预置双J管在宫颈癌根治术中对输尿管损伤的保护作用

目的研究预置双J管在预防宫颈癌根治术中输尿管损伤的意义。方法回顾性分析本院2014年1月至6月行宫颈癌根治术的157例患者的临床资料,80例术前预置双J管,77例术前未置双J管,应用SPSS 19.0软件,使用两独立样本t检验及Fisher确切概率法分析研究数据。结果 80例术前预置双J管患者无一例发生输尿管损伤,77例术前未置双J管患者中5例发生输尿管损伤,术后置入双J管后好转出院,两组比较差异具有显著性。结论术前预置双J管,能有效预防输尿管损伤。

东北地区女性生殖系统发育异常594例临床病例研究

目的分析女性生殖系统发育异常的临床特点,对于妊娠的影响及不同的影像学诊断准确率,以提高临床实际工作中对该类疾病的认知及诊疗。方法回顾性分析研究该院10年间(2002年9月—2012年9月)住院接受手术治疗的生殖系统发育异常的女性患者。结果 (1)594例患者共表现生殖器官发育异常类型774例次,在594名患者中生殖系统单器官发育异常为441人,占74.24%(441/594),有7人表现出3重器官发育异常,占1.18%(7/594);发育异常类型中子宫发育异常最多,占65.50%(507/774),输卵管发育异常、卵巢发育异常、宫颈缺如所占比例最小,各为0.13%(1/774);(2)就诊年龄最小者为出生后8个月,最大者为61岁,平均年龄26岁,中位年龄为34.5岁,年龄分布主要集中在青春期生育期,造成患者就诊较多的原因为腹痛20.03%(119/594),异常妊娠(反复自然流产、胚胎停止发育等)25.93%(154/594),原发不孕12.46%(74/594),原发闭经11.11%(66/594)等原因;(3)594例患者中有53例患者存在不同程度的泌尿系统发育异常,占8.92%(53/594),265位患者既往曾经历原发不孕、自然流产、胚胎停止发育、早产、胎死宫内或异位妊娠等不良孕产事件发生;(4)在现有的辅助检查技术中,超声有着不可替代的作用,甚至接近手术确诊率。在该研究中尤其在子宫发育异常中阳性率更是达到88.15%,但由于其显像技术的局限性,对于阴道发育异常,尤其是阴道纵隔、横隔、斜隔等阴道腔内发育异常,总检查阳性率较低,在检查阳性率上不如MRI具备准确性。结论在女性生殖系统发育异常中,各类子宫发育异常较为常见,其中纵隔子宫的发病率最高,生殖系统发育异常对于女性生育及精神心理影响重大,超声筛查法经济简便,可及时发现生殖系统的异常,及时治疗,根据异常类型采取个体化手术方案矫治,减少其对妊娠生理及心理造成的影响。

P21基因rs3176352位点多态性与东北地区汉族女性子宫内膜癌发病风险无关

目的研究P21基因rs3176352位点多态性与东北地区汉族女性子宫内膜癌之间的关系。方法通过测序及限制性片段长度多态性聚合酶链反应方法，对263例子宫内膜癌患者及315例健康人外周血DNA的P21基因rs3176352位点进行基因型分型。结果rs3176352位点c等位基因频率在病例组与对照组中无显著差异（P=0．492）。rs3176352位点CC基因型频率在病例组和对照组中分别为0．114和0．098。多因素logistic回归分析提示，cc基因型与GG基因型相比，患子宫内膜癌的风险无明显增加（OR=1．226，95％CI：0．698～2．153，P=0．479），经校正后仍无显著差异（P=0．406）。并且rs3176352位点不同基因型与子宫内膜癌分化程度无明显联系（P=0．743）。结论在东北地区汉族女性中。P21基因rs3176352位点的多态性与子宫内膜癌的发生风险无明显关联。

P21基因rsi059234位点多态性与东北地区汉族女性子宫内膜癌发病风险相关性

【目的】研究 p21基因 rs1059234位点多态性与东北地区汉族女性子宫内膜癌之间的相关性。【方法】通过测序及PCR-RFLP方法，对263例子宫内膜癌患者（观察组）及315例健康人群（对照组）的外周血DNA的 p21基因 rs1059234位点进行基因型分型，并分析分型与子宫内膜癌之间的相关性。【结果】观察组中 rs1059234位点C等位基因频率较对照组明显升高（P ＝0．039）。rs1059234位点 CC基因型频率在观察组中与对照组相比呈明显升高趋势（0．335vs 0．219，P＝0．045），CC基因型增加子宫内膜癌的风险（OR＝1．589，95％ CI：1．010～2．502），但是经回归分析校正后，CC 基因型并不增加子宫内膜癌的风险（OR＝1．623，95％ CI：0．720～3．659，P＝0．243）。【结论】在东北地区汉族女性中，p21基因 rs1059234位点的多态性与子宫内膜癌的发生风险无明显关联。

