超声显像膈肌功能联合心电监测CO_2在AECOPD伴Ⅱ型呼吸衰竭患者无创通气中的应用

目的超声显像膈肌功能联合心电监测CO_2评估及预测AECOPD伴Ⅱ型呼吸衰竭患者无创通气的治疗效果。方法 65例已诊断AECOPD伴Ⅱ型呼吸衰竭的患者予常规药物治疗及无创通气,监护仪监测呼气末CO_2等,超声诊断仪测膈肌厚度计算膈肌增厚率。结果成功组52例及失败组13例,两组治疗前及成功组治疗后呼气末CO_2与PaCO_2具有较好的相关性,失败组治疗后无相关性。成功组及失败组的膈肌增厚率有显著的统计学差异(P<0.05)。结论超声显像膈肌功能联合心电监测CO_2,对AECOPD伴Ⅱ型呼吸衰竭患者无创通气具有评估及预测价值。

无创通气对AECOPD合并Ⅱ型呼吸衰竭伴焦虑及抑郁患者的临床疗效

目的观察无创通气对已综合评估为C组或D组AECOPD(慢性阻塞性肺病急性加重)合并Ⅱ型呼吸衰竭及伴焦虑、抑郁患者的临床疗效。方法 80例已综合评估为C组或D组的AECOPD合并Ⅱ型呼吸衰竭,并伴有焦虑及抑郁的患者,分别随机分为对照组、研究组,所有患者均给予常规的药物治疗;研究组在常规药物治疗基础上加用无创通气。结果研究组与对照组相比,Pa O2、FEV1%预计值升高更明显,Pa CO2下降更显著,PH值、呼吸频率更接近于正常值,同时焦虑评分、抑郁评分也更接近于正常值,上述几种影响因素与对照组相比均具有统计学意义(P<0.05)。结论无创通气对已综合评估为C组或D组AECOPD合并Ⅱ型呼吸衰竭及伴焦虑、抑郁的患者有明显的治疗效果。焦虑、抑郁也是评估AECOPD疗效的重要因素。

SHP-2酪氨酸磷酸酶激活突变的肥大细胞对IL3呈高增殖敏感性

目的研究SHP-2酪氨酸磷酸酶激活突变的肥大细胞对白细胞素3(IL3)呈高增殖敏感性的机制。方法从野生型(WT组)、SHP-2杂合突变型(SHP-2D61G/+)小鼠骨髓中获取髓系细胞,运用细胞集落形成实验观察髓系细胞集落形成能力,用不同剂量的IL30、0.2、2.0、10.0ng/ml)诱导比较两组髓系细胞形成集落数的差异。从髓系细胞中分离培养出肥大细胞,MTS法观察肥大细胞在IL3诱导下的细胞增殖性,Westernblot比较肥大细胞中Erk、Akt的表达及磷酸化水平,免疫共沉淀和Westernblot检测肥大细胞中SHP-2与Gab2结合能力。结果 SHP-2D61G/+组比WT组的髓系细胞集落形成能力增强;IL3诱导下的肥大细胞在SHP-2D61G/+组显示了更高的增殖活性;SHP-2D61G/+组肥大细胞中Erk和Akt的磷酸化水平较WT组明显升高;SHP-2D61G/+杂合突变后与Gab2结合能力增高。结论 SHP-2D61G/+的肥大细胞对IL3呈高增殖敏感性,其分子机制可能与SHP-2D61G/+与Gab2的结合能力增强,从而进一步参与对IL3介导的Ras-Erk、PI3K-Akt信号通路的正调控作用有关。

酮替芬联合α-细辛脑佐治喘息性支气管炎62例的疗效分析

目的探讨酮替芬联合α-细辛脑对喘息性支气管炎的疗效及安全性。方法收集2013年3月至2014年4月我院呼吸内科收治的62例喘息性支气管炎患者为研究对象,按照随机数字表的分组方法分为对照组与观察组,对照组给予氨茶碱,观察组给予酮替芬联合α-细辛脑治疗。比较两组患者治疗中临床症状改变的时间、治疗有效率及安全性。结果治疗后,观察组咳嗽、喘息、肺部啰音、及肺部痰鸣音的持续时间均少于对照组,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗总有效率高于对照组,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗过程中出现轻微胃肠道反应及皮疹,不良反应轻微,经积极处理后症状消失。结论酮替芬联合α-细辛脑可缩短喘息性支气管炎临床症状的持续时间,提高治疗的有效率,且未见严重不良反应,值得临床推广应用。

miR-17-5p通过靶向HDAC4抑制PMEC细胞凋亡及促进EMT

目的 探讨miR-17-5p在人肺黏液表皮样癌(PMEC)中的作用及其潜在机制。方法 实时荧光定量PCR(qPCR)检测PMEC组织和细胞中miR-17-5p的表达。CCK-8、细胞凋亡和Transwell实验评估miR-17-5p对PMEC细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。生物信息学预测及荧光素酶报告基因检测验证组蛋白去乙酰酶4 (HDAC4)为miR-17-5p靶标。蛋白印迹分析上皮-间充质转化(EMT)相关信号分子N-钙黏蛋白、波形蛋白及凋亡相关信号分子Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3的表达。结果 miR-17-5p和HDAC4在PMEC中高表达。miR-17-5p促进PMEC细胞增殖、迁移、侵袭并抑制细胞凋亡。HDAC4是miR-17-5p的直接靶标。miR-17-5p正向调控HDAC4表达。同时,miR-17-5p通过靶向HDAC4上调N-cadherin、Vimentin和Bcl-2的表达,下调Bax和Cleaved Caspase-3的表达。结论 miR-17-5p在PMEC中通过靶向HDAC4促进细胞增殖和EMT,抑制细胞凋亡。表明miR-17-5p/HDAC4通路参与了PMEC的进展。miR-17-5p有望成为PMEC治疗的靶标。

