铜绿假单胞菌二氢硫辛酸酰胺脱氢酶的重组表达及其与脂蛋白(a)的相互作用

【目的】二氢硫辛酸酰胺脱氢酶(Dihydrolipoamide dehydrogenase,Lpd)是铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)表面的一种纤溶酶原(Plasminogen,Plg)受体,旨在研究Lpd与脂蛋白(a)[Lipoprotein(a),Lp(a)]以及Plg之间的相互作用。【方法】用大肠杆菌表达rLpd及其突变分子(rLpd K476A、rLpd K477A、rLpdΔKKR),用酶联免疫吸附实验(ELISA)、亲和色谱层析及Western blot等技术检测rLpd及其突变分子与Lp(a)、Plg的相互作用。【结果】ELISA及亲和色谱层析实验结果表明,rLpd可以与Lp(a)结合但不与LDL结合,Lp(a)与rLpdΔKKR的结合能力显著低于其与rLpd的结合能力。1 mmol/L的赖氨酸类似物6-氨基己酸(EACA)对rLpd与Lp(a)的结合有显著的抑制作用。1 000μg/L的Lp(a)对rLpd与Plg的结合起到显著的抑制作用。【结论】Lpd能够与Lp(a)特异性结合,其476和477两个相邻的赖氨酸残基是与Lp(a)结合的主要位点,Lp(a)可以竞争性地抑制rLpd与Plg的结合。

抗原纯化对猪支原体肺炎灭活疫苗免疫效果的影响

为了评价优化猪支原体肺炎灭活疫苗的免疫效果,本试验通过对比所选疫苗优化前后疫苗抗原浓度及总蛋白浓度,以及检测异种受试动物的存活率、增重情况、血常规及血生化指标等,对疫苗的纯度、安全性进行了评估。结果显示,相对于未纯化疫苗,使用25佐剂的优化疫苗(C5)的抗原纯度及抗原浓度均有显著的升高,其安全性得到了显著的改善。优化疫苗(C5)的抗原纯度、抗原浓度及安全性都与进口疫苗(J1)相当,优于进口疫苗(J2)。该产品的优化为未来单针疫苗及联苗的研发打下了基础。