NK4基因转染对裸鼠人卵巢癌种植瘤生长的影响

目的 NK4不仅具有肝细胞生长因子(HGF)拮抗剂的作用,而且具有抗血管生成作用。该实验通过在人卵巢癌细胞SKOV-3中转染NK4cDNA片段,研究NK4在裸鼠体内对人卵巢癌的治疗作用。方法 NK4和荧光霉素(luciferase)表达质粒分别转染人卵巢癌细胞SKOV-3,稳定转染后,得到SKOV-3/NK4细胞和对照(SKOV-3/LUC)细胞。检测NK4在细胞培养基中的表达情况以及经不同培养基(SKOV-3、SKOV-3/LUC和SKOV-3/NK4培养基上清)培养后SKOV-3细胞中c-Met和磷酸化-c-Met的表达,检测三组肿瘤细胞(SKOV-3、SKOV-3/LUC和SKOV-3/NK4)体外生长速度,建立裸鼠皮下肿瘤生长模型,比较三组肿瘤细胞在裸鼠体内的生长速度。结果在SKOV-3/NK4培养基中有NK4蛋白表达,对照(SKOV-3和SKOV-3/LUC)细胞中无表达。磷酸化-c-Met在SKOV-3/NK4培养基培养的SKOV-3细胞中被抑制,而在对照(SKOV-3和SKOV-3/LUC)细胞培养基培养的SKOV-3细胞中正常表达。c-Met表达在各组无差别。三种细胞体外生长曲线差异无显著性(P>0.05)。一周后SKOV-3/NK4细胞接种的肿瘤生长缓慢,SKOV-3和SKOV-3/LUC细胞接种的肿瘤生长迅速,与SKOV-3/NK4组相比有统计学意义(P<0.05)。结论 NK4蛋白在SKOV-3/NK4细胞培养基中大量分泌,NK4能抑制人卵巢癌细胞c-Met受体磷酸化。在裸鼠体内NK4能抑制卵巢癌细胞生长,NK4可作为卵巢癌基因治疗的新方法。

IDO基因转染宫颈癌细胞SiHa在体外抑制NK细胞杀伤作用的研究

目的通过IDO基因转染,研究IDO在体外对NK细胞杀伤能力的抑制作用。方法 IDO蛋白表达和空白质粒分别稳定转染至人宫颈癌细胞SiHa,应用Western blot检测IDO在SiHa、SiHa/Mock和SiHa/IDO细胞中的表达情况,用MTT试剂盒检测3组肿瘤细胞体外生长速度和对NK细胞杀伤作用的敏感性。结果 IDO蛋白在Si-Ha/IDO细胞中表达阳性,在SiHa和SiHa/Mock细胞中无表达。3组肿瘤细胞体外生长曲线无统计学差异,P>0.05。SiHa/IDO细胞存活的百分比高于其他2组对照(SiHa和SiHa/Mock)细胞,P<0.05。结论 IDO对宫颈癌细胞体外生长速度无影响,但可抑制宫颈癌细胞SiHa对NK细胞杀伤作用的敏感性。因此,IDO不仅可以作为宫颈癌判断预后的指标,同时也可以作为宫颈癌基因治疗的潜在新靶点。

全阴道切除及乙状结肠阴道成形术治疗早期阴道癌的术式探讨

目的回顾性评价全阴道切除术及乙状结肠阴道成形术在早期阴道癌患者中的治疗价值。方法严格选取2010年1月-2011年12月诊断为早期阴道癌并且有性生活需求的女性患者2例,采用全阴道切除术治疗,并同时采用乙状结肠法进行阴道重建,评价手术时间、术中出血、术中术后并发症及术后性生活满意程度。结果患者平均手术时间为(275.0±49.5)min,平均出血量为(297.5±24.7)ml,2例患者手术后均恢复良好,随访过程中无手术晚期并发症,无复发。采用乙状结肠法进行阴道重建后,2例患者均未出现阴道狭窄,术后性生活满意,女性性功能评分(FSFI)平均为(27.2±1.34)。结论尽管全阴道切除术对手术技术要求较高,目前应用相对较少,但全阴道切除术仍是早期阴道癌手术治疗方法中的重要手段。对于有性生活需求的患者,全阴道切除术及乙状结肠阴道成形术是治疗早期阴道癌的理想方法。

