血清AFP临界值判断对肝癌诊断的影响

为探讨血清AFP诊断肝癌的合理临界值,本研究收集肝癌患者35例、正常对照者35例。血清AFP检测采用电化学发光法和酶联免疫吸附法(ELISA)定量,结果用t检验和χ2检验进行统计学分析。2种方法检测血清AFP水平显著相关,相关系数为0.978,检测值无显著性差异,P>0.05。二者ROC曲线下面积分别为0.890、0.880,说明血清AFP水平对肝癌诊断价值较高。按照约登指数最大原则确定血清AFP电化学发光法诊断肝癌的临界值为3.25μg/L,其敏感度为74.3%,特异度为94.3%,准确度为84.3%;ELISA法诊断肝癌的临界值为1.118μg/L,其敏感度为62.9%,特异度为100%,准确度为81.4%。而以目前常规临界值20μg/L来分析,则电化学发光法检测AFP诊断肝癌的敏感度仅为45.7%,特异度100%,准确度72.9%;ELISA法敏感度48.6%,特异度100%,准确度74.3%。因此合理降低临界值可有效提高血清AFP水平对肝癌的诊断价值。

蚕丝丝素膜AFP免疫传感器的研究

目的:探索用新型生物材料蚕丝丝素膜制备免疫传感器实现对样本中抗原或抗体的检测。方法:以蚕丝丝素蛋白作为电极敏感膜载体制成抗体膜电极,再以蚕丝丝素空白膜电极作为外参比电极,两者与离子计一起共同组成膜电位测定体系,对AFP进行直接电位法测定,并与电化学发光免疫法比较。结果:家蚕丝素经高浓度中性盐氯化钙溶解后制备的蚕丝丝素膜光亮透明,厚薄均匀,机械性能好,生物大分子经丝素膜固定后,活性较高、性能稳定、能长期存放。该方法简单快速、不需标记、无污染、成本低。灵敏度达到μg/L数量级,线性范围为10~400μg/L,线性相关系数r=0.987。结论:由蚕丝丝素膜制备的电化学免疫传感器有一定的研究应用价值,但其响应低的问题还有待进一步改进。

从重点课程向精品课程迈进的几点思索

精品课程建设是高校“质量工程”的重要内容之一,结合国内的形势以及本科室的情况,本人对我室如何从重点课程向精品课程迈进提出了一些设想,主要针对如何加强教学队伍建设以及生化课程建设作了阐述,希望在改革与建设中使作为生物类和医药类院校重要基础课程之一的“生物化学”的教与学又上一个台阶。

就业压力下生物化学实验教学改革的研究

我国大学扩招后,大学生就业难的问题已越来越成为社会和学校关注的焦点.2012年全国高校毕业生680万,2013年700万,2014年预计727万.许多毕业生难以找到适合的工作,而另一方面,企事业单位的人才缺口依然很大,招不到合适的能胜任岗位工作的应届毕业生,普遍反映应届毕业生经验缺乏,实践能力弱,培训周期长,解决实际问题的能力欠缺.

紧密连接蛋白claudin-1和claudin-2表达载体的构建

目的:为进一步研究紧密连接蛋白claudin-1和claudin-2在结肠直肠癌中的作用,分别构建包含claudin-1和claudin-2基因编码区的重组质粒,并在人类结肠癌细胞株T84中表达。方法:从T84细胞中提取总RNA,反转录PCR获得cDNA,插入pCRⅡ-TOPO质粒中测序鉴定。将测序正确的cDNA连接入pcDNA3.1(-)表达载体,进一步测序鉴定后转染入T84细胞,并采用反转录荧光定量实时PCR技术及Western blot技术检测重组质粒在T84细胞中的表达。结果:重组质粒经限制性内切酶酶切鉴定和DNA序列分析,显示所克隆的DNA分子大小及序列正确。经重组质粒转染的T84细胞能大量稳定地表达目标蛋白。结论:本研究成功地构建了claudin-1/pcDNA3.1(-)和claudin-2/pcDNA3.1(-)重组表达质粒,并能在结肠癌细胞中稳定表达。

