猪流行性腹泻病毒的分离及适应传代细胞培养病毒株的建立

作者从广东地区表现有流行性腹泻症状的病猪采集的病料通过在细胞维持液中加入每 ml 含60μg 胰酶量的细胞培养方法,可使 Vero 传代细胞在培养24小时,60%细胞出现细胞融合,形成合胞体等特征的细胞病变,并且,经过动物回归试验、电子显微镜观察、血清学、病毒核酸型鉴定和理化特性等试验结果表明,分离获得的病毒分离物为猪流行性腹泻病毒(PEDV)分离获得的 PEDV,在含有胰酶的细胞维持液条件下,用 Vero 传代细胞培养传代12代,转入不加胰酶条件下,再用 Vero 传代细胞传19代,PEDV 可适应于 Vero 传代细胞生长,并出现有特征的细胞病变,继后,转用 PK15传代细胞再传22代,PEDV 已能适应于 PK15传代细胞生长,其细胞病变程度较 Vero 传代细胞更明显易看,PEDV 在 Vero、PK15传代细胞培养物中连续传53代.转用 ST 传代细胞培养,再传4代,可见 ST 传代细胞出现明显的细胞病变.本试验证明、将分离的 PEDV 先后适应于 Voro、PK15和ST 传代细胞的方法是成功的,并已使之成为适应传代细胞的 PEDV 细胞毒株,命名为 PEDV-G1株,其毒价为10^(-5·37-6·1)TCID_(50)/0.05ml。

使用细胞培养单层分离猪流行性腹泻病毒

1971年,在英国的猪群中首次发现猪流行性腹泻(PED),直至1978年,英国和比利时才证实,引起PED的病原体为冠状病毒PED和猪传染性胃肠炎(TGE)是由不同血清型的冠状病毒引起危害以消化器官为主的两个类似的猪的传染病。因此,单靠临床症状和组织病理学检查来作出鉴别诊断是比较困难的,必须借助于血清学和病原学的检验。但是,由于在细胞培养物中使用胎牛血清会起到抑制冠状病毒吸收进入细胞膜受体的作用,使PED病毒在细胞培养物中生长繁殖受阻,从而对PED病毒的应用研究带来了一定的困难。据报道,

Q热微量补体结合试验

应用乙醚提取法制备的 Q 热抗原,参照西德补体结合试验微量法检洲进口牛、本国牛、牛鼻气管炎(IBR)免疫牛、牛流行热(BEF)免疫牛、牛病毒性腹泻-粘膜病中和抗体阳性牛及猴子血清共384份。结果表明,新制备的抗原特异、敏感,试验方法简便,可作为 Q 热的有效常规普查方法。

猪流行性腹泻病毒株的建立与应用

猪流行性腹泻病毒PED-G1病毒株是从广东省表现有流行性腹泻病的某猪场的病猪病料中分离获得。在每毫升维持液中加60微克胰酶,将PEDV分离物接种于Vero传代细胞上培养24—48小时,Vero细胞呈现细胞融合、形成合胞体等特征的细胞病变。经动物回归、电子显微镜观察、血清学方法、理化性质测定以及病毒核酸鉴定等方法检验,确定分离物为冠状病毒科中的猪流行性腹泻病毒。 经驯化,该病毒株可以在维持液中不加胰酶成份条件下先后适应于Vero、PK_(15)、ST等传代细胞上培养、增殖,这在国内外文献中尚未见到。该病毒株在PK_(15)和ST细胞上产生的细胞病变比在Vero细胞上呈现更为明显,更容易观察。它在PK_(15)细胞上病毒毒价可达10^(-7)TCID_(50)/0.05ml。 建立了用该毒株以PK_(15)传代细胞进行微量血清中和试验方法,它不与TGE等阳性血清中和。检测出发病过程和免疫过的猪血清呈阳性反应。表现特异性好、敏感、准确,可做为PED特异性诊断方法,比用胎猪小肠原代细胞或用Vero细胞加胰酶处理的方法具有来源和应用方便、准确和经济等优点。 用Vero、PK_(15)等传代细胞繁殖该病毒作为抗原制备油佐剂灭活疫苗,免疫动物安全性好,保护率高,区域防制效力达96％以上,最后达到疫病安全控制,具有经济、有效、安全、方便等优点,可以?

从荷兰到中国表演的1只狗发生诺卡氏菌病

1993年6月10日,欧洲明星梦幻特技团携带演艺动物10只拳狮狗和9只狮子狗从荷兰经香港抵达中国深圳。演出8天后,在广州停留期间,1只狮子狗死亡。经临床检查、解剖、病理切片、病料镜检、病原分离等鉴定,诊断为诺卡氏菌病。这是我国首次发现入境动物中狗的诺卡氏菌病(Nocardia)。