SHP-2酪氨酸磷酸酶激活突变促进白细胞黏附和迁移的观察

目的采用已经建立的SHP-2 D61G基因敲入小鼠为研究对象,观察SHP-2激活突变是否对白细胞的黏附、侵袭及细胞因子分泌产生影响,并探讨可能的分子机制。方法常规分离小鼠白细胞,Fibronectin黏附实验检测细胞黏附能力并用结晶紫染色定量,Transwell小室分析细胞迁移,半定量RT-PCR分析白细胞介素-2(IL-2)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达,ELISA法检测细胞培养上清中IL-2及TNF-α浓度,凝胶阻滞实验分析白细胞内NF-κB核内转移情况。结果 SHP-2D61G/+激活突变的小鼠白细胞黏附、迁移能力较对照小鼠的白细胞明显增强;突变小鼠白细胞IL-2及TNF-α mRNA表达丰度明显增高,其培养上清中IL-2、TNF-α浓度也相应升高;突变小鼠白细胞NF-κB核内转移明显增多。结论 SHP-2激活突变后可能通过增强的NF-κB信号途径,促进白细胞黏附并侵袭;同时增强其分泌炎症因子的能力,可能介导多器官损伤。

环状RNA circ-FOXM1降低克唑替尼对肺癌细胞抑制效果的作用机制研究

目的探讨环状RNA circ-FOXM1降低克唑替尼对肺癌细胞抑制效果的作用机制。方法构建克唑替尼耐药肺癌细胞株H2228/CR。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测circ-FOXM1在BEAS-2B、H2228、H2228/CR细胞中的表达。将H2228细胞分为circ-FOXM1过表达组和过表达对照组。将H2228/CR细胞分为circ-FOXM1沉默组和沉默对照组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的半抑制浓度(IC_(50))。经克唑替尼干预处理后,采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率,采用Transwell实验检测各组细胞迁移数,采用Western blot实验检测各组细胞磷酸化的磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化的蛋白激酶B(p-AKT)、蛋白激酶B(AKT)的表达水平。结果H2228/CR细胞circ-FOXM1表达水平高于H2228细胞,H2228细胞circ-FOXM1表达水平高于BEAS-2B细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。克唑替尼对过表达组细胞的IC_(50)显著高于过表达对照组细胞(P<0.05)。克唑替尼对沉默组细胞的IC_(50)显著低于沉默对照组细胞(P<0.05)。经克唑替尼干预处理后,过表达组的细胞凋亡率低于过表达对照组,细胞迁移数、p-PI3K/PI3K比值、p-AKT/AKT比值均高于过表达对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。沉默组的细胞凋亡率高于沉默对照组,细胞迁移数、p-PI3K/PI3K比值、p-AKT/AKT比值均低于沉默对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论circ-FOXM1可能通过激活PI3K/AKT信号通路降低克唑替尼对肺癌细胞的抑制效果。

余甘子提取物通过miR-34a对高糖诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的 研究余甘子提取物对高糖诱导的PC12细胞损伤的保护作用和作用机制。方法 用高糖诱导PC12细胞损伤,并用余甘子提取物处理PC12细胞或通过细胞转染使miR-34a过表达。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞存活率,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用蛋白质免疫印迹(Western blot)检测B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)和B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)蛋白表达。采用荧光法检测活性氧(ROS)水平。采用试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-34a的表达。结果 余甘子提取物明显提高高糖诱导的PC12细胞存活率、SOD和GSH-Px水平(LSD-t值分别为-9.62、-9.64和-12.04,P<0.05),明显降低凋亡率,Bax/Bcl-2比值,ROS、IL-6、IL-1β和miR-34a水平(LSD-t值分别为24.64、25.63、20.63、11.21、13.47和13.88,P<0.05)。miR-34a过表达明显降低高糖诱导的PC12细胞存活率、SOD和GSH-Px水平(LSD-t值分别为5.95、6.87和7.21,P<0.05),明显提高凋亡率;Bax/Bcl-2比值,ROS、IL-6和IL-1β水平(LSD-t值分别为-9.64、-12.47、-6.69、-8.21和-8.99,P<0.05)。甘子提取物可逆转miR-34a过表达对高糖诱导的PC12细胞的影响。结论 余甘子提取物对高糖诱导的PC12细胞损伤具有保护作用,其机制可能与余甘子提取物抑制miR-34a表达进而降低氧化应激与炎症反应有关。