Urit-12血红蛋白分析仪的临床应用探讨

Urit-12血红蛋白分析仪是一种技术世界领先的干化学试纸式血红蛋白定量测定仪，它小巧便携．操作简单、检测快速，仅用一滴指血在30s之内可以检测出患者的血红蛋白含量水平，在临床上有非常广泛的应用。操作简单是这款仪器的最大特点．它的操作可简单分为三步，即使是非实验室人员．也可经简单培训后正确地使用：

血管内皮生长因子在门静脉高压大鼠腹水形成中的作用

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）在门静脉高压大鼠腹水形成中的作用。方法将雄性SD大鼠随机分为3组：门静脉结扎（PVL）组32只,假手术（SO）组16只,门静脉结扎联合沙利度安治疗（PVL-T）组8只。为诱导腹水形成,于手术后第1、3、5、7天分批给予每只大鼠腹腔注射33.33%葡萄糖溶液1mL,30min后收集腹水标本并测总量,同时采用ELISA检测腹水中VEGF含量;留取肠系膜组织作VEGF免疫组化染色和实时RT-PCR检测。结果术后第1、3天PVL组大鼠腹水总量和VEGF含量明显大于SO组（P〈0.05）,术后第5、7天PVL组大鼠腹水总量和VEGF含量与SO组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,术后第3天PVL-T组腹水总量明显低于PVL组[分别为（3.4±0.27）mL、（4.92±1.53）mL,P〈0.05）]。组织学检查PVL组肠系膜可见较多扩张血管。PVL组VEGF呈强阳性表达,而SO组VEGF则呈弱阳性表达,且表达部位多为血管内皮细胞胞浆;PVL-T组肠系膜VEGFmRNA表达明显降低（P〈0.05）。结论门静脉高压可增加由于渗透性改变所致大鼠腹水形成,VEGF高表达可能与大鼠腹水形成有关。

荔枝核总黄酮抑制人肝星状细胞增殖作用机制的研究

目的研究荔枝核总黄酮(TFL)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肝星状细胞(HSC-LX2)增殖与核因子-k B(NF-кB)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法体外培养HSC-LX2,TGF-β1刺激24 h后给予不同浓度的TFL(80、160、320、640、800μg/ml)干预;给药后24、48、72 h,用MTT法分别检测TFL对HSC-LX2增殖的影响;采用半定量PCR检测各组NF-кB、α-SMA mRNA的表达;Western blot检测NF-кB、α-SMA蛋白的表达情况。结果 MTT检测结果显示TFL呈时间依赖性抑制TGF-β1诱导HSC-LX2增殖,以作用48 h最为明显,其半数抑制浓度(IC50)为302μg/ml。TFL各剂量组作用48 h后,HSC-LX2细胞中NF-кB和α-SMA基因和蛋白的表达水平都降低,尤以300μg/ml和600μg/ml药物浓度组较明显,与对照组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论 TFL在体外对TGF-β1诱导的HSC-LX2的增殖有抑制作用,其作用机制可能是通过抑制细胞中NF-кB的表达,从而起到抗肝纤维化的作用。

社会实践对大学生价值观的导向作用研究

进入新的世纪,我国社会正处于转型的关键时期,人们的价值观念也随之发生变化。尤其是大学生群体,由于教育的缺失,造成大学生主导价值观迷失的状况,取而代之的是多元化的价值体系、个人化的价值取向以及功利化的价值判断标准。对此,应积极从大学生价值观教育的目标、内容和方法三个方面寻求科学合理的价值观教育模式,重视社会实践对大学生价值观的导向作用。

金融危机背景下中小企业生态位演化机理与调适策略

在历次金融危机中,中小企业所受冲击和伤害最为严重,生态位受损,生存能力弱化,甚至有许多中小企业纷纷倒闭。金融危机背景下中小企业生态位演化在宏观上一般遵循从外到内的路线变动,微观上一般按从上到下的次序发生,表现出生态空间塌缩、生态资源重叠、生态活力衰变和生态危机共生机理。为有效应对金融危机,中小企业应采取强化企业生存力的空间拓缩策略、凝聚组织发展力的生命周期策略、优化产品竞争力的品牌博弈策略、提升自我整合力的价值链接策略和构筑社会支持力的战略联盟策略。

