBV -ACLF 预后评估，具有简易、敏感、客观的优点。

慢性乙型肝炎血清透明质酸和抗-HBe与肝组织病理的相关性

目的： 探讨慢性乙型肝炎血清透明质酸（ Ｈ Ａ） 和抗 Ｈ Ｂｅ 与肝组织病理改变的关系。方法：对１７０ 例慢性乙型肝炎患者进行肝活检，观察肝组织病理分级（ Ｇ） 和分期（ Ｓ） 情况，同时检测 Ｈ Ａ 及肝炎病毒标志物。结果：①血清 Ｈ Ａ 与肝组织病理分级和分期关系密切，随着病理分级和分期的升高， Ｈ Ａ 也逐渐升高， Ｇ４ 、 Ｓ４ 的血清 Ｈ Ａ 分别比 Ｇ１ 、 Ｓ１ 显著升高（ Ｐ ＜ ０００１） 。②肝组织病理分级、分期与血清抗 Ｈ Ｂｅ 的出现情况也密切相关， Ｇ４ 、 Ｓ４ 的抗 Ｈ Ｂｅ 阳性率分别比 Ｇ１ 、 Ｓ１ 显著升高（ Ｐ ＜ ００５） ；③抗 Ｈ Ｂｅ 阳性者中 Ｈ Ａ 值显著高于抗 Ｈ Ｂｅ 阴性病人（ Ｐ ＜ ０００１） 。结论： Ｈ Ａ 与抗 Ｈ Ｂｅ 有一定的相关性，在 Ｈ Ａ 显著升高或／ 和抗 Ｈ Ｂｅ 阳性的慢性乙型肝炎病人中，其肝组织的炎症、坏死及肝纤维化的程度较严重。

HepG2.2.15细胞系中HBV复制相关抑制因素的变化

目的:研究HBV对其自身复制相关抑制因素的影响,为今后探索提高抗病毒治疗的疗效提供基础。方法:采用实时荧光定量RT-PCR技术检测原蛋白转化酶(PCs)、肝细胞核因子(HNF)3β和转化生长因子(TGF)β1等HBV复制相关抑制因素的mRNA表达,采用Western印迹技术检测部分PCs的蛋白表达,通过比较模型细胞HepG2.2.15和其前体细胞HepG2的表达差别来判断HBV对其自身复制相关抑制因素的影响。结果:HepG2.2.15和HepG2细胞均相对高表达furin和PACE4,但HepG2细胞还高表达PC1/2。与HepG2细胞相比,HepG2.2.15细胞的PC1/3和PC7/8在mRNA水平显著被下调(均P<0.05),且PC1/3在蛋白水平的表达也显著减少。HepG2.2.15细胞的HNF3β和TGFβ1的mRNA表达水平也发生了显著改变,分别增加到5.22倍和降低到0.35倍。结论:HBV的存在对其自身复制相关抑制因素可产生显著影响。下调部分PCs和TGFβ1表达可能有利于HBV自身复制,但上调HNF3β的意义值得深入研究。

大型轴件的阻尼油封区表面银钎焊非等强修复

某大型42CrMo4+Ni+V轴件的阻尼油封区因故产生了表面损伤。为恢复受损区油封功能和几何尺寸,采用银钎焊工艺进行表面非等强修复。首先,制作模拟样棒,制定预焊接工艺规程,按照该规程进行了评定试验。对模拟样棒焊前焊后的相同部位进行了拉伸、冲击、硬度试验和金相组织观察。分析得出,热影响区范围约为2 mm,采用银钎焊修复对母材组织和力学性能的影响很小,用于表面损伤的非等强修复是可行的。最后,将该工艺成功用于大型轴件阻尼油封区表面损伤的实际修复。

干旱胁迫对远志愈伤组织次生代谢产物含量及抗氧化酶活性的影响

以远志愈伤组织为试材,使用不同浓度PEG 6000溶液模拟干旱胁迫,浓度指标分别为5%、10%、15%、20%、30%,以蒸馏水为对照,研究了干旱胁迫对于远志愈伤组织生长量、总酚、总黄酮、远志·酮Ⅲ含量及抗氧化酶活性的影响,以期为揭示远志愈伤组织应对干旱胁迫的机制和远志愈伤组织次生代谢产物的规模化生产提供参考依据。结果表明:在不同程度的干旱胁迫下,远志愈伤组织生长量、总酚、总黄酮、远志·酮Ⅲ含量及抗氧化酶活性差异较大。随着PEG 6000溶液浓度的增加,远志愈伤组织的鲜质量、干质量、总黄酮含量及过氧化物酶(POD)活性基本呈现先增加后减少的趋势;总酚含量、远志·酮Ⅲ含量基本呈现逐渐降低的趋势;超氧化物歧化酶(SOD)活性呈现先降低后升高的趋势;过氧化氢酶(CAT)活性基本呈现逐渐升高的趋势,说明一定程度的干旱胁迫对于远志愈伤组织生长及其次生代谢产物的积累有一定的促进作用。

