LC-MS/MS测定人血浆中对乙酰氨基酚及其人体药动学和生物等效性研究

目的建立一种快速、灵敏的高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法以测定人血浆中对乙酰氨基酚浓度,并应用于2种对乙酰氨基酚制剂的人体药动学和生物等效性研究。方法以替硝唑为内标,200μL血浆样品经1mL乙酸乙酯液液萃取,再经Waters XBridge■C18柱等度洗脱分离后导入串联质谱,以正离子多反应监测模式进行定量分析,对乙酰氨基酚和内标的选择性反应离子对分别是m/z152.0→110.0和248.0→121.0。方法经验证后应用于19名健康受试者单剂量空腹口服2种对乙酰氨基酚制剂500 mg后药动学和生物等效性的研究。结果血浆中对乙酰氨基酚在0.1~8.0μg·mL^-1范围内线性良好(r^2>0.99),最低检测限为0.1μg·mL^-1,提取回收率为91.0%~98.7%,日内和日间准确度分别为98.8%~111.3%(精密度≤9.0%)和94.9%~102.6%(精密度≤10.7%)。生物等效性试验中,受试制剂与参比制剂的主要药代动力学参数Cmax、AUC0-12 h和AUC0-∞几何均值比的90%置信区间分别为83.50%~105.79%,94.25%~101.54%和93.24%~101.02%,均落在生物等效可接受标准的80.00%~125.00%。结论所建立测定人血浆中对乙酰氨基酚浓度的LC-MS/MS具有快速灵敏、回收率高、选择性好的特点,适用于对乙酰氨基酚片人体药动学和生物等效性研究。受试制剂与参比制剂在人体内吸收速度和程度相似,2种制剂生物等效。