门静脉高压大鼠腹膜血管内皮生长因子的表达及意义

目的探讨门静脉高压大鼠腹膜血管内皮生长因子(VEGF)的表达及意义。方法雄性SD大鼠随机分为3组:门静脉结扎(PVL)组32只,假手术(SO)组16只,门静脉结扎联合沙利度安治疗(PVL-T)组8只。为诱导腹水形成,于手术后第1,3,5,7天分批给予每只大鼠腹腔注射33.33%葡萄糖溶液1mL,30min后收集腹水标本并测总量,同时采用ELISA测定腹水中VEGF含量;留取腹膜组织做VEGF免疫组化染色和实时RT-PCR。结果术后第1、3天PVL组大鼠腹水总量和VEGF含量显著大于SO组(P<0.05),术后第5、7天大鼠腹水总量和VEGF含量在PVL组和SO组之间无显著性差异(P>0.05),术后第3天PVL-T组腹水总量显著低于PVL组(3.4±0.27mLvs4.92±1.53mL,P<0.05)。免疫组化结果显示PVL组VEGF呈强阳性表达,而SO组VEGF则呈弱阳性表达,且表达部位多在腹膜间皮细胞、巨噬细胞胞浆;实时RT-PCR结果表明PVL组腹膜VEGFmRNA表达显著高于SO组(P<0.05)。结论门静脉高压可增加由于渗透性改变所致大鼠腹水形成,腹膜VEGF高表达可能与大鼠腹水形成有关,抑制VEGF活性可能是治疗门静脉高压所致腹水的一种新的治疗策略。

酒精对锥体外系MDA、SOD的影响

目的 :探讨酒精对锥体外系影响的不良机制。方法 :4 8只 8周龄雌性幼鼠随机分成对照组、低、中和高浓度组 ,分别用不同浓度的酒精 (0 %、12 .5 %、2 5 %和 5 0 % )灌喂 ,按 10 m l/kg,隔天 1次 ,90 d后 ,分别对各浓度组小鼠进行灌酒前、后转棒试验。转棒试验结束后快速取出小脑和尾壳核 ,并测量其丙二醛 (MDA)含量和超氧化物歧化酶 (SOD)活性。结果 :90 d后 ,高浓度组小鼠在继续灌酒前、后在棒上停留时间均减少 ,中浓度组小鼠灌酒后在棒上停留时间减少 ;高、中浓度组小脑和尾壳核的SOD活性降低 ,高浓度组小鼠小脑和尾壳核的 MDA含量升高 ,中浓度组小鼠小脑 MDA含量也升高。结论 :酒精致锥体外系功能障碍与小脑、尾壳核的 SOD活性降低和 MDA含量升高有关。

沙利度胺对门脉高压大鼠腹水形成的影响

目的探讨沙利度胺(thalidomide,T)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对门脉高压大鼠腹水形成的影响。方法雄性SD大鼠随机分为3组:门静脉结扎(portal vein ligation,PVL)组20只,假手术(sham-operated,SO)组10只,门静脉结扎联合沙利度胺治疗(PVL-T)组10只。为诱导腹水形成,于手术后第3天分别给予每只大鼠腹腔注射33.33%葡萄糖溶液1 mL,30 min后收集腹水标本并测总量,同时采用ELISA测定腹水中VEGF含量;留取肠系膜组织作VEGF免疫组化染色和实时RT-PCR。结果PVL组大鼠腹水总量和VEGF含量显著大于SO组(P<0.05),PVL-T组腹水总量显著低于PVL组(P<0.05)。组织学结果表明PVL组肠系膜可见较多扩张血管,免疫组化结果显示PVL组VEGF呈强阳性表达,而SO组VEGF则呈弱阳性表达,且表达部位多在血管内皮细胞胞浆;实时RT-PCR结果表明肠系膜VEGF mRNA表达在PVL-T组显著降低(P<0.05)。结论门静脉高压可增加由于渗透性改变所致大鼠腹水形成,VEGF高表达可能与大鼠腹水形成有关。

