重组降血压肽IYPR的分离与稳定性研究

研究了大肠杆菌表达的降血压肽IYPR(Ile-Tyr-Pro-Arg)的分离纯化过程,并分析了其活性稳定性。大肠杆菌细胞经过超声提取和亲和层析得到重组蛋白,然后经过肠激酶和胰蛋白酶酶切、凝胶过滤得到肽IYPR,测定了IYPR经过不同的温度、pH和消化道酶处理后的活性变化。结果表明,亲和层析后重组蛋白的纯度达到了约90%,肠激酶酶切重组蛋白后利用透析法将串联多肽IYPR和6×His标签成功分离,串联多肽经过胰蛋白酶酶切和凝胶过滤后得到了单体肽IYPR。IYPR在90℃处理1 h时,其活性为原来的98%,在pH为2～10的水溶液处理5 h时活性保持不变,经过胃蛋白酶消化后,其活性升高了13%。这些特性为重组降血压肽IYPR作为高血压病的防治药物的深入研究提供了参考。

猴头菌发酵液抑制非酶糖基化反应的培养基优化

以非酶糖基化反应抑制率为评价指标,采用单因素实验筛选影响猴头菌(Hericium erinaceus)发酵液活性的培养基成分,结果表明,①木糖替换PD培养基中葡萄糖,②红豆或绿豆替换PD中马铃薯,③PD添加酵母浸出汁、NaH2PO4·2H2O、维生素B2均可提高抑制率;并在此基础上利用响应面和BoxBehnken Design进一步优化猴头菌液态发酵培养基,当培养基组成为240.50g/L红豆,173.41g/L绿豆,19.49g/L木糖,4.72g/L酵母浸出汁,1.30g/L NaH2PO4·2H2O,56.89mg/L维生素B2,用于猴头920发酵,发酵液对非酶糖基化反应抑制率为(88.51±3.23)%,基本与模型预测值相符,较未优化提高了214%。