水杨酸对秦艽愈伤组织总酚·总黄酮含量及抗氧化酶活性的影响

[目的]研究添加不同浓度的水杨酸(SA)对秦艽愈伤组织生长量、总黄酮、总酚含量及抗氧化酶活性的影响。[方法]以秦艽种子为原材料诱导出秦艽愈伤组织,在秦艽愈伤组织的继代培养中加入0、10、50、100、150、200μmol/L的SA,暗培养25 d后,测定秦艽愈伤组织的生长量、抗氧化酶活性和总黄酮、总酚含量。[结果]与对照组相比,当SA浓度为150μmol/L时秦艽愈伤组织鲜重达到最大值,SA浓度为100μmol/L时秦艽愈伤组织干重达到最大值,分别为2.8635、0.2017 g,显著高于对照组的鲜重和干重(P<0.05)。秦艽愈伤组织SOD活性在SA浓度为150μmol/L时达到最大值,为183.95 U/g,是对照组的2.44倍;CAT活性在SA浓度为200μmol/L时达到最大值,为22.44 U/mg,是对照组的2.56倍;当SA浓度为200μmol/L时,POD活性虽有所上升,但仍然显著低于对照组(P<0.05),为61.16 U/mg,是对照组的0.40倍。SA浓度为100μmol/L时,秦艽愈伤组织总黄酮含量达到最大值,为0.77 mg/g,是对照组的1.35倍;SA浓度为50μmol/L时,总酚含量达到最大值,为0.98 mg/g,是对照组的1.31倍。[结论]一定浓度的SA处理下,有利于秦艽愈伤组织的生长和干物质的积累;适当浓度的SA对秦艽愈伤组织SOD、CAT活性有促进作用,而添加SA会对POD活性有抑制作用;当添加SA浓度为100、50μmol/L时,分别有利于秦艽愈伤组织中总黄酮、总酚含量的积累。

不同处理对远志种子萌发和幼苗生长的影响

目的探索不同处理对远志Polgala tenuifolia Willd.种子萌发和幼苗生长的影响。方法测定种子净度、吸水率。以未超声处理和蒸馏水浸泡为对照,观察并测定经超声处理和不同植物生长调节剂浸泡后的远志种子发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数和幼苗根长及株高、干重、湿重的变化。结果种子净度为80.42%,吸水率为自然风干种子的1.77倍。种子的最佳处理条件为超声时间20 min,温度70℃,输出功率200 W。10~30 mg/L 2,4二氯苯氧基乙酸,150、200、250 mg/L水杨酸和不同浓度细胞激动素对种子萌发有着不同程度的促进作用,其中以150 mg/L水杨酸效果最好,发芽率为对照组的1.123倍。不同质量浓度2,4二氯苯氧基乙酸对幼苗生长均有不同程度的抑制作用。不同质量浓度水杨酸和细胞激动素对幼苗生长有不同程度的促进作用。3种外源激素总体效果为细胞激动素优于水杨酸优于2,4二氯苯氧基乙酸。结论该方法能有效提高种子萌发率及成苗率,对远志的种苗培育和人工栽培具有重要的的现实指导意义。

远志内生真菌分离与鉴定研究

目的通过对远志内生真菌分离与鉴定揭示远志内生真菌群落结构的生态性,掌握远志内生菌资源状况和远志生长年限、定殖部位的关系。方法以陕西省合阳县不同生长年限远志为研究材料,分离远志根、茎、叶中内生真菌,通过形态培养结合ITS序列分析,对内生菌进行鉴定,并对不同生长年限、不同定殖部位分离内生真菌进行生态指数分析。结果从远志中共分离得到远志内生真菌19属36种,其中镰刀属(Fusarium)和链格孢属(Alternari)为远志优势属,所占比例分别为25.00%、11.11%,3年生远志内生真菌丰富度、均匀度、优势度均达最高。结论远志根、茎、叶中分别得到内生真菌18属31种、18属32种、10属15种,其中远志茎含内生真菌丰富度、均匀度、优势度最高,远志根中镰刀属所占比例最高。

窝儿七的光合作用与环境因子间的关系研究

目的研究窝儿七叶片光合响应特征及光合参数日变化与环境因子之间的关系。方法运用便携式光合测定仪测定窝儿七叶片光合参数日变化并运用Excel 2007和SPSS 20.0软件进行正交数据处理分析。结果窝儿七叶片净光合速率(P_(n))日变化、气孔导度(G_(s))日变化均呈“单峰”曲线,存在微弱的“光合午休”现象;净光合速率最大值为16.21μmol·m^(-2)·s^(-1),气孔导度在11时达到最大,其最大值为0.56μmol·m^(-2)·s^(-1)。净光合速率(P_(n))与主要影响因子光合有效辐射(PAR),细胞间CO_(2)浓度(C i),蒸腾速率(T_(r)),气孔导度(G_(s))呈正相关,与空气相对湿度(RH),气孔限制(L_(s))呈负相关。结论窝儿七为气孔限制型植物,净光合速率存在微弱的“光合午休”现象,光合有效辐射、胞间CO_(2)浓度、蒸腾速率、气孔导度是影响窝儿七叶片净光合速率(P_(n))的主要影响因子。此研究对窝儿七栽培提供了科学的参考依据、提高药材质量和产量,对窝儿七栽培以及发展具有重要意义。