肥胖患者解偶联蛋白-1和β_3-肾上腺素能受体基因变异的研究

目的：探讨解偶联蛋白－１（ＵＣＰ－１）和β３－肾上腺素能受体（β３－ＡＲ）基因在肥胖人群中的变异及其对肥胖患者基础代谢率（ＢＭＲ）和体重指数（ＢＭＩ）的影响。方法：应用聚合酶链反应产物限制性酶切片段长度多态性检测法测定ＵＣＰ－１基因Ａ→Ｇ（－３８２６）变异和β３－ＡＲＴｒｐ６４Ａｒｇ突变并作基因分型，分析突变等位基因与ＢＭＲ和ＢＭＩ的相关性。结果：本研究肥胖人群ＵＣＰ－１野生型等位基因（Ａ）和突变型等位基因（Ｇ）的频率分别为０．７１７０和０．２８９９。β３－ＡＲ野生型等位基因（Ｔｒｐ６４）和突变型等位基因（Ａｒｇ６４）的频率分别为０．８４４２和０．１５５８。ＵＣＰ－１和β３－ＡＲ基因均有变异的肥胖患者与该两基因均无变异的肥胖患者相比，ＢＭＲ降低和ＢＭＩ增高分别显示极显著意义（Ｐ＜０．０１）和显著意义（Ｐ＜０．０５）。结论：ＵＣＰ－１基因Ａ→Ｇ（－３８２６）变异和β３－ＡＲＴｒｐ６４Ａｒｇ突变与肥胖患者ＢＭＲ降低和体重增加相关，两基因的变异对ＢＭＲ和ＢＭＩ的影响存在加合作用。

荔枝核总黄酮对TGF-β_1诱导人肝星状细胞凋亡的影响及机制

目的探讨荔枝核总黄酮(TFL)对转化生长因子β_1(TGF-β_1)诱导的人肝星状细胞(HSC-LX2)凋亡的影响,探讨其相关的分子机制。方法将培养好的HSC-LX2随机分为正常组、TGF-β_1组及150、300、600 mg/L TFL组。正常组常规培养;其他四组接种于含10%FBS的DMEM+5μg/L TGF-β_1、培养皿中培养24 h后,150、300、600 mg/L TFL组分别加入150、300、600 mg/L TFL继续培养48 h。用Hoechst33258染色法观察各组细胞形态学变化;用流式细胞术检测细胞周期;用FITC Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡情况;用Western blotting法检测细胞中Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)、白细胞介素1受体Ⅰ(IL-1RⅠ)蛋白表达。结果正常组、TGF-β_1组细胞核形态完整,TGF-β_1组细胞增殖活跃;150、300、600 mg/L TFL组可见细胞核固缩、裂解、凋亡小体形成等细胞凋亡形态学变化。随TFL浓度升高,TFL组G0/G1期细胞增多(P<0.05),S期细胞减少(P<0.05)。随TFL浓度升高,TFL对HSC-LX2凋亡具有促进作用,更倾向于促进细胞晚期凋亡。150、300、600 mg/L TFL组TLR4、NF-κB、IL-1RⅠ蛋白表达量低于TGF-β_1组(P均<0.05);且随TFL浓度升高,HSC-LX2内TLR4、NF-κB、IL-1RⅠ蛋白表达量逐渐降低(P均<0.05)。结论 TFL可促进TGF-β_1诱导的HSC-LX2细胞凋亡,尤其促进细胞晚期凋亡;其分子机制可能与降低细胞内TLR4、NF-κB、IL-1RⅠ的表达有关。

从身心关系论他心知何以可能

在心灵哲学的两大领域,即本体论和认识论中,身心关系和他心知问题历来争论不休,产生了哲学行为主义、同一理论、功能主义以及属性二元论、实体二元论或身心平行论、方面二元论等身心理论形态以及众多假说。本文站在唯物主义反映论立场上,认为对他心的认知具有现实可行性,他心知是可能的。