shRNA沉默IDO基因的表达对裸鼠卵巢癌腹水瘤生长的影响

目的:IDO(indoleamine2,3-dioxygenase,IDO)是色氨酸代谢途径中的催化酶,其与肿瘤免疫抑制关系密切。本研究通过shRNA沉默IDO基因表达,研究抑制IDO表达在裸鼠体内对人卵巢癌移植瘤的治疗作用。方法:shRNA沉默IDO基因表达质粒和空白质粒分别稳定转染至人卵巢癌细胞SKOV-3,应用Westernblot检测IDO在SKOV-3,SKOV-3/Mock和SKOV-3/shIDO细胞中的表达情况,用MTT试剂盒检测3组肿瘤细胞体外生长速度。种植3组肿瘤细胞于裸鼠腹腔内,建立裸鼠卵巢癌腹水瘤模型,用Kaplan-Meier方法比较SKOV-3/Mock和SKOV-3/shIDO细胞接种所形成的腹水瘤裸鼠的累积生存率的差异。结果:IDO蛋白在SKOV-3/shIDO细胞中表达被抑制,在SKOV-3和SKOV-3/Mock细胞中有表达。3组肿瘤细胞体外生长曲线无统计学差异(P>0.05)。腹腔内接种SKOV-3/Mock细胞的裸鼠,均产生腹腔内转移伴腹水形成,于50天内相继死亡,而接种SKOV-3/shIDO细胞的裸鼠生存期均大于77天,此差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论:本研究应用shRNA沉默IDO基因表达质粒稳定转染卵巢癌细胞SKOV-3,获得IDO无表达卵巢癌细胞SKOV-3/shIDO,抑制IDO表达对卵巢癌细胞体外生长速度无影响,但能抑制卵巢癌细胞腹腔内转移和腹水形成,提高累积生存率,改善预后。因此,IDO可以作为卵巢癌基因治疗的新靶点,shRNA沉默IDO基因表达可以作为卵巢癌治疗的新方法。

特异性siRNA抑制XIAP基因表达对人内膜癌细胞凋亡的影响

【目的】探讨RNA干扰抑制内膜癌RL95-2细胞XIAP基因表达及对细胞凋亡的影响。【方法】设计并合成XIAP基因特异性siRNA，转染人内膜癌RL95-2细胞，Real time RT-PCR检测转染后XIAP mRNA的变化，Western Blot检测 XIAP蛋白的变化，MTT 及流式细胞仪法检测细胞增值和凋亡的变化。【结果】XIAP siRNA转染后，特异性转染组mRNA转录量的相对倍数值为0．04±0．06，相对蛋白表达量分别为0．590±0．178，较各对照组明显减少（P＜0．05）；特异性转染组细胞生长抑制率为（47．86±4．46）％，较对照组明显增高（P＜0．05）。【结论】体外实验表明，合成的 siRNA能在mRNA水平及蛋白水平有效抑制人内膜癌RL95-2细胞内 XIAP基因的转录及表达，进而显著的促进内膜癌细胞凋亡，其促凋亡机制仍有待进一步研究。

复发性卵巢癌的局部治疗进展

卵巢高级别浆液性乳头状癌是临床常见的病死率较高的一种女性生殖系统恶性肿瘤,尽管初始治疗后90%的患者能达到完全缓解,但最终近80%的患者疾病复发,复发性卵巢癌病情多样而复杂,为临床治疗带来困难。本文对手术、放疗、灌注治疗等技术在复发性卵巢癌患者局部治疗中的应用进行综述,从而为临床医生的治疗决策提供参考意见。

