两种孤独症谱系障碍大鼠模型的构建及比较

目的:构建并比较丙戊酸钠(valproic acid,VPA)或脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的孤独症大鼠模型,为孤独症研究中动物模型的选择提供科学依据。方法:采用孕中期腹腔注射VPA(G12.5)及LPS(G9.5)的方法分别构建VPA或LPS诱导的子代孤独症大鼠模型(n=28);监测子代生长发育情况;行为学检测子代大鼠孤独症样行为;ELISA检测LPS模型组子代大鼠血浆炎性细胞因子的表达;Western blot检测VPA模型组子代大鼠前额叶皮质PTEN、p-AKT及p-m TOR蛋白表达水平;高效液相色谱法检测VPA模型组子代大鼠前额叶皮质中5-HT的浓度。结果:2种动物模型均表现出一定程度的发育迟缓,并出现孤独症相关的行为改变。其中,VPA模型组孕鼠生育率有所降低,但无统计学差异(χ2=3.352,P=0.067),仔鼠死亡率明显升高(χ2=5.561,P=0.018),仔鼠尾部畸形率高达87.8%,明显高于对照组(χ2=79.109,P=0.000)。LPS处理组子代大鼠血浆白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β、干扰素(interferon,IFN)-γ及肿瘤坏死因子(tumour necrosis factor,TNF)-α浓度均明显升高(t=2.108,P=0.049;t=2.312,P=0.033;t=2.809,P=0.016;t=2.110,P=0.049)。VPA处理组子代大鼠前额叶皮质PTEN蛋白表达水平下调(t=13.320,P=0.006),p-AKT、p-m TOR蛋白表达水平增加(t=4.633,P=0.044;t=7.984,P=0.015),5-HT浓度较未处理组明显降低(t=2.145,P=0.049)。结论:2种不同处理大鼠模型均可诱导孤独症样行为,但诱导机制可能存在差异,在科学研究中需要根据研究目的作出适当选择。

脂多糖诱导孤独症样大鼠的肠道通透性及肠道黏膜免疫系统的变化

目的探讨孕期LPS诱导的孤独症大鼠肠黏膜通透性及肠道区域免疫相关细胞比例的变化。方法 SD大鼠妊娠第9.5天时,腹腔注射脂多糖(lipopolysac-charide,LPS)构建LPS诱导的子代孤独症大鼠模型。生后第7、14、21、28、35天监测仔鼠的体质量。三箱社交实验、旷场实验、嗅觉适应/去适应实验、水迷宫实验检测子代大鼠孤独症样行为。ELISA检测子代大鼠血清DAO、zonulin、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ的含量;流式细胞仪检测脾、肠系膜淋巴结(MLN)、Peyer’s结(PP结)中B细胞、树突状细胞(DCs)、Treg细胞、T细胞、肠上皮间淋巴细胞(IELs)及肠道黏膜固有层淋巴细胞(LPLs)的比例。结果 LPS处理组子代大鼠可出现社会交互障碍、交流障碍、在陌生环境中的自主探索行为减少、空间学习记忆功能降低等孤独症相关的行为改变。LPS组的仔鼠血清DAO(P<0.01)、zonulin(P<0.05)含量较未处理组显著升高。同时发现LPS组仔鼠脾脏、MLN中的Treg细胞比例较未处理组显著减少(P<0.05)。在MLN及PP结中,LPS组仔鼠的B细胞、树突状细胞、T细胞、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞比例显著升高(P<0.05)。而LPS组仔鼠脾脏中的B细胞、树突状细胞、T淋巴细胞、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞的比例却与未处理组无显著差异。LPS组仔鼠IELs中的CD8^+TCRγδ^+T细胞的比例较未处理组明显升高(P<0.05),而LPLs中的CD4^+TCRαβ^+T细胞、CD8^+TCRαβ^+T细胞的比例却显著降低(P<0.05)。LPS组仔鼠血清中的细胞因子IL-6、TNF-α、IFN-γ较PBS组增高,而IL-10较PBS组降低。结论孕期LPS诱导可导致大鼠孤独症样行为,同时引起肠道通透性增加,肠黏膜集合淋巴组织(MLN、PP结)淋巴细胞比例增加,IELs比例升高,而LPLs中的T细胞比例降低,分泌促炎因子的T细胞功能增强,CD25^+Foxp3^+Treg细胞的抗炎功能被抑制。提示LPS诱导的孤独症模型大鼠可能会同时伴有肠道黏膜免疫异常应答现象。

孤独症谱系障碍患儿胃肠道症状与行为表现关系研究

目的探讨孤独症谱系障碍（ASD）患儿胃肠道症状的发生情况及其与核心症状和问题行为的关系。方法本研究为现况调查，依据精神疾病诊断及统计手册第五版（DSM-5）诊断标准，纳入2013年8月至2016年10月在重庆医科大学附属儿童医院发育与行为中心就诊和重庆市多家特殊训练机构的328例ASD患儿及202名正常儿童作为对照组，采用问卷调查儿童胃肠道症状和行为问题发生情况，采用儿童孤独症评定量表（CARS）、孤独症儿童行为检查量表（ABC）、Gesell发育量表对ASD患儿进行症状及智力发育评估，采用t检验和χ2检验分析ASD患儿胃肠道症状与行为表现。结果ASD组胃肠道症状总检出率明显高于正常对照组[49.4%（162/328）比25.7%（52/202），χ2=29.039，P=0.000]，并且便秘[33.2%（109/328）比13.9%（28/202）]、腹泻[9.5%（31/328）比1.5%（3/202）]、恶心呕吐[9.5%（31/328）比3.5%（7/202）]和大便恶臭[16.5%（54/328）比5.0%（10/202）]检出率均明显高于对照组（P均〈0.05）。男性和女性ASD患儿胃肠道症状检出率分别为46.7%（133/285）和46.5%（20/43），差异无统计学意义（χ2=0.006，P=0.938）。不同年龄ASD患儿胃肠道症状检出率的组间差异无统计学意义（χ2=1.907，P=0.862）。将ASD患儿根据胃肠道症状发生情况分为胃肠道症状阳性组（162例）和胃肠道症状阴性组（166例）,两组Gesell发育量表评分差异无统计学意义（P均〉0.05）。与胃肠道症状阴性组相比，胃肠道症状阳性组在ABC量表躯体运动（B）方面得分明显较高[（16.4±9.3）比（12.3±6.7）分，t=2.258，P=0.028],情绪问题检出率明显较高[63.6%（103/162）比49.4%（82/166），χ2=6.707，P=0.010]，行为问题评分明显高于胃肠道症状阴性组[（35.3±16.8）比（16.1±13.6）分，t=5.748，P=0.000]。结论ASD患儿的胃肠道症状发生率较正常儿童高，有胃肠道症状的ASD患儿具有更严重的重复刻板行为、问题行为及情绪问题，提示临床干预中ASD患儿的胃肠道问题不容忽视，多学科综合治疗对ASD患儿的康复具有重要意义。

如何提升英语阅读能力——以《简爱》阅读为例

提升英语阅读实效,必须具备英语阅读的能力。大量的英语阅读帮助我们强化语感,积累词汇,深化对句型段落的理解,在英美文学的鉴赏中获得审美满足感,也逐渐积淀人文素养。本文以简爱为例探讨英语阅读能力的提升策略。《简爱》作为女性文学创作中的一抹亮色,描述的是简·爱这位并不漂亮,地位又低微的女性不服从命运,与屈辱抗争,崇尚自由平等,大胆追求爱情的故事。阅读的最终目的是感悟品位简·爱身上洋溢着强烈的女性自我意识,独立自强,自尊自爱。