靶向PD-L1/TGF-β双特异性抗体N538位点糖基化差异研究

目的:研究N538位点糖基化差异对靶向PD-L1/TGF-β双特异性抗体高级结构及体外活性的影响,为产品质量控制策略的制定提供参考依据。方法:采用疏水层析法(HIC)分离得到具有糖基化差异的样品,并通过圆二色性(CD)、差示扫描量热法(DSC)等技术对其结构进行表征,通过表面等离子共振技术(SPR)研究其对TGF-β1的亲和力,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)以及报告基因法(RGA)进行体外活性研究。结果:研究得到了具有糖基化差异的样品,结果证明N538位点糖基化对双特异性抗体的圆二色性、热稳定性、亲和力以及TGF-β1抗原结合活性和细胞内结合TGF-β1的相对活性均无明显影响。结论:N538位点糖基化并不影响靶向PD-L1/TGF-β双特异性抗体产品的质量,因此在生产过程中可不对N538位点糖基化程度进行控制。