NK4基因转染对裸鼠卵巢癌腹水瘤生长影响及其机制的探讨

目的在人卵巢癌细胞SKOV-3中转染NK4cDNA片段,研究NK4在裸鼠体内对人卵巢癌的治疗作用。方法 NK4和荧光霉素(luciferase)表达质粒分别转染人卵巢癌细胞SKOV-3,稳定转染后,得到SKOV-3/NK4细胞和对照(SKOV-3/LUC)细胞。检测NK4在细胞培养基中的表达情况以及经不同培养基(SKOV-3、SKOV-3/LUC和SKOV-3/NK4培养基上清)培养后SKOV-3细胞中c-Met和磷酸化-c-Met的表达,检测三组肿瘤细胞(SKOV-3/LUC和SKOV-3/NK4)体外生长速度,建立裸鼠卵巢癌腹水瘤模型,用Kaplan-Meier方法比较SKOV-3/LUC和SKOV-3/NK4细胞接种形成腹水瘤的裸鼠的累积生存率的差异。结果在SKOV-3/NK4培养基中有NK4蛋白表达,对照(SKOV-3和SKOV-3/LUC)细胞中无表达。磷酸化-c-Met在SKOV-3/NK4培养基培养的SKOV-3细胞中被抑制,而在对照(SKOV-3和SKOV-3/LUC)细胞培养基培养的SKOV-3细胞中正常表达。c-Met表达在各组差异无统计学意义。三种细胞体外生长曲线比较差异无统计学意义(P>0.05)。腹腔内接种SKOV-3/LUC细胞的裸鼠,均产生腹腔内种植肿瘤伴腹水形成,于50 d内相继死亡,而接种SKOV-3/NK4细胞的裸鼠生存期均大于70 d,差异有统计学意义(P<0.01)。结论SKOV-3/NK4细胞在培养基中大量分泌NK4蛋白,NK4能抑制人卵巢癌细胞c-Met受体磷酸化。在裸鼠体内NK4通过抗血管生成作用抑制卵巢癌细胞腹腔内种植瘤的生长和腹水形成,提高累积生存率,改善预后。NK4可作为卵巢癌基因治疗的新方法。

NK4基因转染对人卵巢癌细胞SKOV-3生物学特性的影响

目的通过在人卵巢癌细胞SKOV-3中转染NK4基因表达片段,研究NK4对人卵巢癌的治疗作用,从而验证NK4可作为卵巢癌潜在的基因治疗新策略。方法用NK4和荧光霉素表达质粒分别稳定转染人卵巢癌细胞SKOV-3。用West-ern blot检测细胞培养基中NK4蛋白表达,以及经不同培养基(SKOV-3、SKOV-3/LUC和SKOV-3/NK4培养上清)培养后SKOV-3细胞中c-Met和磷酸化-c-Met的表达。用MTT试剂盒绘制细胞生长曲线。用细胞划痕试验检测NK4对细胞转移的作用。结果在SKOV-3/NK4培养基中有NK4蛋白表达,对照(SKOV-3,SKOV-3/LUC)细胞中无表达。磷酸化-c-Met在SKOV-3/NK4培养基培养的SKOV-3细胞中被抑制,而在对照(SKOV-3,SKOV-3/LUC)细胞培养基培养的SKOV-3细胞中正常表达。c-Met表达在各组差异无统计学意义。三种细胞体外生长曲线差异无统计学意义(P>0.05)。细胞划痕试验表明SKOV-3/NK4划痕区域的细胞个数明显少于SKOV-3和SKOV-3/LUC细胞。结论 NK4蛋白在SKOV-3/NK4细胞培养基中大量分泌,NK4能抑制人卵巢癌细胞c-Met受体磷酸化,并能抑制卵巢癌细胞体外活动能力,为应用NK4作为卵巢癌基因治疗方法提供了研究基础。

shRNA沉默IDO基因的表达对裸鼠卵巢癌种植瘤生长的影响

目的研究短发夹RNA(shRNA)沉默吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)基因表达对裸鼠卵巢癌种植瘤生长的影响。方法 shRNA沉默IDO基因表达质粒和空白质粒分别稳定转染至人卵巢癌细胞株SKOV-3中,应用Western blot检测IDO在SKOV-3、SKOV-3/Mock和SKOV-3/shIDO细胞中的表达,MTT检测肿瘤细胞体外生长速度,观察各组裸鼠体内卵巢癌种植瘤的生长速度。结果 IDO蛋白在SKOV-3和SKOV-3/Mock细胞中有表达,而在SKOV-3/shIDO细胞中表达明显被抑制。SKOV-3、SKOV-3/Mock和SKOV-3/shIDO细胞在体外生长速度无统计学差异(P>0.05)。与SKOV-3和SKOV-3/Mock细胞比较,SKOV-3/shIDO细胞接种的肿瘤生长缓慢(P<0.05)。结论应用shRNA沉默IDO基因表达质粒稳定转染SKOV-3细胞,对卵巢癌细胞体外生长速度无影响,但可抑制裸鼠皮下卵巢癌种植瘤的生长。因此,IDO有望作为卵巢癌基因治疗的新靶点。